【其他行业标准】 血清中碘的测定标准 电感耦合等离子体质谱法

ICS 11. 020
CCS C 61
中华人民共和国卫生行业标准
WS/T 783—2021
血清中碘的测定标准电感耦合等离子体质谱法
Determination of iodine in serumInductively coupled plasma mass spectrometry2021-07-08发布
2022-01 －01 实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会发布前
WS/T7832021
本标准起草单位：福建省厦门市疾病预防控制中心、安徽省疾病预防控制中心、中国疾病预防控制中心营养与健康所。
本标准主要起草人：张亚平、李卫东、黄淑英、李秀维、徐署东、王海燕、李呐、刘婷婷。1范围
WS/T783—2021
血清中碘的测定标准电感耦合等离子体质谱法本标准规定了测定血清中碘的电感耦合等离子体质谱法。本标准适用于血清中总碘的测定。2原理
血清样品经抗坏血酸-氯化铵-乙醇胺-乙醇混合水溶液稀释后，引入电感耦合等离子体质谱仪，经进样系统雾化，以氩气为载气带入电感耦合等离子体炬焰中，经过蒸发、解离、原子化、电离等过程将待测碘转化为带正电荷的正离子，经离子采集系统进入质谱仪，质谱仪根据离子质荷比进行分离，并由检测器检测碘离子计数，样品中碘的浓度与碘的离子计数成正比，以为内标做内标校正，由碘标准曲线计算得血清中碘的浓度。
3仪器
电感耦合等离子体质谱仪。
分析天平：感量为0.1mg。
3.3旋涡混合器。
试管：聚丙烯离心试管（15mL）或玻璃试管（15mm×120mm）。3.5
定量移液器：200μL，1000μL，5000μL。3.6
玻璃移液管：5mL刻度移液管和10mL单标移液管。3.73
容量瓶：100mL、500mL、1000mL。3.8离心机。
4试剂
4.1纯水，电阻率≥18MQ·cm，其余指标符合GB/T6682一级水规定。4.2抗坏血酸（C6H:O6），优级纯。4.3氯化铵（NH4C1），优级纯。4.4
乙醇胺（C2HNO），分析纯。
无水乙醇（C2H6O），优级纯。
4.6碘酸钾（KIO3），基准试剂或标准物质。4.7单元素标准溶液（Re，浓度1000μg/mL），标准物质。WS/T783—2021
4.8质谱调谐液，推荐使用锂（Li）、钴（Co）、钇（Y）、铟（In）、铈（Ce）、铊（T1）、铀（U）混合调谐溶液，各元素浓度均为1μg/L或10μug/L。4.9氩气（Ar），纯度≥99.999%。5溶液配制
5.1稀释剂（含2.0g/L抗坏血酸、1.0g/L氯化铵、体积分数0.10%乙醇胺和体积分数1.0%乙醇溶液）
称取2.0g抗坏血酸（4.2）和1.0g氯化铵（4.3）溶于约800mL纯水（4.1）后，加入1.0ml乙醇胺（4.4）、10mL无水乙醇（4.5），再加纯水（4.1）稀释至1000mL，摇匀。室温下避光存放，1周内使用。
5.2清洗液
同稀释剂（5.1），室温下避光存放，1周内使用。5.3碘标准储备溶液[p(I）=100μg/mL]准确称取0.1686g经105℃～110℃烘干至恒重的碘酸钾（4.6），加纯水（4.1）溶解，并用纯水（4.1）定容至1000mL，摇匀。储于具塞严密的棕色瓶，置4℃冰箱可保存6个月。或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质。5.4碘标准中间溶液[p(I）=10μg/mL]吸取10.00mL碘标准储备溶液（5.3）置于100mL容量瓶中，用纯水（4.1）定容至刻度，摇匀。储于具塞严密的棕色瓶，置4℃冰箱可保存1个月。5.5碘标准使用系列溶液[p(I=0μg/L～300μg/L]使用前吸取碘标准中间溶液（5.4）0mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、3.00mL分别置于100mL容量瓶中，用纯水（4.1）定容至刻度，摇匀。此标准系列溶液的碘浓度分别为0μg/L、50μg/L、75μg/L、100μg/L、150μg/L、200μg/L、300μg/L。5.6内标中间溶液[p(Re）=10μg/mL]吸取1.00mL单元素标准溶液（4.7）置于100mL容量瓶中，用纯水（4.1）定容至刻度，摇匀。置4℃冰箱可保存3个月。
