【农业行业标准(NY)】 草种病害检疫技术规程

ICS65.020
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1499--2007
草种病害检疫技术规程
Rules for forage and turf disease quarantirne2007-12-18发布
2008-03-01实施
中华人民共和国农业部
本标准中附录A、附录B、附录C、附录I)、谢录E、附录F为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部畜牧业司提山.NY/T1499-2007
本标准出全国畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起肯单位：全国畜牧总站、农业部全国草业产品质量监督检验测试中心、甘肃农业大学、西北农林科技大学：
本标准主要起草人：余鸣、尹晓飞、金里、姚拓、朱明旗、汗玺、李行福、李玉荣、刘芳、石守定。I
1范围
草种病害检疫技术规程
NY/T1499—2007
本标准规定了草种的产地检疫、调运检疫，国外引种和疫情监测的与法及程序。本标准适用」动物饲养、生态建设、绿化美化等用途的草本植物及饲用灌木的籽粒、果实、根，茎、叶、芽等种植材料或者繁殖材料的病害检疫。2规范性引用文件
下列义件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注口期的引用文件，其随后所有修改单（不包括期误的内容）或修计版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本：凡孔是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T2930.1牧草种子检验规程扦样3术语
下列术语和定义适用于木标准。3.1
草种 ferage and lurf
用汀动物饲养、生态建设、绿化美化等用途的草小植物及灌木的籽粒、果实、根、茎、叶、芽等种植材料或者繁殖材料。
来自同-地区、同-只期，使用间一运输工具、同-品名（品种）的全部应检物品。件 piere
在批货物中，每一个独立的包装件，如袋、箱、筐、桶、捆、托等，检疫对象qarantineebjects
国家和省（自治区、直辖山)公布的农业、林业利草业植物检疫性、限定的非检疫性有害生物中的病原牛物，主要包括致病性真菌、细菌、病毒、线负和寄生性种子植物等。3.5
产地检疫in-site
植物检疫机构对植物及其产品在原产地生产过程中的全部检疫检验工作，包括田间调查、室内检验、签发证及监督牛产单位做好选地、选种和疫情处理等工作。3.6
调运检疫Transportionquarantinc草种在国内地区间托运、邮寄、自运、携带、销售等过程中，农业专职植物检疫人员根据植物检疫法规进行的检疫检验和签证。
4产地检疫
4.1草种繁育基地
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4.1.1新建草种繁基地，应在当地拍物捡疫机构指导下，选择符合检疫要求的地方设立。4.1.2应在播种前30d向当地植物检疫部门中请产地检疫，并提交产地检疫中请3（附录A），经审查同意后·方可安排牛产。
4.1.3节利整育点地所历的草种，不得带有检疫件病害和其他危险性病害，4.1.4草种察育基地周国定植的植物应与所繁育的材料不传染或不交义感染检疫浒病害和其他危险性病害。
4.1.5已建的草种整育基地发牛检疫性病害和其他危险性病害的，要采取措施限期扑灭。4.1.6草种繁育集中的区域或单位，应配备兼职植检员负责疫倩调查、除害处理等工作！4.2产地检疫调查
4.2.1检疫调查前：植检员或兼职植检员应学掘草种繁育其地的草种米源、激培管理及检疫性病和其他危险性病害发生情说，确定调查董点和调香方法，做好观察、采集、鉴定用的工兵和记录表格等准备。
4.2.2检疫调查成根掘不同检疫性病害和其他危险性病原物的生物学特性：在植物生长期进行，每年不得步于两次
4.2.3检疫调查一般先进行踏查。瞪查耍选择有代表性的路绒，穿过草种繁背基地：必要时时采用定点戒定株检查。
4.2.3.1踏查时，需查着植物各器官有无病变、病害症状等：初步确定病害种类、分布范围、发生面积、发生特点、危害程度。
4.2.3.2对在踏查过程中发现的检疫性病害和其他危险性病害，需进一步掌握危害情说的，应设立标准地做详细调查.
