【商检行业标准(SN)】 李痘病毒检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 2125—2008

李痘病毒检疫鉴定方法

Identification of Plum pox virus

2008-09-04 发布 2009-03-16 实施

前 言

本标准的附录 A 为资料性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：陈定虎、王章根、李明福、胡学难、李桂芬、王秀芬、冯黎霞、管维。

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

李痘病毒检疫鉴定方法

1 范围

本标准规定了李痘病毒检疫和鉴定的基本原则和方法。

本标准适用于带有李痘病毒的所有进出境的无性繁殖材料、组培苗、种子和果实的检疫鉴定。

2 原理

李痘病毒学名：Plum pox virus(PPV)，别名；Sharka virus，是核果类果树危险性最大的病毒之一，其外壳蛋白的特异性和核酸序列的特殊性是本标准制定的主要依据；该病毒的分类地位、地理分布、寄主范围和症状、传播途径、血清学特性及基因组特征等参见附录 A。

3 仪器设备、用具及试剂

3.1 仪器设备

3.1.1 酶标检测仪。

3.1.2 PCR扩增仪。

3.1.3 电泳仪。

3.1.4 台式高速冷冻离心机。

3.1.5 凝胶成像系统。

3.1.6 电子分析天平。

3.2 用具

3.2.1 移液器(0.1 μL～2 μL, 2 μL～10 μL, 10 μL～100 μL, 100 μL～1 000 μL)。

3.2.2 研钵。

3.2.3 0.2 mL、0.5 mL、1.5 mL离心管。

3.2.4 酶联板。

3.3 ELISA检测试剂

3.3.1 包被缓冲液 1 000 mL(pH9.6)

溶于1 000 mL蒸馏水中，溶液的pH为9.6，不需要调pH值。

3.3.2 PBS缓冲液 1 000 mL(pH7.2～7.4)

用无菌水溶解并定容至1 000 mL。

3.3.3 样品抽提缓冲液 1 000 mL