【SN商检标准】 短颈剑线虫检疫鉴定方法

SN/T4171—2015 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 短颈剑线虫检疫鉴定方法 Detection and identification of Xiphinema brevicollum Lordello & DaCosta 发布日期：2015-02-09 实施日期：2015-09-01 发布单位：国家质量监督检验检疫总局 前言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：迟远丽、廖力、王岚、徐森锋、权永兵、黄永辉、张卫东、陈其文。 1 范围 本标准规定了出入境植物检疫中短颈剑线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于出入境植物、花卉、苗木、盆景及其繁殖材料、土壤及栽培介质中短颈剑线虫的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 28091—2011 剑线虫属（传毒种类）检疫鉴定方法 SN/T 1157 进出境植物苗木检疫规程 SN/T 1158 进出境植物盆景检疫规程 SN/T 2757 植物线虫检测规范 3 符号和缩略语 下列符号和缩略语适用于本文件。 n：测计的标本数； a：体长/最大体宽； b：体长/体前端至食道与肠连接处的距离； c：体长/尾长； c：尾长/肛门处体宽； h：尾后部的透明区长； L：体长； Lipw：头部宽度； Odontophone：齿尖针延伸部长度； Odontostyle：齿尖针长度； Tail：尾长； V：体前端至阴门的距离×100/体长； VBW：阴门处的体宽； BWGR：导环处体宽； BWOB：食道基部体宽； GR：导环至体前端的距离； Spicules：交合刺的长度。 4 基本信息 中文名称：短颈剑线虫。 学名：Xiphinema brevicollum Lordello & DaCosta, 1961。 异名：X. saopaoloense Khan & Ahmad, 1975; X. americanum Apud Carvalho, 1955, 1962; X. diffusum Lamberti & Bleve-Zacheo, 1979 (n. syn.); X. paruum Lamberti, Ciancio, Agostinelli & Coiro, 1992 (n. syn.); X. pseudoguirani Lamberti, Ciancio, Agostinelli & Coiro, 1992 (n. syn.); X. guirani Apud Lamberti & Bleve-Zacheo, 1979; X. Sheri Lamberti & Bleve-Zacheo, 1979 (n. syn.); X. taylori Lamberti, Ciancio, Agostinelli & Coiro, 1992 (n. syn.)。 分类地位：线虫门 (Nematoda)，无侧尾腺纲 (Adenophorea)，矛线目 (Dorylaimida)，矛线亚目 (Dorylaimina)，矛线总科 (Dorylaimoidea)，长针科 (Longidoridae)，剑亚科 (Xiphinematinae)，剑属 (Xiphinema)，美洲剑线虫组 (Xiphinema americanum-group)。 短颈剑线虫是一种非常重要的植物寄生线虫，主要危害寄主植物的根部，引起根部组织变黑，皮层增厚，侧根增生，长势变弱，造成根系肿大或坏死。短颈剑线虫主要通过带根苗木、土壤及栽培介质传播扩散。雌、雄虫形态学特征是该虫检验鉴定的主要依据，寄主范围、地理分布等信息可供参考（参见附录A）。 5 方法原理 根据形态特征描述和形态特征测计值采用 Hunt (1993) 的长针科分类系统进行线虫的分类鉴定。 6 仪器、用具和试剂 6.1 仪器 生物显微镜、体视显微镜（具透射光源）、恒温培养箱、冰箱、离心机。 6.2 用具 钟面皿或培养皿、盖玻片、载玻片、挑针、酒精灯、线虫滤纸或纱布、500$mu$L 塑料管、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、加热板、水桶、分样筛（60目～300目）、移液器、干燥器、记号笔。 6.3 试剂 4% 甲醛、甘油、指甲油、石蜡、溶液 I（96% 乙醇：甘油：蒸馏水 = 20：1：79）、溶液 II（甘油：96% 乙醇 = 1：19）。 7 现场检疫 对植物种苗的根、茎根、根状茎等地下部分材料进行检查，观察苗木的生长状况、根部为害状，以及是否带介质、土壤等。重点选取根部组织变黑，皮层增厚，侧根增生，长势变弱，根系肿大的部位进行取样。