【农业标准】 农药室内生物测定试验准则杀菌剂第13部分：抑制晚疫病菌试验叶片法

农药室内生物测定试验准则 杀菌剂

第13部分：抑制晚疫病菌试验 叶片法

1 范围

本部分规定了叶片片法测定杀菌剂抑制晚疫病生物活性的试验方法。

本部分适用于农药登记用杀菌剂对番茄和马铃薯晚疫病菌的室内生物活性测定试验。

2 仪器设备

普通实验室常规仪器设备。

1. 电子天平（感量0.1mg）。
2. 喷雾器械。
3. 人工气候箱或光照保湿箱。
4. 生物培养箱。
5. 移液管或移液器等。

3 试剂与材料

方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分析纯；水为蒸馏水。

3.1 生物试材

供试病菌为野生敏感型致病疫霉 Phytophthora infestans (Mont.) de Bary 菌株。记录菌种来源。

供试作物为感晚疫病番茄或马铃薯品种，在盆栽苗上选择相同叶位、长势一致的叶片，从叶柄1cm～2cm处剪下，用湿棉球包裹叶柄放置培养皿中，保湿备用。

3.2 试验药剂

原药（或母药）。

3.3 对照药剂

采用已登记注册且生产上常用的原药（或母药），其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。

4 试验步骤

4.1 孢子囊悬浮液制备

将试验用病原菌在适宜的培养基上培养，或将病组织保湿培养。待产生孢子囊后，用无菌水洗下孢子，用双层纱布过滤，制成孢子囊悬浮液，置于4℃低温下，黑暗处理0.5 h～3 h，使其释放出游动孢子，并调节孢子浓度至1×10⁶个孢子/L，备用；或直接配制 1×10⁶个孢子囊/mL 悬浮液作为接种体。

4.2 药剂配制

水溶性药剂直接用蒸馏水溶解稀释。其他药剂选用合适的溶剂（甲醇、丙酮、二甲基甲酰胺或二甲亚砜等）溶解，用0.1%的吐温-80或其他合适的表面活性剂水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个～7个系列质量浓度，有机溶剂最终含量一般不超过0.5%～1%。制剂可以直接用水稀释。

4.3 药剂处理

将药液均匀喷施于叶片背面，待药液自然风干后，将各处理叶片背面朝上，按处理解标记后排放在保...