4.2.4-标准地设置
标准地应选设在病害发生区域内有代表性的地段。标准地的累积总面积应不少于调查总面积的9.1%～5%。在全面日测的基础上，对疑似发生的地块采取棋盐式或对角线取群方法有针对性的调查0.3hn以下的地块取样数不少于10点；0.3hm2l.3hm2地块样数不少」15点：1.3hm~3.3hm地块取样数不少于20点；3.3hm2以上地块取样数不少于25点：每样点面积为0.25n~1.0m.
4.2.5对抽取的样株进行编号和逐株检，统订调查总株数，病害种炎、被害株数和危害程度，计算发病率、病情指数。
发病选数（器宣数）
发病率(终)
调查总株数(总器官数）
摘情指数=
≥[每级袜数（或器官数)×该级代表数值】100%（总株数或总器官数×最高一级级数）4.3检疫调查记录和标本采集
4.3.1将各项调查结果填人产地检疫调查表(附录B)。4.3.2对查中发现的验疫性病害和其他危险性病害，要采集病密标本，并附上采集标签：对田间不能确认的,应在窄内做一步的检验。4.4室内检验
4.4.1病原真菌检验
4.4.1.1采集·定数量症状典率的病害标本。4.4.1.2观察病害的病状和病症特点及其对资主的影响。4.4.1.3采用挑、到、披或切片等方法，借助靠微镜观察病原真菌形态特征，并采集病原渐的图像留作2
档案。
4.4.1.4用组织分离法或孢子稀释法分离病原真菌。4.4.1.5记载病原真菌形态特征利培养性状。4.4.2病原细菌检验
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4.4.2.1观察寄主发病部位是否具典型细菌性病害的溢菌现象，是否有菌脏，并用显微镜检查病组织，观察病健交界处是否有大量菌脓溢出，初步确定是否为细菌病害，4.4.2.2采用烯释分离法从病织织中分离培养病原细菌，并通过稀释或划线法获得纯培养菌株。4.4.2.3用柯克氏法则进一步鉴定病原细菌的致病性.利用植物过放反应快速筛选致病性细菌。4.4.2.4根据细菌形态、人小特征、菌株生理坐化特点、致病性等确定其种类。4.4.3寄生线虫检验
4.4.3.1直接采取新鲜病变的组织、器官或根围土壤。4.4.3.2采用贝尔曼法或浅盘法分离线出非转移型线虫，可直接手工刺离。4.4.3.3分离后首接检查。需保存或用显微镜观察的线虫用回定液固定。4.4.4病毒检验
4.4.4.1通过出间谢查、症状观察、初步确定是否为病毒病害。4.4.4.2采集病样品，并用摩擦接种观察接种后症状衣现及变化是否与感病植物一致，4.4.4.3用电镜观察病毒形态和进行细胞病理解剖或用血清学、聚合酶链式反应等技术进行鉴定。4.4.5寄生性种子植物检验
对送检样品直接采用手持扩大镜镜检观测。5调运检疫
5. 1调运检疫的申请
种子调运单位（个人）应在调运前向相关植物检疫部门中清调运检疫，并提交调运检疫申清书（附录C），经审查同意后，方讨调运。5.2种子批的托样程序和实验室分样程序应按GB/T2930.1的规定执行。
5.3送检样品的重呈
送检的样品成能够充分代表整批种子的情况，且祥品重量约为40000粒种子的质量但像鹰证豆，草原面煮豆等大粒种子，时很据实际情况减少·俱不得少于100g碧需进行固间小区种植检验时，其送检样品的重量见附录D5.4检验方法
5.4.1过筛检验
将需用的筛层（附录E），按筛孔大小顺序套好（小筛孔放在下而）把取好的俭验样品视其量分数次倒入第层筛内（约层高度的1/3)。您上筛盖，双于以回旋的方式筛动20转次左右。然后揭取筛盖，逐层倒入白磁盘或培养Ⅲ内，进行病粒、菌核等检查和鉴定：计算含量或百分率。计算公式如下：每千克含量（个）-1.000×检验对象数量（个）检验蛋量（g）
数最百分案（%)
5.4.2直接检验
