【商检行业标准(SN)】 弓形虫病间接血凝试验

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1396—2004

弓形虫病间接血凝试验
Indirect hemagglutination test for toxoplasmosis

2004-06-01 发布 2004-12-01 实施

前 言

本标准的附录 A 为规范性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准由中华人民共和国湖北出入境检验检疫局负责起草。

本标准主要起草人：陈建军、郭明星、付文慧、赵磊等。

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

弓形虫病间接血凝试验

SN/T 1336—2004

1 范围

本标准规定了弓形虫病的间接血凝（IHA）试验操作方法。

本标准适用于动物弓形虫病的检疫、诊断及抗体水平的检测。

2 材料和试剂

• 2.1 $96(12 \times 8)$孔$V$型血凝板及玻璃盖板。
• 2.2 可调式微量移液器及吸头。
• 2.3 平板振荡器。
• 2.4 弓形虫IHA诊断液（抗原效价$\geqslant 1:024$）；标准阴性对照血清（效价$\leqslant 1:4$）；标准阳性对照血清（效价$\geqslant 1:024$）。
• 2.5 稀释液按附录A所示要求配制，所用试剂均为分析纯。

3 采样

无菌采动物静脉血约1 mL～2 mL，静置自然析出血清或将血液凝固后以600 g离心分离血清，56°C水浴灭活30 min，冷却，用健康公猪羊红细胞（按血清/红细胞体积比约1:1混匀）室温吸附2 h（或4°C冰箱过夜），600 g离心20 min，取上清（要求无血球、无溶血、无污染），置4°C冰箱备用。

4 操作步骤

4.1 取洁净的血凝板，于各孔中加入75 $\mu$L稀释液。

4.2 吸取待检血清25 $\mu$L加入第一列孔中，用移液器反复吸吹混匀，取25 $\mu$L加入第二列孔，混匀后取25 $\mu$L加入第三列孔中，如此4倍稀释至第6孔（对于大量样品可只稀释至1:64见表1）。

表 1 弓形虫病间接血凝试验操作方式

4.3 每次试验须同时作标准阴、阳性血清及稀释液空白对照，标准阴性血清对照应稀释至1:64，标准阳、阴性血清稀释方法同受检血清。

4.4 取弓形虫IHA诊断液（如为冻干制品需按使用说明洗涤稀释后使用），于各检验孔中加入25 $\mu$L。置振荡器上振荡约1 min（或手持血凝板绕圆摇振至各孔中血球分布均匀），盖上玻璃盖板，32°C～37°C