【国家标准(GB)】 蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定

ICS67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T5009.188--2003
部分代替GB/T5009.38—1996
蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定Determination of thiophanate-methyl,carbendaziminvegetables and fruits
2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
2004-01-01实施
GB/T5009.188—2003
本标准代替GB/T5009.38—1996《蔬菜、水果卫生标准的分析方法》中4.7甲基托布津、多菌灵的测定。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。496
1范围
GB/T5009.188—2003
蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定本标准规定了蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定方法。本标准适用于蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的测定。2原理
用甲醇自试样中提取出甲基托布津，在pH1～2时，用二氮甲烷提取，甲基托布津经闭环反应转变为多菌灵，提纯后，用紫外分光光度法进行定量测定。多菌灵经提取后可直接测定吸光度而进行定量。定量时为了排除各种作物中的干扰影响，采用作图法，求得校正吸光度，再根据校正吸光度和甲基托布津或多菌灵的关系绘制成标准曲线。多菌灵具有苯并咪唑的特异吸收，植物成分干扰不大。3试剂
3.1甲醇
3.2二氮甲烷。
3.3三氮甲烷。
3.4石油醚：沸程30℃~60℃。
3.5乙酸-乙酸铜溶液：称取2g乙酸铜，加100mL冰乙酸，稍加热溶解，用水稀释至200mL。3.6盐酸（1+11)：量取盐酸90mL，加水稀释至1000mL。氢氧化钠溶液（80g/L)：称取8g氢氧化钠，加水溶解并稀释至100mL。3.7
氢氧化铵溶液（1+7)：量取氨水10mL，加水稀释至80mL。3.9氯化钠溶液(100g/L)。
3.10甲基托布津标准溶液：准确称取50.0mg甲基托布津，置于烧杯中，用三氯甲烷溶解并移至50mL容量瓶中，稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1.0mg甲基托布津。3.11甲基托布津标准使用液：吸取10.0mL甲基托布津标准溶液置于100mL容量瓶中，加三氟甲烷稀释至刻度，此溶液每毫升相当于100.0g甲基托布津。3.12多荫灵标准溶液：准确称取50.0mg多菌灵置于烧杯中，用盐酸（1十11)溶解移50mL容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0mg多菌灵。3.13多菌灵标准使用液，吸取10.0mL多菌灵标准溶液，置于100mL容量瓶中，加盐酸（1+11)稀释至刻度。此溶液每毫升相当于100.0μg多菌灵。4仪器
4.1紫外分光光度计。
4.2空气冷凝管，或用60cm长的玻璃管（自制）。5分析步骤
5.1标准曲线的制备
5.1.1甲基托布津标准曲线：吸取0.0.10、0.30、0.50mL甲基托布津标准使用液（相当于0、10、30、50μg甲基托布泽），分别置于30mL圆底离心管中，挥干溶剂后，各加10mL乙酸-乙酸铜溶液及2粒497
GB/T5009.188—2003
玻璃珠，接上空气冷凝管，小火缓缓煮沸0.5h，取下，用20mL盐酸（1+11）从冷凝管项端洗涤冷凝管和圆底离心管，并移人125mL分液漏斗中，用二氯甲烷提取二次，每次10mL，弃去二氣甲烷层，酸溶液中加25mL氢氧化钠溶液（80g/L）至pH6.06.5（pH试纸试），用二氟甲烷提取二次，每次20mL，合并二氢甲烷提取液，用10mL水洗涤一次，静置分层后，将二氯甲烷层分人另一个干的分液漏斗中，准确加入10mL盐酸（1+11），振摇5min，静置分层后，盐酸提取液用1cm石英比色杯，以盐酸(1+11)调节分光光度计零点，测读250nm～300nm的吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收图谱。将图谱上260nm和290nm吸光度读数点连成直线，设直线上282nm的吸光度为A，吸收图谱上282nm的吸光度为A，两者之差为△A（△A=A一A，为校正吸光度）。再以校正吸光度为纵坐标，甲基托布津的含量为横坐标，绘制各甲基托布津标准点△A值的标准曲线。5.1.2多菌灵标准曲线：吸取0、0.10.0.30、0.50mL多菌灵标准使用液（相当0、10.30、50μg多菌灵），置于盛有20mL盐酸（1十11)的分液漏斗中，各用二氮甲烷提取二次，每次10mL，弃去二氮甲烷层，水溶液用氢氧化铵（1十7）中和到pH为6.06.5（pH试纸试），用二氯甲烷提取二次，每次20mL提取液用10mL水洗涤一次，以下按5.1.1甲基托布津标准曲线自“将二氯甲烷层分入另一个干的分液漏斗中，准确加入10mL盐酸（1+11）”起依法操作，并绘制吸收图谱，计算出△A值后，绘制多菌灵的标准曲线。
5.2试样的提取和分离
称取50.0g切碎、混匀的试样，加50ml.甲醇振摇0.5h，用布氏漏斗抽滤，容器和滤器用甲醇洗涤二次，每次15mL～20mL，抽干后，滤液移人烧杯中，抽滤瓶用约10mL水洗涤，洗液并人滤液内，在水浴上用空气流吹去部分甲醇后，移人分液清斗中，加30mL氯化钠溶液（100g/L），用石油醚振摇提取二次，每次25mL，弃去石油醚，加盐酸酸化至pH为1～2（用pH试纸试），用二氧甲烷提取二次，每次25mL，合并二氮甲烷提取液，用25mL水洗涤一次分出二氯甲烷层留作甲基托布津测定用。水洗涤液合并人水层，留作多菌灵测定用。5.3甲基托布津的测定
二氯甲烷提取液自然挥干后，用10mL乙酸-乙酸铜溶液分次溶解残渣，并移人30mL圆底离心管中，加2粒玻璃珠，以下按5.1.1自“接上空气冷凝管”起依法操作，计算出试样的△A值，再与甲基托布津的标准曲线比较，计算试样中的含最。5.4多菌灵的测定
取5.2中留作多菌灵测定的水溶液，用氢氧化铵（1+7）中和至pH6.0~6.5，然后按5.1.2多菌灵标准曲线自“用二氮甲烷提取二次”起依法操作，计算出试样中的△A值，再与多菌灵标准曲线比较，计算试样中的含量。
印基托布津在植物中的主要代谢物是多菌灵，是甲基托布津水解和闭环所形成，因而目前甲基托布津的残留量是以这两个化合物测得的残留量之和表示。6结果计算
试样中甲基托布津和多菌灵含量按下式计算：X=(mi+m)×1 000
mx1000
式中：bzxz.net
X-试样中甲基托布津和多菌灵含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；m1-—测定用试样中甲基托布津的质量，单位为微克(μg)；m?——测定用试样中多菌灵的质量，单位为微克（μg）；m--试样的质量，单位为克（g)。计算结果表示到两位有效数字。498
7精密度
GB/T5009.188—2003
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。8其他
波长/nm
图1甲基托布津标准紫外吸收光谱0.16
AA,-10
AA2—307
AAs-507
—浓度
A41=0. 0520.019=0.033
AA20.1120.022-0.090
AA30.1800.030=0.150
图2甲基托布津标准曲线
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