检验对象数量（个）
检验事量（g)一每克检验数量×100%将送检样品按分取检验样品的方法。分取一般不少于5（大粒种子可适当多点）的种子产，用肉眼3
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或借助放大镜进行检查确认：
5.4.3洗涤检验
5.4.3.1从送检样品中分取5g～25检验样品2份，分别装人250mL三角瓶内。注人无菌水10ml~50ml振荡5min~10min，充分洗下附着在种子表面的病菌孢子。然后，将悬浮液分别倒人洁净的离心管内，低速离心（1000r/min~-2400r/min)5min~10min：用吸管移去上清液.保留1mL沉淀液，再加入2HML4洛的明胶溶液，振勘使沉淀液们次充分感浮；立即用干净的细玻璃摔，将悬浮液滴丁载被片上盖上盖玻片，镜检，并鉴定病原种类。用血球计数板计算孢子数。5.4.3.2血球计数板计算孢子数
用吸管滴上述孢子悬浮液一滴于血球订数板的中史，盖上盖玻片·用品微镜检查：每管病菌孢广感浮液至少要观察5个驳片。计数使用16×23的血球计数板，要按对角线方位，取左上左下，右上右下的四个人格（即100小格)的孢子数：孢子数计算公式如下：抱子数（个/g）一每奎境强手数×2.5×10%:0.5样品重量
5.4.4漏斗分离检验
将10cm～15ctn口径的玻璃斗，架在铁架台上：斗下口套接约10cm长橡皮管一根，在管的中部装个弹簧夹，将种子或带有线虫的其他材料研碎，用纱布包好，放在漏斗内，加满清水浸泡4h～21 h。打升炎子接取下沉液，镜检。5.4.5保湿培养检验
在直径9CII的培养底部铺垫3层～4层滤红，注入灭菌水，使吸水纸呈显润状。然后，将种子或混祥叫的植株体排刻在吸水纸上，大粒种子如红豆罩，锦儿等相拟大小的牧草种了不少手粒。小粒种子如首猎、沙打旺等相似大小等为1000粒。遥好后，加盖、编号，记录。置于20℃，12h光照的培养粘内进行培养，7司后进行镜检5.4.6分离培养检验
5.4.6.1真菌的检验
取种于400粒：用0.1%次氯酸钠消毒5mi，在无菌条件下用假子把种子摆放在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基(PDA）上，距离2cm～3cm.置于20℃,12h光照的培养箱内进行培养，7d后检查菌落形态特征，制片镜检，确定病原菌。5.4.6.2细菌的检验方法
用 0, 1%升汞对种子进行表面灭菌2 min-~6 tri1。用灭菌水冲洗次6次,加人灭菌的(1. 85%生理盐水：研碎浸泡l0 min～15 min.用划线法在牛肉汁培养上培养。观察细菌的培养性状。5.4.7症状检验
5.4.7.1试管幼苗症状检验
取直径为 16 mm、长为160 mm试管若十支：每支册人约10 ml1%~1.5%水琼脂。用棉塞塞紧管口，用高压灭菌锅灭菌：并使试管保持约60的角度：待培养基固片，在每管斜而上放一粒种子，寒上管，肾于24℃太右培养籍内进行培养。待幼苗长到管口去掉塞子，10d~14后检验。5.4.7.2隔离试种检验
隔离试种应在十壤消过的温室(或网室)或严的隔离区进行。在幼苗期或整个生育期，观察其症状，检查有无检疫对象或危险性病害。如没有出现，应解除此项管理，允许这批种子输人作种子，5.4.8噬菌体检验
取5%~10g种了研碎，波人灭过菌的烧杯中，加火菌水10mL~20mL搅拌30min.取上清液1m分别注人3个火菌的培养l中，然加人指尔噬菌体，混合均勾，经3in~5min后加人10ml熔化并冷却到45℃~50C的固体培养基，匀凝成平板，丁25℃～28℃恒温箱中。培养8h~4
12h,检测噬菌休。
6检疫处理
