【国家标准(GB)】 刑事技术微量物证的理化检验 第3部分: 分子荧光光谱法

CB/I19267.3—2003
GB/T19867事技术微量物证的昼化检验3分为12个部分：第1部分，红外收收光谱法；
第2部分：紫外可见吸收光诺法：第：部分：分于伙光光谱法：
第4粥分：原丁发射光增法，
第 5部分;原子股收光谱法;
第心部分扫描出了显微境法：
一第7部分：气相色谱-质谱法！一第部分显微分为光度法；
亲9部分：薄尽色谱法：
第10郝分，气扣任诺法：
第11部分：高效液相色谱法！
—·第12帮分：热分析法
本部分为GB/T19267第3部分，
木部分全原州提术弥准化技术委员会(CSBTS/TC:79)提出并归口。本部分的起学单位：中国州事警孩学院。木帮分起单人王学。
1范围
刑事技术微量物证的理化检验
第3部分：分子荧光光谱法
本部分规是了分子卖光龙语的检验法：GH/T19267.3—20D3
本部分适用二刑率技术款域中微量物证的划化检验，他领城办以参照用。2规范性引用文件
下列文件中能条款通过H/19257的本部分的引成为本部分的款。月起注期前引月立件，式陷所的修改单（不位括故关的内容)或参订版与不谨用于本部分，然而，故弱根据本部分达成协议的各方讲究是凸可使用这文的最新版，凡是不行日期的引用文件，其展新版本适书于木G/T13866992分折器术语
G[3/T192e7.22003刑长获术微母物证的理化验第2部分：紫外7.州吸收讲法3术谱和定义
G比/工13966中确文的以下列术诺和庭义流用于本部分：3.1
荧光Flaorescence
一人原子，分子或商了吸收一个光子按若文转变为总自量子数不变的基森时发与的电磁轻射。此电磁朝射的延能时间（余辉时间)与祖安无关，一般小于10-\，5.2
荧光光谱norescence spectrum
叁招荧光发射光塔和荧光激发光谱）火光发射光错：在固定激发波此条件下，费光强座威发射被长变化的分布曲线b）表光激发光满，在固定发射波长系件下，荧光弧度随激发被长变化的分布山线。3. 3
荧光光谱法finni'mipeelrometr根据获得为爽光激发光谱发射光谱举客数对物质逆行定：、定量和结均分析的方计。3. 4
synchro-scwnspectrnm
回步扫描光谱
是指车荧光物质的测定中，造择道当能激发光送和发射光增的滤长差（须常选用与之差）瓦创扫描激发波长和发影波长所得的光谱、3.5
三维荧光光谱three-dimengionalnuwrescenspeclrunt描述索光质叫目随发被长和发射波长变化的关系图潜，3.6
时间分辨荧光光谱liaeresolwtinnnaracencespectrum同时固定涨发光和发光波长的承件下，荧光强变肺少化的世线：CB/T192G7.3—2003
荧光强度flumesrentiniensity
指能光的相对强度，单立足们点的，物质的相对火光强准与仪器性够，人时光强度，游液效度及谈物质的是千产率等四本有关。可币下式表来：荧元强度K（1
戎中：
—.光迎质；
量子产率；
一微发光弹宽：
光路长度！
解浓能度；
瞬尔吸光系数，与激发光波长相对应；常数：
蜂位pcakpnsllkon
亲霍哗和发射降的波长所士位，分别用1品表示3. 9
带宽度siertralhandwidi
在检测海时功率蜂值的二分之一处，从单色器出口狱锋射凹的福乐能毕的波长区间。3.10
荧光专命luuseuelifelime
停止激发后，荧光强度降到激发时量大素光通度的1/用时川，表示，3.11
荧光辩灭tlucresrenqucnehio
处于微发态的分子，通过内部能量转接成群换失去能减，回到基感的过利：3. 12
斯托克斯价移Stockesghift
荧光的安射涉长人」邀发版长，发射呼位和激发棘抗的波长差称为斯托克斯查强。3. 13
荧光收率flunrexpeneejield
荧光效率但称盘子产率，用表示.举于发射炭光的口于微与吸收激发光的量了数之比值。3. 14
瑞利收射ra,fleighsrattering
激发光的光了与作为微射十心的分十相互作月时，光子发！：节向收变形成放射，散射光的频率与激发期事相瓦：
