【农业标准】 农药室内生物测定试验准则杀菌剂第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片法

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 1156.9—2008

农药室内生物测定试验准则 杀菌剂
第9部分:抑制灰霉病菌试验 叶片法

Guideline for laboratory bioassay of pesticides
Part 9:Detached leaf test for fungicide control Botrytis cinerea Pers.

2008-05-16 发布2008-07-01 实施

中华人民共和国农业部 发布

前 言

《农药室内生物测定试验准则 杀菌剂》为系列标准：

• ——第1部分：抑制病原真菌孢子萌发试验 凹玻片法；
• ——第2部分：抑制病原真菌菌丝生长试验 平皿法；
• ——第3部分：抑制黄瓜霜霉病菌病菌试验 平皿叶片法；
• ——第4部分：防治小麦白粉病试验 盆栽法；
• ——第5部分：抑制水稻纹枯病菌试验 蚕豆叶片法；
• ——第6部分：混配的联合作用测定；
• ……
• ——第7部分：防治黄瓜霜霉病试验 盆栽法；
• ——第8部分：防治水稻稻瘟病试验 盆栽法；
• ——第9部分：抑制灰霉菌病试验 叶片法；
• ——第10部分：防治灰霉病试验 盆栽法；
• ——第11部分：防治瓜类白粉病试验 盆栽法；
• ——第12部分：防治晚疫病试验 盆栽法；
• ——第13部分：抑制疫病菌试验 叶片法；
• ——第14部分：防治瓜类炭疽病试验 盆栽法；
• ——第15部分：防治麦类叶锈病试验 盆栽法；
• ——第16部分：抑制细菌生长量试验 浑浊度法；
• ……

本部分是《农药室内生物测定试验准则 杀菌剂》的第9部分。

本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。

本部分起草单位：农业部农药检定所。

本部分主要起草人：徐文平、朱春雨、刘学、吴新平、张薇、袁善奎、李钟华。

农药室内生物测定试验准则 杀菌剂
第9部分：抑制灰霉病菌试验 叶片法

1 范围

本部分规定了叶片法测定杀菌剂抑制灰霉病菌的试验方法。

本部分适用于农药登记用杀菌剂对黄瓜、番茄、草莓、葡萄等作物的灰霉病菌的室内生物活性测定试验。

2 仪器设备

普通实验室常规仪器设备。

1. 2.1  电子天平（感量0.1 mg）。
2. 2.2  喷雾器械。
3. 2.3  人工气候箱。
4. 2.4  移液管或移液器等。

3 试剂与材料

方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯；水为蒸馏水。

1. 3.1  生物试材
   供试病菌为野生敏感型灰葡萄孢霉 Botrytis cinerea Pers. 菌株。记录菌种来源。
   供试作物为感灰霉病品种，剪取充分展开、叶龄一致、带有1 cm～2 cm叶柄的健康叶片，用湿棉球包裹叶柄放置在培养皿中，保湿备用。
2. 3.2  试验药剂
   原药（或母药）。
3. 3.3  对照药剂
   采用已注册登记且生产上常用的原药（或母药），其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。

4 试验步骤

1. 4.1  药剂配制
   水溶性药剂用蒸馏水溶解稀释。其他药剂选用合适的溶剂（甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜等）溶解，用0.1%吐温-80或其他合适表面活性剂的水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个～7个系列质量浓度，有机溶剂最终含量一般不超过0.5%～1%。制剂可以直接用水稀释。
2. 4.2  药剂处理
   将药液均匀喷施于叶片背面，每处理10片叶，重复4次。待药液自然风干后，将各处理叶片叶背向上，按处理标记后排放在培养皿中保湿，并设只含溶剂和表面活性剂而不含有有效成分的处理作空白对照。
3. 4.3  接种与培养
   用接种器将直径5 mm菌斑有菌丝的一面接种于处理叶片背面。保护作用试验在药剂处理后24 h