【农业行业标准(NY)】 乳与乳制品中蛋白质的测定 双缩脲比色法

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中华人民共和国农业行业标准
NY/T1678—2008
乳与孚制品中蛋自质的测定
双缩脲比色法
Determination of protcin in milk and dairy productsBiurct spectrophotomctry method2008-10-20 发布
2008-10-20实施
中华人民共和国农业部发布
本标准中华人民共和国农业部备牧业同提出。本标准山企图畜牧业标准化技术委员会与。NY/T 1678
本标准起草单位：国农业大学，农业部奶及奶制品质量监督检验测试中心（北京），表业部食品质量监检验测试中心（上海），农业部乳品质量监督检验测试中心。本标准十安起草人：侯彩云、王加启、刘反岩、韩奕奕、魏宏阴、刘莹、二心、作巍、安瑜、芮闯、孙建平陈婧。
本标准为节次发布。
1范围
乳与乳制品中蛋自质的测定
双缩脲比色法
本标规定了测定乳与乳制品中质含量的方法。不标准适用了乳与乳制品中蛋白质含案测定：本方法出腹为；×:09/130。
2规范性引用文件
NY/T 1678-2008
下列文件中的条款通过术标准的引而成为木标准的条款。儿是注月期的引用文件，其随后所有的修改单(不他活勘误的内容)或修证版均不适用工木标准，然而，鼓动根据本标准达成协议的各方研究足否可使这义件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本迈用丁本标准GB3/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
利而一氛乙酸沉凝样显中的蛋质，将汇淀物与双缩试剂进行昆色，遇过分光度计测定显色液的吸光度值：采用外称法定量,计算样品中蛋白,资含员。4试剂与材料
除非引有规定，使用分析纯试剂刮符合（%/下6682的二级水。4.1四氮化碳
4.2璐蛋白标准品（纯度299%），4.310mol/L氢氧化钾溶液：准硼称双560g氢氧化饵.加水溶解并定容充14.42150g/1.消在酸钎钠浒液：准研称取250g酒石针钠，加水辫解并定容年L4.508/「.硫酸钢溶液：准硫称取4g统酸制加水游解并定深雀114.6150/L一氛7峻溶液：准确称取5氯乙，加水溶解并定容个：L4.7双能原试剂：将10mol/L氢氧化钾济液10mL和2:0g/1.洒石酸伴钠溶液20m加到约800:nl蒸溜水巾刷烈搅托.向时慢慢加人40g/1.巯酸铜率液30ml.，定容个1000r1L5仪器和设备
5.1大平，感董±0.0001g
5.2高速冷冻离心机，
5.3分米光度计
5.4超市波消洗器。
6测定步骤
6.1标准曲线的制备
取6支试管，按表1加人臀门标准品和双缩娠试剂.充分混NY/T 1678 2008
格距门标准品,m
双缩服：m
蛋浓度.g
6.2样品前处理
6.2.1固体试样
表标准曲线的制作
准确称. 2g试样.肾下 5 ml.离心管,加人 ml.水。6.2.2液体试样
确称驳.试样于5离心管中。
6.2.3沉淀和过滤
灿人150 g/1.的氯乙酸溶液5ml.静宵:0min使聋充分沉淀,在000/mn下离心13 mn倾去上清液,经9%乙醇10 m[. 洗涤。应沉淀中加人四氯化磁2ml.和双缩脲试剂20 rml..胃T超声波清洗器荡均匀使岱门溶解，静置最色10rnin，在10o00r/min下离心，20min，取上层清液.待测。6.3蛋自质含量的测定
在6.1制备的标准窃液中，以C合调零，E40nm下测定各标准溶液的吸光度值，以吸光度值为纵坐标，以表1小的蛋质浓度为横坐标.绘制称准由线。同时测定6.2.3提取的蛋门液的吸光度值.并根据标准山线的线性回叫方程读取制各样品的强浓度心7结果计算
试样中蛋白质含以质品分数m计·数值以克每百克(g/100)表示，结果按式(1)计算：(1)
100g奶粉中蛋点质的含量，单位为克每而克g/10))：样量.单位为克(g)：
试液蛋浓度，单位为毫克毫升(/㎡[)。注测定结实用中行测定的算本平均值表小·保留一位有效数产8精密度
在更复性条件下获得的两次独之测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10兴。2
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