拉量做射Ramtriseaitering
激发光的光于与性为散时中心的千明互作用册发少能量交换，分了暖收了规率较低的激发光上升到基态中按高的来动能效，再竭可到销或低于感来的能版，源成不同于激发光频的敢封。4原理
分了设化能外或叫见光片，基态分千医迁以各小不网振对能层的单线态电干做发念再经振实地数和（或)内转换弃变列等自子微发态的录低振动能级、后再联迁到基态的各个不风振动够级，牛发射24
CB/T :9267.3—2003
相声的光量于。二物质分子针格不，所以级女光及发射费流的锁长和强以不向，即司物质总有小同拍荧光激发光谱动发射光拦，而Ⅱ划于同物顺.浓度不同，或光强度也六司，从而可用米洗宁定性和定丧分析。
5收器
5.1仅器名称免费标准下载网bzxz
荧光分光光度计。
5.2收器组成
5.2.1激发光源
常用的光款氙灯及高压源灯，其，高压战恶是月前费光分光光度中用景泛的一种光源，展想业气体放电灯，在20nm-00nm光端区工谨续光诺，外食为左典.内充氯气，空温时市5标准大气，1作时成力约为标准人气速，5.2.2单色
·冲能把短合光分释为色光井能以一这出质需设长的装置。我汇分池光度计方两个单色，即做发单也器和发荆单五器。调足单色器的生要散儿件·与外单色养还含有孩维，透魔和境系就。
5.2.3吸收池
英大荣光池·四面所.
5.2.4检测器
效收光信号，并将其转变为电信号的装胃，月前应用控多的显光电倍增营5.2.5记录收
大部分采用自动记录仪，并可的有数据处抑系统。5.3校正与调试
5.3.1波长校正
5.3.1.1我射单急校正
把个汞灯收在择品室中，点燃，选添独链为？若咨线强适，可以增人我解？，调节光带和路准占系统就坐仪器能的13条潜线的波长与表！的标准-致。也可将发点年色器固定在表中1条谱线的任波长调“单色我使发射出的荧光强度最人，5.3.1,2微发单色器校正
把本灯放在激发光源的位胃，将步与单色器的装臣谢会零，产样品室中放快得教射板或高牧射的落液.根泥表【3条上要增权正激发单色器试长，5.3.1.3旅长楼正的粘座
度在案外及可见光区分划途波长进行校正，1月策求践可以牵选，也可几条，也可以完一条选托的波点题多，则在整个二作范固内的液长精度感高，实标检验中经常果用加校正值的方伙即在误衣大的情况下，将表1条末钩的高值导3际测值之差作为修山被长的校表！汞灯的主要辉钱波长
挥效效长nm
拆装波长nn
5.3.2发时光谱和邀发光请的校正5.3.2.1光量计一微机校止法
把盛要子明B乙醇降液/的石炎三余栏光量了计波人样品实工发单色能的人口处桶人红色能光片以逆去第收光，保正没让m装岁川贴1的过、爬单色器的发射读长设25
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置在630nm，打摘发单色，检测到的信号存人微机准进行山-化处单。经微机处理后的控尚信号，即激发光强与装长的关系，应为恒定的值，此时绘制的激发光增，即为经过样品校下的激发光诺，5.3.2.2微机一散射光法
担散射光板摘人样品室，生波长举为零的案件下准周步扫疯荧光尝度，弃左波长误差的情视下资左光谱和发射光增应完全重合，若存在发射单色器的波长谋差.用城机使之秘下到一敏，并作归·化处理，输信应为恒定的值。
5.3.3灵敏度校正
常用来达行显频度校正的标准荧光物质有，10-mo./L~10-mel/L盼一中序，10wl/L--1-ul/1.叫哚一乙醇3.1mol/--0.3mol/l.噬带一抗酸(0,smal/L)、次光案一水（或乙醇）2-氨H吡啶说酸等，10-mol/的2-氨基吡院疏酸容滋（C.55mol/1.)常怕为330nm~43nm国的标准游滤，关数据见表2。
表 21-= mol/L的 2-血基吡啶一硫酸溶准炎光波长及相对强度a: hnt
5.4性指标
5.4.1破长准确度
这器显示约法长与数发单色器和发射单免器单色光的实示波长值之间均差值均应小一等下20n，5. 4. 2 光度重现性
相同条件下再经减得的炎光强度的变动性小下于2.5%。5.4.3借噪比
