【国家标准(GB)】 食品卫生微生物学检验 副溶血性弧菌检验

GB 4789.7—1994
中华人民共和国国家标准
食品卫生微生物学检验
副溶而性弧菌检验
Microbiological examination of foodhygieneExaminationofVibrioparahaemolyticusGB 4789.7—1994
1主题内容与适用范围
本标准规定了副溶血性弧菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中副溶血性弧菌的检验。2引用标准
GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料
3.1试管：20mm×200mm，15mmX100mm。3.2吸管1mL，5mL，10mL。
平皿：皿底直径90mm。
3.4广口瓶或三角瓶。
电动均质器或乳钵。
酒精灯。
接种灯和接种环。
3.8试管架。
3.10载玻片。
温箱。
显微镜。
培养基和试剂
氯化钠结晶紫增菌液：按GB4789.28中4.39规定。4.1
氯化钠蔗糖琼脂：按GB4789.28中4.40规定。4.3
嗜盐选择性琼脂：按GB4789.28中4.41规定。4.43.5%氯化钠三糖铁琼脂：按GB4789.28中4.42规定。4.5
氯化钠血琼脂：按GB4789.28中4.43规定。4.6嗜盐性试验培养基：按GB4789.28中4.44规定。3.5%氯化钠生化试验培养基：按GB4789.28中4.45规定。4.7
4.8革兰氏染色液：按GB4789.28中2.2规定。4.9
甲基红试剂：按GB4789.28中3.4规定。4.10靛基质试剂：按GB4789.28中3.13规定。4.11V-P试剂：按GB4789.28中3.4规定。5检验程序
副溶血性弧菌检验程序如下：
中华人民共和国卫生部1994—03—18批准1994—09—01实施
GB4789.7—1994
6操作步骤
6.1分离培养：首先称取25g，加225mL3.5%灭菌盐水，用均质器打碎或用乳钵磨碎，接种氯化钠琼脂平板和嗜盐菌选择性琼脂平板各1个，同时取10mL，加入100mL增菌液中，放37℃8～16h培养后，涂上述平板进行分离，于37℃18～24h培养后取出观察。
6.2挑取上述可疑菌落，转种3.5%氯化钠三糖铁斜面，37℃、24h观察结果。6.3涂片镜检：将三糖铁培养基反应可疑者（底层变黄葡萄糖产酸不产气，斜面不变乳糖蔗糖不分解，有动力，不产生硫化氢）进行涂片革兰氏染色镜检形态。6.4嗜盐性试验：将上述可疑培养物分别接种于不同浓度的盐陈水中，37℃24h培养后观察生长情况，在无盐和10%以上盐不陈水中不生长，在7%盐的陈水中生长良好者进行下列有关试验。6.5生化试验：分别接种各类生化培养基，放37℃，除V-P、靛基质、甲基红试验培养48h后加试剂观察外，其他均可在24h观察。葡萄糖产酸
葡萄糖产气
甘露醇
硫化氢
甲基红
注：+阳性；-阴性；+/-多数阳性，落少数阴性。
副溶血性弧菌
V.parahaemolyticus
溶藻性弧菌
V.alginolyticus
01霍乱弧菌
V.choleraeon
非0霍乱弧菌
V.choleraenonOr
拟态弧菌
V.mimicus
河弧菌www.bzxz.net
V.fluialis
创伤弧菌
靛基质
赖氨酸
鸟氨酸
精氨酸
副溶血性弧菌主要性状与其他弧菌的鉴别精
中华人民共和国卫生部1994—03—18批准明
1994—09—01实施
盐陈水，%
GB 4789.7—1994
V.uuluificus
梅氏弧菌
V.metschnikouii
霍利斯弧菌
V.hollisae
V.damsela
动物试验
将上述各类反应的副溶血性弧菌接种3.5%氯化钠陈水，经37℃16～18h培养后，小鼠腹腔注射0.3mL，观察2～3d，将死亡小鼠进行解剖并做分离培养附加说明：
本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责解释。本标准主要起草人周桂莲。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。中华人民共和国卫生部1994—03—18批准1994—09—01实施
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