5.7内标使用溶液[p(Re）=4μg/L]3
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吸取0.10mL中间溶液（5.6）置于250mL容量瓶中，用稀释剂（5.1）定容至刻度，摇匀。室温下避光存放，1周内使用。
6样品采集和保存
使用一次性真空非抗凝采血管采集不少于2mL血液，室温静置0.5h后，于3000r/min离心10min，分离出血清置于具塞聚乙烯塑料管中，严密封口以防水分蒸发。在20℃下可保存1周；在4℃下可保存1个月；在-20℃下可保存3个月；在-80℃下可保存6个月。7分析步骤
7.1仪器操作主要参考条件
射频功率为1550W；载气流速为1.0L/min；采样深度为8mm；雾化器温度为3℃。待测液：内标液为1：1在线引入内标使用溶液（5.7）。两次进样期间，由仪器进样管路引进清洗液（5.2），清洗时间20s。
7.2待测液的制备
将低温保存血清样取出，恢复到室温。充分摇匀血清样。分别取0.20mL碘标准使用系列溶液（5.5）和血清样［如果血清样的碘浓度超出标准曲线的碘浓度范围，则用纯水（4.1）稀释（记录稀释倍数）后取样各置于试管（3.4）中，各加入3.80mL稀释剂（5.1），使用旋涡混合器混匀，作为碘标准系列待测液和血清样待测液。同时用0.20mL纯水（4.1）代替血清样，按样品同样处理，作为试剂空白，配制5份试剂空白待用。
7.3预进样使用液的制备
准备3份不同人血清样，各充分摇匀后，各取0.20mL分别置于3支试管（3.4），各加入3.80mL稀释剂（5.1），使用旋涡混合器混匀后，将这3管稀释样液合并，作为预进样使用液。7.4仪器调谐与测定方法设置
开机，当仪器真空度达到要求后，点燃等离子体，预热30min后，用质谱调谐液（4.8）校验调整仪器各项指标，使仪器灵敏度、氧化物、双电荷分辨率等各项指标达到仪器测定工作状态要求后，编辑测定方法，选择测定目标元素碘（127I）及内标元素（187Re）。在仪器工作站中，设置对碘标准待测液的测定信号自动做内标校正和扣除标准空白（标准使用系列溶液0μg/L对应的待测液管），对血清样待测液的测定信号自动做内标校正和扣除试剂空白。7.5仪器测定血清碘前的操作顺序4
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在测定标准曲线之前，使用清洗液（5.2）、预进样使用液（7.3）、内标使用溶液（5.7）将仪器运行至测定血清碘的适宜状态，操作顺序参见附录A表A.1中的1～3。7.6标准曲线的测定
依次将试剂空白（7.2）、碘标准系列待测液（7.2）引入仪器测定，操作顺序参见附录A表A.1中的4～5。以对应测得碘计数的校正值（经内标校正和扣除标准空白）为纵坐标，或以对应测得的碘计数值对内标计数值的比值（扣除标准空白的对应比值）为纵坐标，以0μg/L～300μg/L碘标准使用系列溶液（5.5）的碘浓度（μg/L）为横坐标，利用仪器自带软件绘制标准曲线及计算标准曲线回归方程。
7.7样品及试剂空白的测定
以标准曲线测定的相同仪器条件测定试剂空白（7.2）及血清样待测液（7.2），操作顺序参见附录A表A.1中的67。以测得样品待测液碘计数的校正值（经内标校正和扣除试剂空白），利用仪器自带软件以对应的标准曲线回归方程计算血清样的碘浓度（μg/L）；或以测得样品待测液的碘计数值对内标计数值的比值（扣除试剂空白的对应比值），利用仪器自带软件以对应的标准曲线回归方程计算血清样的碘浓度（μg/L）。
8计算
按式（1）计算血清中碘的质量浓度：p(I)=p×
式中：
p（I）——血清中碘（I）的质量浓度，单位为微克每升（μg/L);（1）
Po—E
由标准曲线回归方程计算得到的血清样中碘的质量浓度，单位为微克每升（μg/L）；K—— 血清样以纯水稀释的稀释倍数。9方法特性
9.1检出限和测定范围
本法对血清碘的检出限为1.3μg/L（取血清样量为0.20mL），可直接取样加稀释剂测定碘浓度范围0 μg/L～300 μg/L的血清样。9.2精密度和准确度