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6.1根据产地检疫调查和调运检疫结果，对发现有检疫性病害和其他危险性病害的种，应监督、指导生产者进行除害处理。
6.2对新发生检疫性病害和其他危险性病卉，依法向当地植物检疫机构和省级农业主管部门报升疫情：并采取措施衡底熨烧和灭活处理。7检疫签证
7.1经产地检疫调查和调运检疫，对未发现检疫性病害和其他危险性病害的，签发《产地检疫合格证》和《调运检疫合格证》；对册有检疫对象利其他危险性病讲的，签发《检疫处理通知单》。7.2对调出的草种，可凭《产地检疫合格证》直接换发《植物检疫证书》。《产地检疫合格避》的有效期为18个月。
8国外引种检疫审批
8.1引种申请
从国外引进草种时，引种单位或代理单位必须在刘外签订贸易合间。协议前30c，向所在地的省、自治区直转市植物检疫机构提出申请，国务院有关部门所属的在京单位向国家农业部植物检疫管理机构或者其指定的植物检疫单位提出申请，办理检疫中批于续：填写引进农业种子、苗木及其殖材料检疫审批单》。申请引种审批时，需提供：在原产地引进草种的病害发尘情况材料；引进草种的隔离试种计划和管理指施：再次引进相同产地相同草种（品种)时：需出示国内种植地植物检疫机构山具的疫情监测报告。
8.2审批
8.2.1审批机构在接到审批单15d内依照规定进行审批。对同意引进的，确定引种的种植地点、管理单位或个人和监管措施等，提出对外检疫要求。8.2.2引种单位在取得审批单后，将审批单中提出的检疫要求列入贸易合同或协议中。引进时，需取得输出国植物检疫证书，证明符合我回检疫要求。8.3隔离试种
8.3.1草种引进后，引种单位或个人须按审批单位审定的地点和监管措施逊行隔离试种。隔离试种场所必须具备以下条件：
8.3.1.1有围墙、防疫沟等自然间隔或不同植物的隔离他；8.3.1.2周围一定距离内，不得种植同一科、属植物；8.3.1.3灌溉及排水条件应符合检疫和管现耍求；8.3.1.4有完善的管理措施舒配备防治专业技术人员；8.3.1.5经审批单位审定合格片，方准使用。8.3.2引进的卓种在隔离试种期间，植物检疫机构应对其进行调查、观察和检疫，指导。监督引种单位或个人对发现的检疫对象利其他危险性病害进行处理。引和单位或个人应加强对引进的草种的牛产（经營）管理，做好病害监测工作，发现检疫对象和其他危险性病害时·应明情况，防止扩散蔓延，并及时书而报告当地植物检疫机构；发生重人疫情时，应向省级植物检疫机构和国家衣业部报告。8.3.3隔离试和期限：一年生植物不少于个生长周期，多年牛植物不得少可两年：8.4评定
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引进的草种，经植物检疫机调查、检疫，确认无检疫对象和其他危险性病害危害后，引种单位或个人方可分散种植。
9样品和档案管理
9.1样品管理
9.1.1样品是确定：批货物是否带有危险性病害的重要依据，应建立严格的管理制度。9.1.2抽取检验样品要给报检人签发取样证明（附录F)。9.1.3在检疫过程中发现检疫对象利其他危险性病害的，必须保存样品，保存期至少3个月。对不易长期保存的样品，可根据具体情况缩短时间：9.1.4.样品要制成标本保存、标小要注明寄主、谢入(出)地和发现时间,不易制成标本的被害状及现场：可摄制照片、录像片等存档备查。9.1.5样品要有专人负责管理，保存期间要注意防潮防虫，以免受损变质。9.1.6根据祥品种类荐记造册，列明报检单位、货物名称、样品数量、取样时闻、行放起止日期、检疫结果和最后处理意见
9.2档案管理
9.2、1卓种备种检疫记录单证，需建立专门档案，以备检查、查询及研究之用。9.2.2《植物检疫证书》等各种检疫单证属法律文书一般需保存3年，可根据具体情况适当延长或缩短。
