【商检行业标准(SN)】 进出口花粉中色氨酸的测定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

S/T 0858—2000

进出口花粉中色氨酸的测定方法
Method for the determination of tryptophan in pollen for import and export

2000-06-22 发布 2000-11-01 实施

中华人民共和国国家出入境检验检疫局 发 布

前 言

本标准是按照GB/T 1.1—1993《标准化工作导则 第1单元：标准的起草与表述规则 第1部分：标准编写的基本规定》编写的。本标准是对原专业标准ZB X83 004—1988《出口花粉中色氨酸的测定方法》的修订。

本标准从实施之日起，同时代替ZB X83 004—1988。

本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。

本标准由中华人民共和国上海出入境检验检疫局负责起草。

本标准主要起草人：蔡则慈。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

进出口花粉中色氨酸的测定方法

Method for the determination of tryptophan
in pollen for import and export

 SN/T 0858-2000

代替 ZB X83 004—1988

1 范围

本标准规定了用荧光分光光度计测定色氨酸含量的方法。

本标准适用于进出口花粉中色氨酸含量的测定。

2 测定方法

2.1 方法提要

花粉中蛋白质经高温真空碱法水解后，利用色氨酸的天然荧光，在激发波长 280 nm，发射波长 368 nm 处测定其荧光强度，用标准曲线法定量。

2.2 试剂

除有特殊要求外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。

1. 2.2.1 0.005 mol/L 氢氧化钠溶液:新鲜配制。
2. 2.2.2 L-色氨酸标准品:纯度≥89%。
3. 2.2.3 0.100 mg/mL 色氨酸标准溶液:准确称取 25.0 mg L-色氨酸，置于 250 mL 容量瓶中，加入 0.005 mol/L 氢氧化钠溶液，溶解后稀释到刻度。
4. 2.2.4 可溶性淀粉。
5. 2.2.5 氢氧化钠溶液:5 mol/L.
6. 2.2.6 淀粉氢氧化钠溶液:称取 0.5 g 可溶性淀粉，溶于 100 mL 微热的 5 mol/L 氢氧化钠溶液中,新鲜配制。
7. 2.2.7 4 mol/L 尿素溶液:调节 pH 值为 11，新鲜配制。
8. 2.2.8 6 mol/L 盐酸。

2.3 设备与仪器

1. 2.3.1 荧光分光光度计。
2. 2.3.2 聚四氟乙烯试管:内径 10 mm,长 60 mm,壁厚 1 mm。
3. 2.3.3 玻璃水解管:17料玻璃试管,内径 14 mm,长 150 mm。
4. 2.3.4 充氮、抽真空装置:真空泵或抽气管、高纯氮气。

2.4 样品制备

取有代表性样品,用四分法取出 5 g 左右，粉碎使其全部通过 60目筛孔,密闭保存,作为试样。

称取 10 mg 试样,准确至 0.1 mg,置于聚四氟乙烯试管(2.3.2)内，加入 1 mL 淀粉氢氧化钠溶液后放入玻璃水解管(2.3.3)中，抽真空、充氮气,重复三次,最后抽真空封口，移入(145±2)℃烘箱内加热 4 h,关闭烘箱,冷却后取出。

打开玻璃水解管,取出聚四氟乙烯试管,用水将水解液定量转移到置于冰浴中并事先加有 0.7 mL