本法精密度和准确度结果参见附录B质量保证和质量控制
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10.1血清样品在现场采集、运输、分离血清及其保存过程中应避免与加碘物品接触，应避免碘污染。10.2实验环境、器皿及试剂应避免碘污染。实验过程应避免外界环境引入碘污染。10.3每批次样品测定应配制和测定标准系列，标准曲线回归方程的线性相关系数应≥0.999。10.4仪器进样时的每个样品提升时间应使其待测液在进样管路内到达雾化器后至少平衡15s，才开始扫描记录；测定计数扫描时间应满足可得到稳定的计数值的需要。10.5每测定20个样品后应重复测定100μg/L碘标准使用溶液的待测液，结果相对误差的绝对值应≤10%。
10.6宜采用测定平行样、加标回收样及水溶性生物样品碘标准物质作为质量控制手段。平行样测定的相对偏差应≤10%；加标回收率应在90%110%范围；质控标准物质测定值应在给定值范围6
附录A
（资料性）
仪器测定血清碘的参考操作顺序WS/T783—2021
在完成分析步骤7.4之后，为降低血清样品对仪器采样锥锥口可能产生的影响，提供测定血清碘的参考操作顺序见表A.1。
表A.1仪器测定血清碘的参考操作顺序操作顺序
吸样液线管的吸液位置
清洗液（5.2）
预进样使用液（7.3）wwW.bzxz.Net
清洗液（5.2）
试剂空白（7.2）
标准系列待测液（7.2）
试剂空白（7.2）
血清样待测液（7.2）
吸内标液线管的吸液位置
清洗液（5.2）
内标使用溶液（5.7）
内标使用溶液（5.7）
内标使用溶液（5.7）
内标使用溶液（5.7）
内标使用溶液（5.7）
内标使用溶液（5.7）
运行10min～15min
运行约10min
运行3min～5min
运行3个进样测定循环
运行标准曲线测定
运行2个进样测定循环
运行血清样及质控样测定
B.1精密度
附录B
（资料性）
方法的精密度和准确度
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五家实验室共对含碘40.0μg/L～277.9μg/L的26个血清样各做6次重复测定，一家实验室对含碘59.7μg/L～232.5μg/L的8个血清样各做3次重复测定，相对标准偏差为0.3%～2.4%。B.2样品加标回收率
六家实验室共对含碘43.6μg/L～232.5μg/L的36个血清样各做3次重复测定加标回收率，加入的碘浓度为50μg/L～100μg/L，加标回收率为92.6%～108.5%。B.3基体成分干扰实验结果
在本法条件下，以下浓度的基体物质不干扰测定：11g/LNaCl，1.5g/LHPO42-，1.1g/LNO3，560mg/LNH4+，300 mg/LK+，200mg/LCa2+,400mg/LMg2+，2mg/LF-,2mg/LFe2+，2mg/LZn2+，2mg/LCu2+，0.05mg/LHg2+，10g/L葡萄糖，3g/L尿素，2g/L甘氨酸，100mg/L抗坏血酸，100g/L蛋白。B.4与血清中碘的测定的另一标准方法对比测定结果六家实验室各进行了本法（X）与WS/T572-2017方法（Y）测定相同血清样品碘含量的结果对比实验，汇总统计结果见表B.1。
两种方法测定血清样碘含量结果的比较表B.1
测定结果范围/（μg/L）
41.7~264.6
49.7~254.8
50.4~ 247.5
42.9~260.3
44.7~ 259. 3
51.8~227.1
WS/T572-2017方法
43.1 ~ 261. 9
49.6~260.1
48.4~249.0
43.1~260.5
43.5~252.4
52.6~229.6
注：血清样在实验室间是不同的。两法结果相关回归方程
Y=bX+a
Y=0.998X-0.36
Y=1.026X-3.57
Y=1.034X-4.65
Y=1.008X-1.30
Y=0.995X-0.58
1.017X0.67
相关系数
t值，P值
1.304，>0.05
1.076，>0.05
1.746，>0.05
1.139，>0.05
参考文献
7血清中碘的测定砷铈催化分光光度法WS/T572—2017
WS/T783—2021