【商检行业标准(SN)】 进出口粮谷中多种氨基甲酸酯类农药残留量检测方法液相色谱串联质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T2085—2008
进出口粮谷中多种氨基甲酸酯类农药残留量检测方法
液相色谱串联质谱法
Determination of carbamate pesticide multiresidues in grainsfor import and export-HPLC-MS/MS method2008-04-29发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2008-11-01实施
中华人民共和国出人境检验检疫行业标准
进出口粮谷中多种氨基甲酸酯类农药残留量检测方法
液相色谱串联质谱法
SN/T20852008
中国标准出版社出版
北京复兴门外三里河北街16号
邮政编码：100045
网址spc.net.cn
电话：6852394668517548
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷*
开本880×12301/16
印张1.25字数30千字
2008年7月第一版
2008年7月第一次印刷
印数1—2000
书号：155066：2-18938
定价12.00元
本标准的附录A、附录B为资料性附录前言
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人：陈笑梅、胡贝贞、刘海山、丁慧瑛、俞春燕、单慧君。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准SN/T2085—2008
1范围
进出口粮谷中多种氨基甲酸酯类农药残留量检测方法
液相色谱串联质谱法
SN/T2085—2008
本标准规定了粮谷中甲硫威、恶虫威、异丙威、甲萘威、灭多威、克百威、抗蚜威、仲丁威残留量的制样和液相色谱串联质谱测定方法。本标准适用于大米和小麦中甲硫威、恶虫威、异丙威、甲萘威、灭多威、克百威、抗蚜威、仲工威残留量的检测。
2方法提要
试样用乙提取，经中性氧化铝层析净化，用丙酮-乙醚（20十80，体积比）洗脱，液相色谱-串联质谱仪检测，外标法定量。
3试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为重蒸水或去离子水。3.1甲醇：色谱纯。
3.2乙：色谱纯。
3.3丙酮：色谱纯。
3.4乙醚：色谱纯。
3.5乙酸铵：色谱纯
氯化钠。
3.7乙酸铵水溶液（0.005mol/L）：称取0.19g乙酸铵溶于适量水中，再定容到500mL。3.8
甲醇-乙酸铵溶液：甲醇-乙酸铵溶液（0.005mol/L）（60+40.体积比）。3.9丙酮-乙醚混合溶剂：丙酮-乙醚（20十80.体积比）。3.10
0氨基甲酸酯类标准品：甲硫威、恶虫威、异丙威、甲茶威、克百威、抗蚜威、仲丁威均大于等于99.0%。灭多威为98.8%。
3.11氨基甲酸酯标准储备液：精确称取适量氨基甲酸酯标准品，用甲醇溶解，分别配制溶液浓度为200μg/mL，4℃储存。
3.12氨基甲酸酯混合工作溶液：根据需要，分别取适量储备液于同一容量瓶中，用甲醇-乙酸铵溶液稀释至适当浓度的工作溶液。
3.13氨基甲酸酯校正溶液配置：将标准混合溶液用按6.1和6.2处理的空白样品溶液稀释为1.0，10.0.20,50.100μg/L。
3.14中性氧化铝固相萃取小柱（3mg）：使用前用5mL乙醚淋洗4仪器和设备
4.1液相色谱-串联质谱联用仪：配有电喷雾离子源和四极杆质量分析器。4.2均质机（16000r/min）。
4.3混匀器。
SN/T2085—2008
4.4具盖塑料离心管：50mL。
4.5离心机（4000r/min）。
4.6真空固相萃取装置。
5试样制备与保存
谷物样品经粉碎机高速粉碎，分成两份，分别装人洁净容器内，一份作为试样供检测用，另一份作为留样保存，在一18℃保存。
在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。6测定步骤
6.1提取
称取2g（精确到0.01g磨碎的试样置于80mL小烧杯中，加6mL水润湿样品.20min后加人20mL乙睛，均质1min（16000r/min），过滤到预先加有5g氯化钠的50mL离心管，再用20mL乙睛分2次洗涤样品合并滤液，涡旋1min，离心2min（4000r/min），使乙睛层与水层分离，转移上层乙睛层溶液到100mL浓缩瓶中，再加10mL乙重复提取一次，合并乙睛层，40℃水浴浓缩至近干。残渣用3mL丙酮-乙醚（20+80.体积比）溶解，待净化6.2中性氧化铝固相萃取小柱净化将上述溶液转移到中性氧化铝小柱上用10mL丙酮-乙醚（20+80体积比）溶液分三次洗涤残渣，上柱，收集洗脱液，30℃以下水浴减压浓缩至干，用甲醇-乙酸铵溶液（60十40，体积比）定容至2.0mL，供液相色谱串联质谱测定
6.3测定
6.3.1色谱条件
a）色谱柱：Cs，5μm，150mmX4.6mm（内径），或相当的色谱柱；b）流动相：A：甲醇；B：0.005mol/L的乙酸铵溶液；流动相梯度洗脱程序见表1；表1梯度洗脱程序
时间/min
流速：0.3mL/min；
进样量：20μL；
柱温：20℃；
扫描方式：正离子模式；
检测方式：多反应监测：
雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气或其他高纯气体；监测离子对（m/z)和其他参考条件参见附录A。
6.3.2LC/MS-MS测定
根据样液中待测物的含量，选定浓度相近的标准校正溶液，试液中待测物的响应值应在仪器检测的线性范围内。校正溶液及样液等体积进样测定，在上述色谱条件下，氨基甲酸酯的保留时间参见附录A表A.1，色谱图参见附录B图B.1，外标法定量。6.3.3液相色谱-质谱确证