植物名称
计对捕种时间
预计收获时间
申请单位
品种名称
附录A
（规范性附录】
产地检疫申请书
种子(种苗)亲源
计划播种时间：从
预计收获时间：从
名称(逝章)：
地证：免费标准下载网bzxz
联系人《签名》：
要求批件发送方式
邮编：
编号：
种摘地点
口起：至
\起。至
联系电话：
来人领取
等快专递邮寄
普通邮寄
传真：
NY/T 1499- 2007
NY/T1499—2007
草种繁育单位：
调查地块端地：
调查面积：
作物名称：
种芭求源：
症状/危害状：
低间拥说
备注：
发病率及阳间分布情况;
危害面积：
填表人(签名)：
中核人（签名)：
附景B
【规范性附录】
产地检疫田间调查表
调心地点：
对应申报导：
湖查湖：
品种名称：
生长期：
划断/初步划断
植物检疫专用章
收货单位
发货单位（人）
贫物名称
起运地点
运往地点
申请单位
联系人
地址：
（规范性附录）
调运检疫电请书
电话：
编号：
如渠发货单位与申请单位为同单位，以下两行内穿不必填写联系人：
地址：
数斑/件（株）
名称（盖章)：
地址：
联系人(签名)：
要求批件
发送方式
电话：
原产地
运输方武
.联系电话：
货物单价
传真：
来人领取
特快专递邮案
普通邮寄
NY/T1499--2007
货物合
NY/T14992007
Achnatherim sibiricum
Achnaiherum ipienlens
Agropyron cristatun
Agropyron deserturun
Agropyon nongoticum
Aapyrm sihirion
Agrastis allx
Aoperurs pratenais
Anthoruruhur idoratum
Arlemsi frigile
Artemnisiu sphaerucephala
Astragalus adsurgen:
Axirugulus melilotoides
Astragatus sinicur
Brats cathatius
Brorus inermis
Lrampes jopnnicu.
Bromi laneeotitus
Bromus richandsonii
Caragan uninrescens
Garigun icrophghte
Cerutoides latens
Chiaris tavum
Ccer' areninm
Chrnnillu zurus
Cohodondeciyion
Dactytis glomrala
Desruitun intortum
Lesmodium tnrinatun
Fiyir cciclertsis
Elgwas uafeuricus
Elymurs etcelsr
Elymus ukins
Elymes siburicwe
Ergtrigia einzgate
Elyirigir intermedia
Fiyirigia repens
Ebyirigia wirhophord
Erugrost is currula
（规范性附录
牧草种子送检样品重量
中文名
枝龙草
沙生淑草
沙声草
四伯利亚冰堂
小啵芋
草源着麦娘
黄花茅
白沙蕊
沙打旺
节木辉状黄芪
紫云英
扁穗鲨炎
无蓝生发
大秘雀菱
宽穗密表
树锦鸡儿
小归锦鸡凡
驼皱藜
兰洲尾
魔嘴瓦
净变小冠花
狗牙根
绿山蚂蝗
银叶山蚂蛭
享大披城堂
披碱草
肥披碱革
乖秘技俄单
反穗假变草
中间草
惬麦草
毛候麦擎
弯叫渔后草
样品重室
送检样品最低试
每克种子近似避数
107℃c
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