粪烯水的拉些峰强度值S与噪N的关系应符合S/N大于等于25：6样品制备
6.1试样
待责试样的壳光光语测定频在避明探该中进行。应选用食适的落剂落解持测样品为液虚适宜的游液：选择落剂的原则是：
a）搭剂本身荧光：
b）游剂小与裁测物质发牛化学反底：）对试样有良好的裕解能力：
d）被利组分在剂中只有良好的辉彩！e）溶剂的板性云尽量小。
6.2比对样品
将比对弹品用相同南剂离解成与得游栏品侬准相理的路液，特测。6.3实例
6.3.1纺织纤雄上染料
送取若干相同长度的羊根纤维，分别划人相同本积的不司探剂，必要时叫运当与加热。较各类溶剂对染料的提取能方，同时用达税显微镜观察纤望形态的变化以确定提取游剂是中今适，要求举取剂仪能游涨而不落解和分解纤维，提取时应规检材能米少采用不问方积，加单根纤维达：cm长，宋而微罩:B/T19267.3—2003
提取举进行提取！地（G3T19257.2三CC3的6.2.3）。检财以按率也以直接在具密试管中起取、测定。大多数纤维上染料！产数分针即以提收完会。6.3.2油脂
送取合适的裕剂将刷若生不同我体上的准旨落解下来，为避免我体组分放籍解，不要长时间复泡恒材，名提取就含水分，颜色深、或有记龈等围体杂质，可分别用光水硫酸脱水、活性嵌脱色、玻璃虾维理等方法处理
7试验方法
7.1消除光路中可能遗图的工扰购.打土机，7.2试验条件选择
7.2.1波长
定具分析应选托最强发射峰的波长（）为源波交。当共存架质干选、待测维分浓度过大或吸收峰太尖说：应斑用灵嫩度销概，不受干扰拍次强呼的波长为测量减长7.2.2波长范围
定性分析时对知光谐特征的详品，不需进行大范围扫描，测试术知户持征的样品.漆发光潜和发射产塔的打描使应累一些：如付发射光诺时应在短被力向多扫一效，以察瑞利敏射和拓带射的影响。
7.2.3获造
一般是性测定获链宽度可设定为1rm--m,定量测定获整宽度该完为nrm1rm。测发射光谱吃·激发狭链可设为nm~10am,甚至15nm,而发射我设定为2nm~nm7.2.4横、纵坐标的范田
偿坐标刻度般瑞择为（1cm~5cm>/10m。纵坐标的选开要兼以炎光强使和媒典，锻在2°以一。如果效据需如降低噪声，须坐标还可以故大，7.2.5选择扫摘速魔
7.3测定
检测试样或比对品案液绘制谱图。7.4定性分析
7.4.1光谱特证阅定
测实试择的荧光光谐.跌得发射据的数目、位胃、强度以及激发光和发射光诺的形状（授大、圾小值和损点）等光诺特行，并与比对样品的举册或标准谐用作比转，7.4.2比对实验
片时比较试样和比对样品的激发光谐和发射光避每个邮的样位，峰的数巨，及状以及齐之凹的扣对强度，只在完全相同时才有可能为同一物质。如果是单释的话，试性和比对品声在相间的浓度条件下进行比较，
7.4.3联合试略
将光为谱法与共他光谱方祛配合快，可月十检测含有共轮、芳坏等官能团的合物。7.5定品分析
7.5.1标准对照法
月于单组分酬完：在相条外下配制比对样品和试样穿疫分别测定装光强度，H下式汁第：Cp
本中：
厂4a—待领物的依忍
Ce+ Xd
GB/T19267.3—2003
比祥品荧光强度：
择品必剂压
比对缔波获胃。
7.5.2标准曲线法和回归直线法
7.5.2.1标准曲线法
的制系游不向的标准落技，在拍同实临条件下，测定炎光殖压，然以标准落满的浓度为坐起，以和应荧光点度为纵尘标，绘制关系图，在符合H定律时，获得一立线：在工作由线的求件下测止择液的炭光，以标注然上出品的策。7.5.2.2回归直线法
用回回当钱方保算样品的液虚
莱满长下的荧光强度；
持测凯侬室；
极准线截乐：
7.5.3导数光谱法
长阶导教册表示可坂23、4…
样战流度。
在导效光谱中以报c/c与相应拍浓度华氧.在符合Her定律时，获直线：按线性巨范关系求得待退物法度。
分析就采要求柜对标准偏差小」1次8结果表述
憶持或试栏的语习与比对片品的诺判【或标准语图)在相同实验条作下进行定性比较或定且测定后·应路山应材一比对样品尼否相风成含量范国的结论28
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