SN/T2085—2008
在上述液相色谱-串联质谱条件下进行测定，试液中待测物的保留时间应在校正溶液保留时间的时间窗内，各离子对的相对丰度应与校正溶液的相对丰度一致，误差不超过表2中规定的范围。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许误差相对离子丰度/%
允许的相对误差/%
6.4空白试验
除不加试样外，均按上述步骤进行结果计算和表述
>50~20
>20~10
采用外标法定量，按式（1)计算试样中氨基甲酸酯类农药的含量。计算结果需扣除空白值：X
式中：
试样中被测组分的残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；样液中氨基甲酸酯农药的峰面积；校正溶液的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；样品溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）：校正溶液中氨基甲酸酯农药的峰面积；样品溶液所代表的试样质量，单位为克（g）。测定低限、回收率
测定低限
本方法对氨基甲酸酯类农药的测定低限为0.01mg/kg。8.2回收率
小麦和大米样品中添加0.01mg/kg0.50mg/kg浓度水平时，回收率见表3。表3回收率实验结果
氨基甲酸酯类
样品名称
灭多威
恶虫威
克百威
甲蔡威
抗蚜威
异丙威
仲丁威
甲硫威
0.01mg/kg
73.3~87.4
82.6~94.2
77.8~91.0
81.7~96.7
80.9~91.8
回收率/%
0.05mg/kg
84.2~96.4
85.3~98.0
85.4~93.7
93.3~98.3
86.7~94.9
89.6~102.0
97.1114.0
85.0~101.0
·（1）
77.5~106.0
77.7~91.1
82.7~93.3
81.4~90.5
84.5~100.0
89.0~103.0
97.2~103.0
81.8~88.2
SN/T2085—2008
样品名称
氨基甲酸酯类
灭多威
恶虫威
克百威
甲萘威
抗蚜威
异丙威
仲丁威
甲硫威
表3（续）
0.01mg/kg
70.8~104.2
71.3~90.8
70.8~93.9
75.5~91.6
70.8~104.2
回收率/%
0.05mg/kg
70.9~103.2
71.3~90.2
70.3~95.3
75.1~92.7
80.8~95.7
77.8~91.2
73.2~88.3
71.2~89.0
73.9~88.8
74.8~83.1
75.5~86.3
78.8~94.5
附录A
（资料性附录）
API4000LC-MS/MS系统电喷零离子源参考条件）监测离子对及电压、气压参数：a)
离子源温度：400℃；
电喷雾电压：5250V；
碰撞压力：5Psi；
气帘气压力：25Psi；
雾化气压力：55Psi
辅助气压力：30Psi；
SN/T2085—2008
待测物、定性离子对、定量离子对、去簇电压（DP）、碰撞气能量（CE)和保留时间见表A.1。表A.1
待测物、定性离子对、定量离子对、去簇电压（DP）、碰撞气能量（CE)和保留时间农药
灭多威
恶虫威
克百威
甲萘威
抗蚜威
异丙威
仲丁威
甲硫威
定性离子对
163.0/88.1
163.0/106.2
224.1/167.4
224.1/109.2
222.1/165.5
222.1/123.1
202.1/145.2
202.1/127.2
202.1/117.2
239.1/71.9Www.bzxZ.net
239.1/182.4
194.1/95.0
194.1/137.4
208.1/94.9
208.1/152.3
226.1/169.4
226.1/121.1
定量离子对
163.0/88.1
224,1/167.4
222.1/165.5
202.1/145.2
239.1/71.9
194.1/95.0
208.1/94.9
226.1/169.4
去簇电压
碰撞气能量
保留时间
1）非商业性声明：附录表A所列参数是在API4000质谱仪完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。5
SN/T20852008
灭多威；
恶虫威：
克百威；
甲恭威：
抗蚜威：
异丙威：
仲丁威；
甲硫威。
附录B
（资料性附录）
8种氨基甲酸酯标准品多反应检测（MRM色谱图4. 3c5-
0123456789101112131415161718t/min
图B.18种氨基甲酸酯标准品多反应检测(MRM)色谱图16
Foreword
TheAnnexAandBofthisstandardareinformativeannexSN/T2085—2008
Thisstandardwasproposed by and is underthe chargeof Certification andAccreditation administra-tionofthePeople'sRepublicofChina.This standard was drafted by Zhejiang Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of the People'sRepublic of China
The main drafters of this standard are Chen xiaomei,Hu beizhen,Liu haishan,Ding huiying,Yuchun-yan.Shan huijun.
This standard is a professional standard for entry-exit inspection and quarantine promulgatedfor thefirsttime.
