【SN商检标准】 古氏短体线虫检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 4408—2015 古氏短体线虫检疫鉴定方法 Detection and identification of Pratylenchus goodeyi 发布日期：2015-12-04 实施日期：2016-07-01 国家质量监督检验检疫总局 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国南通出入境检验检疫局、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共和国湖北出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：葛建军、王旭、熊玉芬、王金成、张明、李芳荣、王振华。 1 范围 古氏短体线虫检疫鉴定方法 本标准规定了古氏短体线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物苗木及携带土壤、植物栽培介质中的古氏短体线虫检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 24831—2009 香蕉穿孔线虫检疫鉴定方法 SN/T 2122—2008 进出境植物及植物产品检疫抽样 3 古氏短体线虫基本信息 学名：Pratylenchus goodeyi Sher & Allen, 1953 异名：Anguillula misicola Goodey, 1932; Tenchus musidolai Goodey, 1928 分类地位：线虫门 Nematoda，侧尾腺纲 Secernentea，垫刃目 Tylenchida，垫刃亚目 Tylenchina，短体科 Pratylenchidae，短体属 Pratylenchus 4 方法原理 古氏短体线虫雌雄虫的形态学特征、寄主范围、地理分布和生物学特性（参见附录A）是种类鉴定的主要依据。 5 仪器设备、器具和试剂 5.1 仪器设备 生物显微镜、体视显微镜（具透射光源）、加热板、水浴锅。 5.2 器具 自封袋、钟面皿或培养皿、载玻片、盖玻片、网筛（20目、100目、500目）、烧杯（500mL、1000mL）、漏斗、漏斗架、乳胶管或硅胶管、止水夹、小镊子、剪刀、挑针、浅盘、线虫滤纸、酒精灯、干燥器、试管。 5.3 试剂 4%甲醛、指甲油、甘油、无水乙醇、石蜡。 6 现场检查 将其主要寄主植物（参见附录A）作为现场检查重要的对象。对植物种苗的生长状况、根及根茎部进行仔细的检查，注意观察其根部是否有变褐和坏死等症状。重点收集上述可疑的植物材料及所夹带的土壤或栽培介质等；如无可疑症状则按要求随机取样，送实验室进行古氏短体线虫的检验。具体抽样方法见SN/T 2122—2008中5.5。 7 实验室检验 7.1 线虫的分离 具体的分离方法见GB/T 24831—2009中附录A。 7.2 体视显微镜镜检 将分离获得的线虫样品放在体视显微镜下检查。古氏短体线虫虫体较小，头低平，口针明显。挑取线虫若干条制成临时玻片或永久玻片，在生物显微镜下观察线虫形态。具体玻片标本制作方法见GB/T 24831—2009中附录C。 7.3 生物显微镜镜检和测计 在生物显微镜下观察线虫的形态结构，对其主要鉴定特征进行重点观察、拍摄、测量和计算。线虫样品充足时，应观察并测量雌雄虫各20条以上。 8 短体线虫属形态鉴定特征 8.1 短体线虫属形态鉴定特征 8.1.1 雌虫 雌虫形态鉴定特征如下：虫体粗短，体长小于1mm，a=20~30；头部低平，连续到略缢缩，头架骨化显著；口针粗短，基部球发达；单生殖腺、前伸，有后阴子宫囊；尾长是肛门处体宽的2倍～3倍，尾端圆、钝（很少尖）。 8.1.2 雄虫 雄虫形态鉴定特征如下：整体形态与雌虫相似；单个精巢，前伸；交合刺弯曲呈弓形，引带不伸出泄殖腔，交合伞延伸至尾端。 8.2 古氏短体线虫形态鉴定特征 8.2.1 测计值 古氏短体线虫的测计数据见表1。 表1 古氏短体线虫测计值一览表 项目 | L/mm | a | c | V | St./μm | Sp./μm | Gub./μm ---|---|---|---|---|---|---|--- 来自香蕉 (Sher, 1953) | 0.64~0.68 | 27~37 | 5.5~6.1 | 16~18 | 73~75 | 17 | - 来自芭蕉 (Ryss, 1988) | 0.55~0.57 | 26 | 5.4~5.8 | 17~18 | 16 | - | - 其他数据 | 0.40~0.56 | 24~34 | 5.5~6.5 | 3.8~4.7 | 14~18 | 2.5~3.0 | -