【行业标准】 出口肉品中甲氧滴滴涕残留量检验方法 气相色谱/质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T0529—2013
代替SN0529-1996
出口肉品中甲氧滴滴递残留量检验方法气相色谱/质谱法
Determination of methoxychlor residues in meat for export-GC/MSmethod
2013-03-01发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2013-09-16实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替SN0529--1996《出口肉品中甲氧滴滴递残留量检验方法》。本标准与SN0529—1996相比，主要技术变化如下：SN/T0529—2013
标准名称修改为《出口肉品中甲氧滴滴涕残留量检验方法气相色谱/质谱法》；
去掉了抽样部分；
将填充柱更换为毛细柱；
气相色谱-质谱同时确证和测定代替气相色谱-电子捕获检测器测定。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国潍坊出人境检验检疫局。本标准主要起草人：孙军、吕建霞、田国宁、宫小明、刘永强、董静、张靖。本标准于1996年首次发布，本次为第一次修订。I
1范围
出口肉品中甲氧滴滴递残留量检验方法气相色谱/质谱法
本标准规定了出口肉品中甲氧滴滴滞残留量的气相色谱/质谱测定方法。本标准适用于出口鸡肉、鸭肉、猪肉中甲氧滴滴涕残留量的测定2方法提要
SN/T0529—2013
样品中的甲氧滴滴沸经乙酸乙酯-环已烷（1七1，体积比）提取，提取液浓缩后经凝胶渗透色谱（GPC系统净化，用乙酸乙酯-环已烷（1+1，体积比）洗脱，洗脱液浓缩至干，定容后，气相色谱质谱仪选择离子检测，外标法定量。
3试剂和材料
所有试剂除另有说明外，均为农残级，水为二次蒸馏水3.1乙酸乙酯。
3.2环已烷。
3.3正已烷。
3.4无水硫酸钠：分析纯，用前在650℃灼烧4h储存于干燥器中，冷却后备用。3.5甲氧滴滴沸标准品（Methoxychlor，C，HiCl.O2，相对分子质量：345.66.CA.S号：72-43-5）：纯度≥99%。3.6甲氧滴滴沸标准溶液：溶解16.0mg,甲氧滴滴沸标准品于少量正已烷中，用正已烷定容至100mL，摇匀，作为标准储备溶液，质量浓度为100 ug/rdL。根据需要再用正已烷稀释配成适当浓度的标准工作溶液。
仪器和设备
4.1气相色谱-质谱仪：配备电子轰击源（EI）4.2组织捣碎机。
4.3均质器。
4.4旋转蒸发仪。
4.5天平：感量为0.1mg和0.01g各一台。4.6离心机。
凝胶渗透色谱系统(GPC)：内装Bio-BeadsS-X3填料的净化柱。涡旋混合器。
5样品制备与保存
试样的制备
从取回原始样品中取出部分有代表性样品，将可食部分放人高速组织捣碎机中捣碎均匀。充分混1
SN/T0529—2013
匀，用四分法缩分出不少于500g作为试样。装人清洁的容器中，加封后，标明标记。5.2试样保存
将试样于一18℃以下冷冻保存。5.3制备与保存要求
在试样制备与保存的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化，6测定步骤
6.1提取
称取10g（精确至0.01g）样品于100mL具塞离心管中，加入20g无水硫酸钠（3.4），加入乙酸乙酯-环已烷（1十1，体积比）40mL，均质2min，4000r/min离心5min，上清液通过装有无水硫酸钠的涯斗，收集于100mL旋蒸瓶中。残渣中再加人20mL乙酸乙酯-环已烷（1十1，体积比），按上述步骤提取一次，合并提取液于40℃下旋转蒸发浓缩至近干。6.2净化
凝胶渗透色谱条件
凝胶渗透色谱条件如下：
a）净化柱：200mmX25mm内装Bio-BeadsS-X3填料：b）流动相：乙酸乙酯-环已烷混合溶剂（1+1，体积比）；流速：1.7mL/min;
d）进样量：5mL；
开始收集时间：9.5min；
结束收集时间：13min。
凝胶渗透色谱净化
用10mL乙酸乙酯-环已烷（1十1，体积比）溶解残渣并洗涤，转移人凝胶渗透色谱进样瓶中，充分混匀。如有颗粒状物质存在，则离心或过滤。5mL样液注人经校准的GPC进样管，通过凝胶渗透色谱系统进行净化。用乙酸乙酯-环已烧溶液（1十1，体积比）洗脱，洗脱液收集于100mL梨形烧瓶中。于40℃以下旋转蒸发至近干。用正已烷（或其他合适的溶剂）将其溶解并定容至1.0mL6.3测定
6.3.1气相色谱-质谱条件
气相色谱-质谱条件如下：
色谱柱：DB-35MS（30m×0.25mm×0.25um）石英毛细管柱或相当者：b)
色谱柱温度：80℃保持1min，然后以20℃/min程序升温至180℃，保持3min，再以20℃/min程序升温至230℃，保持7min，以10℃/min程序升温至290℃，保持10min；进样口温度：260℃，不分流进样，进样量：1pL；c
