【商检行业标准(SN)】 肉及肉制品中己烯雌酚残留量检测方法　酶联免疫法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1956—2007

肉及肉制品中己烯雌酚残留量检测方法
酶联免疫法

Determination of diethylstilbestrol residues in meat and
meat product—Enzyme linked immunosorbent assay

2007-08-06 发布2008-03-01 实施

前 言

本标准的附录A和附录B均为资料性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：孙俐、郑文杰、唐舟丹、魏亚东、张宏伟。

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

肉及肉制品中己烯雌酚残留量检测方法
酶联免疫法

1 范围

本标准规定了肉及肉制品中己烯雌酚残留量的酶联免疫测定方法。

本标准适用于鸡肉、猪肉、牛肉、羊肉、猪肉饼中己烯雌酚残留量的检测。

2 试样的制备和保存

2.1 试样的制备

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从所取全部样品中取出有代表性样品约 1 kg，充分搅碎，混匀，采用四分法，将样品分成两等份，装入洁净容器，加封并做标识。

2.2 试样的保存

试样放置-20℃~-18℃条件下保存。

3 测定方法

3.1 方法提要

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本方法的测定基础是竞争性酶联免疫反应。己烯雌酚与己烯雌酚酶标记物共同竞争己烯雌酚抗体的结合位点，用酶标仪测量微孔溶液的吸光度值，己烯雌酚浓度与吸光度值成反比，按绘制的校正曲线定量计算。

3.2 试剂和材料

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除另有规定外，所用化学试剂均为分析纯，或为更高级别。水为重蒸馏水。

• 3.2.1 己烯雌酚酶免疫定量测定试剂盒（参见附录A）。
• 3.2.2 叔丁基甲基醚；色谱纯。
• 3.2.3 石油醚。
• 3.2.4 二氯甲烷。
• 3.2.5 磷酸。
• 3.2.6 盐酸。
• 3.2.7 甲醇；色谱纯。
• 3.2.8 磷酸氢二钠（Na₂HPO₄·2H₂O）。
• 3.2.9 磷酸二氢钠（NaH₂PO₄·H₂O）。
• 3.2.10 氯化钠。
• 3.2.11 三羟甲基氨基甲烷。
• 3.2.12 磷酸盐缓冲液（67 mmol/L，pH=7.2）：称取 9.61 g 磷酸氢二钠、1.79 g 磷酸二氢钠和 8.7 g 氯化钠溶解于并定容至 1 000 mL 水中。
• 3.2.13 Tris缓冲液（20 mmol/L，pH=8.5）：称取 2.42 g 三羟甲基氨基甲烷溶解于 700 mL 水中，加入 200 mL 甲醇，用 5 mol/L 盐酸调节 pH 值至 8.5，加水定容至 1 000 mL。
• 3.2.14 洗涤用磷酸盐缓冲液（20 mmol/L，pH=7.2）：称取 2.85 g 磷酸氢二钠、0.55 g 磷酸二氢钠、9 g 氯化钠和 1 mL 吐温 20，溶解并定容至 1 000 mL 水中。
• 3.2.15 氢氧化钠溶液（1 mol/L）：称取 40 g 氢氧化钠溶于 1 000 mL 水中。