【国家标准(GB)】 植物蛋白饮料中脲酶的定性测定

ICS67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T5009.183—2003
部分代替GB16322-1996
植物蛋白饮料中脲酶的定性测定Qualitative analysis of urease in vegetable protein drinking2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标准化管理委员会
2004-01-01实施
GB/T5009.183—2003
本标准代替GB16322—1996《植物蛋白饮料卫生标准》中附录A腺酶定性测定方法”。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由辽宁省食品卫生监督检验所、北京市食品卫生监督检验所、天津市食品卫生监督检验所负责起草。
本标准主要起草人：王旭太、徐继康、杨玉芝、徐留发、陆守政。476
1范围
植物蛋白饮料中脲酶的定性测定本标准规定了植物蛋白饮料中腺酶的定性测定方法。本标准适用于植物蛋白饮料中腺酶的定性测定。2原理
GB/T5009.183—2003
腺酶在适当的pH和温度下催化尿索，转化成碳酸铵，碳酸铵在碱性条件下形成氢氧化铵，再与纳氏试剂中的碘化钾汞复盐作用形成碘化双汞铵，如试样中腺酶活性消失，上述反应即不发生。NH.CONH:+2H,O 脉醇(NH.),CO,
(NH),CO,+2NaOHNaCO,+NH,OH
2K[HgJ+3KOH+NH,+NH,Hg?O1+7KI+2H,0（黄棕色沉淀）
3试剂
3.11%尿素溶液。
3.210%钨酸钠溶液。
3.32%酒石酸钾钠溶液。
3.45%硫酸。
3.5中性缓冲液：取0.067mol/L磷酸氢二钠溶液611mL，加人389mL0.067mol/L磷酸二氢钾溶液混合均匀即可。
3.5.10.067mol/L磷酸氢二钠溶液：称取无水磷酸氢二钠9.47g溶解于1000mL水中。3.5.20.067mol/L磷酸二氢钾溶液：称取磷酸二氢钾9.07g溶于1000mL水中即成。3.6纳氏试剂：称取红色碘化汞（Hgl2）55g，碘化钾41.25g溶于250mL水中，溶解后，倒人1000mL容量瓶中。再称取氢氧化钠144g，溶于500mL水中，溶解并冷却后，再缓慢地倒人以土1000mL容量瓶中，加水至刻度，摇勾后倒入试剂瓶，静止后用上清液。4分析步骤
4.1取10mL比色管甲、乙两支，各加入0.1g试样，再各加1mL水，振摇半分钟（约100次），然后各加人中性缓冲液1mL。
4.2向上两管中的甲管（试样管）中加入尿素溶液1mL，再向乙管（空白对照管）中加人1mL水，将甲、乙两管摇匀置于40℃水浴中保温20min。4.3从水浴中取出二管后，各加4mL水，摇匀再加10%钨酸钠溶液1mL，摇匀，再加5%硫酸1mL，摇匀过滤备用。
4.4取上述滤液2mL.分别加入25mL具塞纳氏比色管（配套管）中，再按下述步骤操作。4.4.1各加水15mL后再加人2%酒石酸钾钠1mL。4.4.2各加人纳氏试剂2mL后再加水至25mL刻度。4.5摇匀后观察结果（见表1)。
CB/T5009.183—2003
腺酶定性
强阳性
次强阳性
弱阳性
表示符号
显示情况
砖红色混油或滋消液
桔红色澄清液
深金黄色或黄色澄清液
淡黄色或微黄色澄清液Www.bzxZ.net
试样管与空白对照管同色或更谈
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