【农业标准】 饲料中氟哌酸的测定 高效液相色谱法

NY

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 1457—2007

饲料中氟哌酸的测定
高效液相色谱法

Determination of norfloxacin in feeds
——High-performance liquid chromatography

2007-12-18 发布 2008-03-01 实施

中华人民共和国农业部 发 布

前 言

本标准由中华人民共和国农业部提出。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。

本标准负责起草单位：中国农业科学院饲料研究所。

本标准起草人：满晨、干小英、刘庆生、邱华勇。

饲料中氟哌酸的测定
高效液相色谱法

1 范围

本标准规定了饲料中氟哌酸的测定方法。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中氟哌酸含量的测定。方法检出限0.005 g/kg。

2 规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 14699.1饲料采样

3 原理

在酸性条件下,饲料中的氟哌酸用乙酸和甲醇的混合溶液液液萃取,经固相萃取柱净化,HPLC仪测定。

4 试剂和材料

以下所用试剂,除特别注明外,均为分析纯试剂。水为符合 GB/T 6682 的二级水。

• 4.1氟哌酸标准品:1-乙基- 6 -氟- 1,4 -二氢- 7 -(1-哌嗪基)- 3 -喹啉羧酸(含量≥99%)。
• 4.2甲醇:色谱纯。
• 4.3乙腈:色谱纯。
• 4.450%甲醇溶液:取 50 mL 甲醇(4.2)用水稀释至 100 mL。
• 4.535%甲醇溶液:取 35 mL 甲醇(4.2)用水稀释至 100 mL。
• 4.64%乙酸溶液,取 4 mL 乙酸用水稀释至 100 mL。
• 4.7提取液:取 50 mL50%甲醇溶液(4.4)与 50 mL4%乙酸溶液(4.6)混合。
• 4.8碳酸钠溶液:100 g/L。
• 4.9盐酸溶液:C(HCl)=0.1 mol/L。
• 4.10氢氧化钠溶液:20 g/L。
• 4.11 20%氨水,取 8 mL 氨水用水稀释至 100 mL。
• 4.12磷酸二氢钾溶液:C(KH₂PO₄)=100 mmol/L,称取 13.6 g 磷酸二氢钾,用水溶解并稀释至1 000 mL,用磷酸调至 pH3~4,过 0.45 μm 滤膜。
• 4.13MAX洗脱液:35%甲醇溶液(4.5)用4%乙酸溶液(4.6)调至 pH3~4。
• 4.14MCX洗脱液(10%氢氧化铵甲醇溶液);取 40 mL 氨水用甲醇(4.2)稀释至 100 mL。
• 4.15 HPLC流动相:取 850 mL 磷酸二氢钾溶液(4.12)与 150 mL 乙腈(4.3),混合均匀。