【农业标准】 肠病毒性脑脊髓炎诊断技术

ICS 11.220
B 41

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 568—2002

肠病毒性脑脊髓炎诊断技术

Diagnostic techniques for enterovirus encephalomyelitis

2002-08-27 发布2002-12-01 实施

中华人民共和国农业部  发  布

前言

本病属于细小核糖核酸病毒科的肠道病毒属肠道病毒1型（简称PEV）。病毒主要感染动物的中枢神经系统并繁殖，使运动神经节细胞变性，导致非化脓性脑脊髓炎。此病多见于哺乳仔猪和断奶仔猪，成年猪多为隐性感染，引起发烧、厌食、共济失调、四肢麻痹和痉挛。该病的发病率和死亡率都很高，造成严重的经济损失。

肠病毒性脑脊髓炎（Enterovirus encephalomyelitis），曾称做捷申/塔尔凡氏病（Teshen/Talfan disease），是猪的一种严重病毒性传染病，被世界动物卫生组织[World Organization for Animal Health (英)、Office International des Epizootic(法)，OIE]和我国农业部分别列为B类和二类动物疫病。

本标准是依据《OEI诊断试验和疫苗标准手册》（2000年版）（Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines, 2000）第2.6.3章规定的主要技术制定的。两者的主要差异是：

• ——本标准根据本国和国外实践经验规定了使用主要致病原PEV1型病毒作为抗原，未采用2-13型PEV，未采用酶联免疫吸附(ELISA)技术；
• ——本标准根据本国实践经验将操作程序更加具体化。

本标准附录A、附录B是规范性附录。

本标准由农业部畜牧兽医局提出。

本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：农业部动物检疫所。

本标准主要起草人：封启民、李昌琳。

肠病毒性脑脊髓炎诊断技术

1 范围

本标准规定了(猪)肠病毒性脑脊髓炎诊断技术要求。

本标准适用于(猪)肠病毒性脑脊髓炎的病原鉴定及流行病学检查，进行口检疫和免疫抗体的检测。

2 临床症状检查

临床上分为四个型，即急性型、亚急性型、慢性型和温和型。此外还有无症状仅检出抗体的隐性感染。根据临床症状和病理变化(见第3章)可作出怀疑性诊断。

该病潜伏期为2d~28d。

2.1 急性型

病猪首先出现体温升高，多在40.0℃~41.1℃左右或更高。病猪表现为厌食、倦怠、呕吐、严重鼻炎、腹泻及行动失调。发病1d~2d后，体温降至正常，出现中枢神经系统症状，如寒战，感觉过敏、抽搐、共济失调、四肢僵直(特别是后肢)、角弓反张和昏迷，接着发生麻痹。病猪呈犬坐姿或于一侧卧地，前肢作划水样。受声响或触摸刺激时，可引起四肢不协调运动，或角弓反张，也可见面部麻痹和失音。病猪发生便秘。传染性脑脊髓炎的病程发展迅猛，瘫痪出现后的2d~3d，就有80%～95%的病猪可因呼吸中枢麻痹而死亡，有些病猪死于吸入性肺炎。有些病例急性期之后食欲有所恢复，但见消瘦并伴有麻痹症状。

2.2 亚急性型

病程为6d~8d，症状与急性型相似，但较轻缓，死亡较少。

2.3 慢性型

多发于成年猪。病程为几周到几个月。特征为沉郁、行动困难、尾部麻痹、前肢瘫痪。其中有20%的病猪因肺炎、褥疮、败血症等原因死亡。

2.4 温和型

毒力较低的毒株引起，症状较轻，发病率和死亡率较低，主要侵害仔猪。病初体温升高，运动失调。这些症状大多在几天内消失，但有些病猪则随后出现兴奋、发抖、平衡失调、运动失调，最后麻痹等症状。

3 组织病理学检查

组织学诊断采集的样品有大脑、小脑、间脑、延髓和颈腰部脊髓。这些样品用甲醛固定，制成切片，用常规组织学方法染色。显微镜检查可发现血管周围非化脓性淋巴细胞浸润，浸润现象限于灰质部。偶尔波及白质部。间脑和小脑有明显的变化；大脑半球较轻。病的后期神经元细胞变性，并被胶质结缔组织细胞代替；常见非化脓性脑脊髓炎，特别是在小脑部分。

4 病毒分离及鉴定

4.1 材料准备

4.1.1 病料的采集

将发病期的猪扑杀，用无菌操作法取脑和脊髓样品，放在 pH7.2的磷酸甘油缓冲液(PBS)中。