【商检行业标准(SN)】 出口家禽新城疫病毒检验方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 0764—1999

出口家禽新城疫病毒检验方法

Inspection method on newcastle disease virus
in poultry for export

前言

本标准是根据GB/T 1.1—1993《标准化工作导则 第1单元：标准起草与表述规则 第1部分：标准编写的基本规定》的要求进行编写的。其中病毒分离鉴定、脑内接种致病指数(ICPI)、静脉内接种致病指数(IVPI)、鸡胚平均死亡时间(MDT)的测定方法等均采用国际兽医局《动物疾病诊断方法和疫苗使用标准手册》的方法，并根据实际，使之进一步具体化，同时制定了抽样和制样方法。

本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。

本标准由中华人民共和国山东进出口商品检验局负责起草。

本标准主要起草人：管恩平。

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

出口家禽新城疫病毒检验方法 SNT/T 0764-1999

Inspection method on newcastle disease virus
in poultry for export

1 范围

本标准规定了出口家禽样品的采集、新城疫病毒分离、毒力检验鉴定、检验方法和结果判定等。本标准适用于出口家禽新城疫病毒的检验鉴定。

2 术语

新城疫是家禽的一种急性传染病。其病原新城疫病毒（NDV）是副粘病毒属的副粘病毒I型，该病毒多呈圆形，直径100~500 nm，基因组为单股RNA，可凝集人、鸡、小鼠等多种动物的红血球（RBC）。

SPF鸡胚：将无特定病原（SPF）鸡所产的受精蛋孵化到试验要求的日龄。

判定所分离新城疫病毒毒力的指标为：对鸡胚平均致死时间（MDT），对1日龄小鸡的脑内接种致病指数（ICPI）或者对6周龄小鸡的静脉接种致病指数（IVPI）。

强毒力的新城疫病毒，MDT≤60 h，ICPI≥1.6，IVPI可达3.0；

中等毒力的新城疫病毒，60 h

弱毒力的新城疫病毒，MDT>90 h，ICPI≤0.4，IVPI可达3.0。

HA与HI效价用2的指数次方表示，如16，即1:256。HA效价表示病毒的凝集活性；HI效价表示抗血清的血凝抑制活性。

出口家禽中主要是肉鸡检测新城疫病毒，本方法描述对以禽为主要对象，其他家禽NDV检测方法同本法。

3 器材与试剂

3.1 器材

3.1.1 仪器：分析天平、普通离心机、微型振荡器、煮沸消毒器、冰箱、高压消毒器、微量移液器、滴头、血凝反应板、孵化箱、出雏箱、培养皿、牙签、医用脱脂棉、玻璃瓶、注射器（1 mL）、注射针头（7号）、干燥箱。

3.1.2 试剂：磷酸氢二钠（AR），碳酸氢钠（AR），氯化钠（AR），青霉素，链霉素，卡那霉素，胰酶素，营养琼脂（AR）或肉汤（AR），柠檬酸钠（C₆H₅O₇Na·2H₂O）（AR）、蒸馏水。

3.1.3 SPF鸡胚（9~11日龄）：7日龄SPF鸡，6周龄SPF鸡（购自国家认可的SPF鸡场）。

3.2 试剂配制

3.2.1 棉拭子准备：将脱脂棉缠于牙签的尾端，使其形成直径0.4 cm的脱脂棉球。然后用牛皮纸包扎，每排10只，121℃高压15 min，备用。

3.2.2 pH7.2 磷酸缓冲液（PB）：由0.15 mol/L A、B两液组成。
A液：磷酸氢二钠（Na₂HPO₄·12H₂O）3.93 g加蒸馏水至73 mL。