SN/T2085—2008
Determinationofcarbamatepesticidemulti-residuesingrainsforimportandexport-HPLC-MS/MS method
Thisstandardspecifies determinationof methomyl,bendicarb,carbofuran,carbaryl.pirimicarb,isoprocarb,fenobucarb,methiocarb carbamate multi-residues in grains by High Performance Liquid ChromatographyTandemMassSpectrometry(HPLC-MS/MS)This standard is applicable to thedetermination of methomyl,bendicarb,carbofuran,carbaryl,pirimicarb.isoprocarb,fenobucarb,methiocarb carbamatemulti-residues inwheat and rice.2Principle
Carbamate residues in test sample are extracted with acetonitrile,cleaned up with neutral-aluminacolumn and eluted with acetone-ether(20 +80,V/V).The carbamates were then analyzed by HPLC-Ms/MSandquantifiedbyexternalstandardmethod.3
Reagentsandmaterials
Unless otherwise specified,all reagents should be analytically pure,water used should be redistilledordeionized
Methanol:HPLCgrade
Acetonitrile：HPLCgrade
Acetone：HPLCgrade.
Ether:HPLC grade.
Ammoniumacetate:HPLC grade
Sodium chrolide.
Ammonium acetate solution(0.005 mol/L):0.19 g ammonium acetate was dissolved in500mLWater
SN/T2085—2008
3.8Methanol-ammonium acetate solution:Methanol-ammonium acetate(0.005mol/L)（60+40V/V).
Acetone-ethermixture：acetone-ether（20+80,V/V)Carbamates standards:thepurityof Methiocarb、Bendicarb、IsoprocarbCarbaryl.Carbofuran，Pirimicarb、Fenobucarb are all higher than 99.0% the purity of Methomyl is98.8%.3.11
Carbamates standard stock solution:Accurately weigh an appropriate amount of carbamatestandard and dissolve with methanol individually.The concentration of the solution are 2o0 μg/mL.This standard stock solution should be stored at 4℃.3.12
Carbamates standard working solution:According to the requirement,pipette adequate a-mount of standard stock solution and dilutewith methanol-ammonium acetate solution to preparestandard working solution of suitable concentrations3.13
Carbamates calibration solution : Carbamates standard working solution is diluted by blanksamplesolutionwhichwasdoneaccordingto6.1and6.2.Neutral-aluminacartridge（3mg):elutedby5mLetherbeforeuse.3.14
Apparatusandequipment
High-performance liquidchromatograph,equippedwithelectrosprayion sourceand triplequa4.1
drupole mass analyzer.
Homogenizer（16000r/min).
Vortexmixer.
Plasticcentrifugetubewithcap:50mL.Centrifuge (4 000 r/min).
Solidphaseextractionwithvacuumpump.5
Samplepreparation
Grind the sample with a muller.divide into two equal portions and then place in clean containers.One9
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