【国家标准(GB)】 保健食品中免疫球蛋白IgG的测定

ICS67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T5009.194--2003
保健食品中免疫球蛋自IgG的测定Determination of immunoglobulin in health foods2003-08-11发布
中华人民共和国卫生部
中国国家标化管理委员会
2004-01-01实施
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人：杨祖英、宋书锋。GB/T5009.194—2003
GB/T5009.194—2003
免疫球蛋白IgG，目前已作为功效成分添加于保健食品中，该成分对于增强免疫力、调节动物体的生理功能和某些特定物质的代谢等均有一定效果。本方法在参考新西兰健康食品有限公司免疫球蛋白IgG测定方法的基础上，根据我国的仪器设备条件进行改进，建立了片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白含量的高效液相色谱测定方法。540
适用范围
保健食品中免疫球蛋IgG的测定
本标准规定了保健食品中免疫球蛋白IgG的测定方法。本标准适用于片剂、胶囊、粉剂类型保健食品中免疫球蛋白IgG的测定。GB/T5009.194—2003
本方法检出限：当取样量0.1g，稀释至25mL，进样量20μL时，检出浓度为0.5mg/mL。2原理
根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条作下免疫球蛋白IgG与配基连接，在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。3试剂
3.1流动相A：pH6.5,0.05mol/L磷酸盐缓冲液。3.2流动相B：pH2.5,0.05mol/L甘氨酸盐酸缓冲液。3.3IgG标准贮备液：称取IgG标准品（Sigma化学公司）0.0100g，用流动相A（3.1)溶解并定容至10.0mL，摇匀，浓度为1.0mg/mL。3.4IgG标准系列溶液：取IgG标准贮备液，用流动相A（3.1）稀释成含IgG0.20.4,0.6，0.81.0mg/mL的标准系列。临用时配制。4仪器和设备
高效液相色谱仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。5分析步骤
5.1试样处理：称取0.1g（精确至0.001g）试样，用流动相A（3.1)稀释至25.0mL，摇匀，通过0.45um微孔滤膜后进样。下载标准就来标准下载网
5.2先用5倍柱体积的重蒸水洗柱，再用10倍柱体积的流动相A(3.1)平衡柱，进样，按洗脱程序进行洗脱。
5.3HPLC参考条件
色谱柱：PharmaciaHI-TrapProteinG柱，1mL。波长：280nm。
进样量：20μL。
梯度洗脱表见表1。
流速/（mL/min）
GB/T5009.194—2003
结果计算
式中：
cXVx100
mx1000
—试样中IgG的含录，单位为克每百克（g/100g）X-
试样的质量，单位为克(g)，
被测液中IgG的含量，单位为毫克每毫升（mg/mL）；V试样定容的体积，单位为意升(mIL.)。计算结果保留两位有效数字。
精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。8色谱图
IgG峰
图1IgG标准色谱图
IgG峰
图2初乳素色谱图
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