标准简介/下载中华人民共和国进出口商品检验行业标准
SN 0205—93
出口蜂产品中四环素族残留量
检 验 方 法
Method for determination of the residues of tetracyclines in honey products for export
中华人民共和国国家进出口商品检验局 发 布
中华人民共和国进出口商品检验行业标准
出口蜂产品中四环素族残留量检 验 方 法
Method for determination of the residues of
tetracyclines in honey products for export
1 主题内容与适用范围
本标准规定了出口蜂产品中四环素族残留量的抽样、制样和微生物检验的方法。
本标准适用于出口蜂王浆和蜂蜜中四环素族残留量的检验。
2 抽样和制样
2.1 检验批
蜂王浆以每一生产缸（约300 kg）为一检验批。
蜂蜜以不超过1000件为一检验批。
同一检验批的样品，应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2 抽样数量
对蜂王浆，每一生产缸取一份样。对蜂蜜，不超过50件包装取5件；51～100件，取10件；101～300件，每增加100件，增取5件；501件及以上，每增加100件，增取2件。每件抽取样品不少于100 g，作为原始样品。
2.3 抽样工具
- 取样器：不锈钢匙，不锈钢管，长约115 cm、直径约2.5 cm，或带活塞玻璃管。
- 混样器：搪瓷桶或杯。
- 单套杆：不锈钢制。
- 样品瓶：100 mL, 500 mL磨砂盖广口玻璃瓶。
2.4 抽样方法
蜂王浆：按每缸的上、中、下三个部位抽样，样品混匀后，装入样品瓶内，标明标记并及时送实验室冰箱中保存。
蜂蜜：按2.2的抽样件数随机抽取，逐件开启。将玻璃取样管缓缓放入，吸取样品。如遇蜂蜜结晶时，则用单套杆或不锈钢取样器插到底，抽取样品。将所取样品倾入混样器，混和均匀，装入清洁的样品瓶内，加封后，标明标记，及时送实验室。
2.5 试样制备
蜂王浆：样品从冰箱中取出后，在室温下融化，搅拌均匀。
蜂蜜：未结晶的样品将其用力搅拌均匀；对有结晶析出的样品可将样品瓶盖塞紧后，置于不超过40°C的水浴中温热，待样品全部融化后摇匀，迅速冷却至室温。在融化时必须注意防止水分挥发。
上述蜂王浆及蜂蜜试样均分成两份，装入洁净容器内，密封，并标明标记。
2.6 试样保存
3 测定方法
3.1 方法概要
蜂王浆：将试样于-18℃冷冻保存。
蜂蜜：将试样于室温保存。
注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
3.2 试剂和材料
除了特殊规定外，试剂均为分析纯；水为蒸馏水或相应的去离子水，溶液指水溶液。
- 3.2.1 乙醚、甲醛、三氯甲烷以及正己烷。
- 3.2.2 甲醇溶液：60%（V/V）。
- 3.2.3 柠檬酸缓冲液：pH 4.0。
- 3.2.4 三氯乙酸溶液：5%（V/V）。
- 3.2.5 柠檬酸溶液：2%（V/V）。
- 3.2.6 氯化铵-磷酸溶液：称取1.5 g氯化铵，汲取2 mL 85%磷酸液，量取160 mL蒸馏水配制而成。
- 3.2.7 氢氧化钠溶液：40%（m/m）。
- 3.2.8 磷酸盐缓冲溶液：0.1 mol/L，pH4.5、pH8.0。准确称取13.6 g磷酸二氢钾溶于980 mL水中溶解，用氢氧化钾或磷酸一氢钾调节至pH4.5和pH8.0，然后加水至1 000 mL。
- 3.2.9 生理盐水：0.85%的氯化钠溶液。
- 3.2.10 吸附树脂XAD-2（Amberlite，苯酸甲醛离子交换树脂）。处理办法：用甲醇浸泡30 min以上，然后用水以倾斜法洗涤6~6次，浸泡于水中备用。
- 3.2.11 抗生素标准品：四环素（TC）、土霉素（OTC）、金霉素（CTC）。由国家卫生部药品生物制品检定所判定之标准品。
- 3.2.12 抗生素标准贮备液及工作溶液。
3.2.12.1 抗生素标准储备液：准确称取0.050 g（精确至0.0001 g）抗生素TC、OTC和CTC（其效价为1 000单位/mg），各用0.01 mol/L盐酸溶液溶解后并定容至50 mL。抗生素标准储备液为1 000 μg/mL。配置后在冰箱中保存，在一周内使用。如抗生素标准品的效价低于1 000单位/mg（1单位=1 μg），配制时，则换算为1 000单位/mg。
3.2.12.2 抗生素标准工作液：在工作时，吸取抗生素标准储备液，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释配制成0.0、0.19、0.20、0.40、0.80、1.0和2.0 μg/mL的抗生素标准工作液。 - 3.2.13 色谱用的展开剂
正丁醇：乙酸+水=4+1+5
或 正丁醇:甲醇+水=4+1+2（原文字迹模糊，按字形识别为“正丁醇”，若原意为乙醇请自行修正）。 - 3.2.14 培养基及菌种制备。
3.2.14.1 菌利用培养基
a. 蛋白胨 10.0 g；
b. 牛肉膏 5.0 g；
c. 氯化钠 2.5 g；
d. 琼脂 14.0~16.0 g。