载气：氢气，纯度≥99.999%，流速1.0mL/min；d)
电子轰击源：70eV；
离子源温度：230℃；
g）GC-MS接口温度：280℃；
h）选择离子监测：定量离子：227，定性离子：228344。6.3.2定性测定
SN/T 0529—2013
分别等体积注入标准工作溶液及样品溶液于气相色谱-质谱仪中，按上述条件进行分析，甲氧滴滴涕出峰时间为23.5min。标准品色谱图参见附录A中图A.1、A.2、A.3。进行样品测定时，如果检出的色谱峰保留时间与标准品的保留时间相一致，并且所选择的离子的丰度与标准品对应离子的丰度相比，偏差在表1允许的范围内，则可判断样品中存在甲氧滴滴沸。表1使用气相色谱-质谱定性时相对离子丰度最大允许偏差相对丰度/%
GC/MS定性时相对离子丰度
最大允许偏差/%
6.3.3定量测定
>20~50
>10~20
定量采用单个离子定量，配制系列浓度的标准溶液，得到峰面积与浓度的关系，外标法定量测定。6.4空白实验
除不称取试样外，均按上述步骤进行。7结果计算和表述
按式(1)计算试样中甲氧滴滴涕残留含量：A.c.V
式中：
X一一试样中甲氧滴滴涕残留含量，单位为毫克每千克（mg/kg）)；A-
样液中甲氧滴滴涕的色谱峰面积；A—标准工作溶液中甲氧滴滴涕的色谱峰面积；C
一标准工作溶液中甲氧滴滴递的质量浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）；样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；最终样液所代表的样品质量，单位为克（g）。8测定低限、回收率和精密度
8.1测定低限
采用本方法对鸡肉、鸭肉和猪肉中的甲氧滴滴涕残留进行测定，其测定低限为0.005mg/kg。8.2回收率和精密度
（1）
采用本方法对鸡肉、鸭肉和猪肉进行添加回收实验，添加水平为0.005mg/kg、0.01mg/kg、0.02mg/kg，甲氧滴滴递的添加回收率数据和相对标准偏差数据见表2。3
SN/T0529—2013
表2鸡肉、鸭肉和猪肉中甲氧滴滴涕的添加浓度和回收率、相对标准偏差样品名称
添加浓度/(μg/kg)
回收率/%
98.6~104.7
100.9~103.2
97.4~102.8
99.6~103.1
1019~102-7
85.2~93.4
95.8~97.5
相对标准偏差/%
瘦600
400买
28000手
度16000
12000号
附录A
（资料性附录）
甲氧滴滴递标准品气相色谱质谱图SN/T0529—2013
20.5021.0021.50
22.0022.5023.0023.5024.0024.5025.0025.5026.0026.50
时间/min
甲氧滴滴递标准品的总离子流图227.1
khwhhp
100120140160180200220240
346.0378.9
300320340360380
260280
图A.2甲氧滴滴递标准品的全扫描质谱图5
SN/T0529—2013
甲氧滴滴递标准品的选择离子质谱图图A.3
Foreword
ThisstandardisdraftedaccordingtoGB/T1.1-2009SN/T0529-2013
This standard substitute forSN0529--1996Method forthedeterminationof methoxychior residuesinmeat for export.
ComparingwithSNo529-1996,themainchangesareasfollows:The name of the standard is changed to “Determination of methoxychlor residues in meat forexport-GC/MSmethod\；
Thesamplingsectionisdeleted;-Packedcolumnisreplacedbycapillarycolumng--Methoxychlor isdeterminedandconfirmedbyGC/MS atthesametime,while notbyGC/ECDThis standard was proposed by and is under the chargeof the Certification and Accreditation Administrationof thePeople's Republic of China.This standard was drafted by Shandong Weifang Entry-exit Inspection and Quarantine Bureau of thePeople's Republic of China.
This main drafters of this standard are Jun Sun,Jianxia Lu,Guoning Tian,Xiaoming Gong,YongqiangLiu,JingDongJingZhang
This standard is published for the first time in 1996.The standard is modified for the first time.SN/T0529—2013
Determination of methoxychlor residues in meat forexportGc/Msmethod
1Scope
Thisstandard specifies thedetermination ofmethoxychlor residues inmeatforexportby Gc/MsThis standard is applicable to the determination of methoxychlor residues in chicken,duck and porkforexport.
2Principle
The residues of methoxychlor in the test sample are extracted with ethyl acetate-cyclohexane(1+1,V/V).After cleaned up by gel permeation chromatography (GPC),the residues are determined bygas chromatograph mass spectrometry(GC-MS)underSiMmode.External standard method is usedforquantitation.
3Reagentsandmaterials
Unless otherwise specified,thefeagents shoujd be pesticide gfade,water is redistilled water.3.1wwW.bzxz.Net
Ethyl acetate.
Cyclohexane.
3.4 Sodium sulfate:lgnite at 650 ℃ for 4 h, cool to room temperature in a desiccator and store insealed container.
3.5Methoxychlor standard(Ch.HhsCi.O,,Molecular weight:345.66,CASNumber:72-43-5).Purity≥99%.
3.6Methoxychlor standard solution:Dissolve 10.0 mgofthemethoxychlorstandard inhexane,andmake up to volume with hexane in a 1oo mL volumetric flask.Mix thoroughly as the standard stocksolution of 1oo μg/mL in concentration.From which standard working solutions of suitableconcentration are prepared by diluting with hexane according to the requirement.8
Apparatus and equipment
SN/T0529—2013
4.1Gas chromatographmass spectrometry:equippedwith electronionization(El)4.2Tissueblender.
4.3Homogenizer.
4.4Rotaryevaporator
Analytical balance:0. 1 mg and 0.01 g.Centrifuge.
4.7Gel permeation chromatographic system (GPC):with cleaning column packed with Biobeads S-x3resin.
4.8Vortexmixer.
Samplepreparationand storage5
5.1Preparationoftestsamples
Part of representative sample is taken fromthemixed primary sampleand'the edibleportions areblended ina high-speed grinder. The homogenized sample/is thoroughly mixed and reduced to at least 500 g byquarteringas the test sample,which is then p5.2Storageofthetestsamples
edinacleancontainersealedand labeled.Thetestsampleshouldbestoredbelow--18-5.3RequirmentofpreparationandstorageInthecourseof samplingandsamplepreparation,precautionshallbetakentoavoid contaminationoranyfactorswhichmaycausethechangeof residuecontent.6Procedure
6.1 Extraction
Weigh about 10 g (accurate to 0.01 g) test sample into a 100 mL plastic centrifuge tube,then add 20 g9
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sodium sulfate (3.4)and 40 mL ethyl acetate-cyclohexane (1+1,V/V)into the centrifuge tube.Ho-mogenize for 2 min,then centrifuge at 4 000 r/min for 5 min. Transfer the supernatant to a 100 mL e-vaporated flask through a funnel with sodium sulfate. The residue was homogenized and extractedwith 20 mL ethyl acetate-cyclohexane(1+1,V/V).After centrifuging.combine the supernatant tothe evaporated flask.Evaporate the solvent to dryness with ratary evaporator below 40 C.6.2GPC cleanup
Conditions
Conditions areas follows：
Purificationcolumn:200mm×25mm,packedwithBio-BeadsS-X3Mobilephase:ethytacetate-cyclohexane（1+1,V/V);b)
Flowrate:4.7mL/min;
Injectionvolume:5mL;
Timetostartcollecting:9.5minTimeto endcollecting:13min.
6.2.2Clean-up
The residues are dissolved and transferred into GPC injection bottle with 1o mL ethyl acetate-cyclohexane(1+1,V/V)andmixedthoroughly.Filterorcentrifuge ifparticulatematterisvisible.Fillthe calibrated GPc sample loop with 5 mL of sample solution. Cleanup is carried out by passingthrough GPC system and elute with ethyl acetate-cyclohexane(1+1,V/V),collect the eluate in a 100mL long-necked flask and evaporate nearly to dryness on a rotary evaporator below 4o ℃.Quantitatively transfer the residue and make the volume up to 1.OmL with hexane (or other solventsuitableforGC/MSdetection).
6.3Determination
G/MSoperatingconditions
GC/Ms operating conditions are as follows:Calumn:DB-35MS（30m×0.25mm×0.25μm）capillarycolumnorequivalent；a）
Oven:80℃(1min),rampat20℃/minto180℃,holdfor3min,rampat20℃/minto230℃,b）
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