【SN商检标准】 国境口岸澳洲大蠊形态及DNA条形码鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4280.3—2016
国境口岸澳洲大形态及
DNA条形码鉴定方法
Morphological and DNA barcoding identification of Periplaneta australasiae(Fabricius，1775)atthefrontierport2016-08-23发布
中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2017-03-01实施
SN/T4280.3—2016
SN/T4280《国境口岸澳洲大形态及DNA条形码鉴定方法》共分为以下四个部分：SN/T4280.1
SN/T4280.2
SN/T4280.3
SN/T 4280.4
国境口岸红头丽蝇DNA条形码鉴定方法；国境口岸德国小形态及DVA条形码鉴定方法；国境口岸澳洲大形态及DNA条形码鉴定方法；国境口岸美洲大形态及DNA条形码鉴定方法。本部分为SN/T4280的第3部分。
本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国广东出人境检验检疫局本部分主要起草人：胡佳、岳巧云、邱德义、吴可量、陈健、魏晓雅、刘德星。1范围
国境口岸澳洲大形态及
DNA条形码鉴定方法
SN/T4280.3-—2016
SN/T4280的本部分规定了澳洲大嫌Periplanetaaustralusiae（Fabricius，1775）成虫的形态鉴定、所有世代个体以及形态不完整成虫的DNA条形码鉴定、判定程序和方法。本部分适用于国境口岸对澳洲大成虫的形态、所有世代个体及形态不完全成虫标本的DNA条形码鉴定工作。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件：医学媒介生物标本采集、制作及保存规程SN/T 1876
SN/T4278
3国境口岸医学媒介昆虫DNA条形码鉴定操作规程3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件
前足股节腹缘刺式frontfemurtypeA型：腹缘端部具2个~3个大刺，腹缘具一列大刺。B型：腹缘端部具2个～3个大刺，腹缘近端部具一列小刺，近基部具几个大刺。C型：腹缘端部具大刺，腹缘具一列小刺。D型：腹缘端部具大刺腹缘光滑，无刺或具一些微小的毛。端刺的数目用数字表示，标记在类型的后面。如A型具2或者3个大端刺，则表示为A2或A3型。参见附录A。3.2
爪型clawtype
指前谢节瓜的类型，分为4种类型。1：瓜对称，不特化。2：瓜不对称，不特化，3：不对称，特化，呈锯齿状。4：爪不对称，特化，呈锯齿状。参见附录B3.3
supra-analplate
肛上板
由雄性量嫌腹部第10背板或雌性嫌第8背板特化而成，两后侧端着生尾须。其形状，是否特化是否对称，是重要的分属和分种的依据。3.4
下生殖板hypandrium
由雄性璧腹部第9腹板或雌性第7腹板特化而成，它的形状多样，特化形式多，后缘是否凸出，是否回陷，是否具齿，对称与否等是重要的分属及分种的依据1
SN/T 4280.3—2016
雄性外生殖器malegenitalia
由左阳茎leftphallomere、中阳茎mcdianphallomere、右阳茎rightphallomere组成。雄性外生殖器的种间变化程度大，特化形式多样，是董分属和分种的重要依据。董科的阳茎主要由左阳茎和右阳茎组成。
4形态鉴定
4.1原理
澳洲大的成虫依照其形态特征进行和人镰属分种检索表见附录D。
4.2标本的制作和保存
标本的制作和保存见SN/T1876。4.3形态鉴别要点
地位和国内外分布参见附录C。董亚科分属体躯大形，足赤褐色，腹部赤褐色，前胸背板中部有两个对称的深褐色大斑，两大斑分开较明显，不向后延伸呈须状。前翅前缘基部具黄色条纹。4.4成虫形态特征
4.4.1整体形态
雄同型。体长23mm~35mm（参见附录E图E.1和图E.2）4.4.2胸部
前胸背板呈梯形，前缘平直后缘弧形，背板淡黄色或淡褐色，中部有两个对称的深褐色斑，两大斑分开较明显（参见图E.1）。前趣褐色，前缘基部具黄色条纹.发育完全·长度超过腹部末端（参见图E.2)。前足股节腹缘刺式A3型。前谢节瓜具中垫，爪对称，不特化4.4.3腹部
雄虫肛上板后缘近梯形，中部缓弧形凹陷，两侧角尖锐，尾须圆锥形，基部膨大，端部尖锐（参见图E.3）。雌虫肛上板窄小，略呈三角形，后缘有一小切口，基部两侧生尾须1对，形同维虫尾须。雄虫肛侧板横阔，左右对称。雄虫下生殖板与肛上板等长，后缘中部缓弧形凹陷，两侧角钝圆。尾刺圆柱形。雌虫下生殖板似船底形（参见图E：4）。雄虫左阳茎钩状骨片细长，钩短且稍扭曲，端部尖锐，近端部具平圆降起。钩右侧骨片具三个尖锐凸出（参见图E.5）。右阳茎内侧骨片近“I”型；钩状骨片短小；有后侧具两个尖锐凸起（参见图E.6）。4.5结果判定
成虫形态符合4.3～4.4者，判定为澳洲大嫌成虫。2
-rKAoNiKAca
5DNA条形码鉴定
5.1仪器及试剂耗材
见SN/T4278。
5.2取样
形态完整的标本见SN/T4278。肢体残缺的标本取任何部位的组织。SN/T4280.3-—2016
注1：尽量减小组织块的大小，尽可能保持凭证标本的外部形态的完整性，尤其是具有重要分类意义的形态特征。5.3
鉴定步骤
标本的前处理、基因组DNA的提取、引物、DNA条形码片段的扩增、扩增产物的检测、测序、序列比对见SN/T4278。
5.4参比序列
GGTCAACAAATCATAAAGATATTGGAACTTTGTATTTCATCTTTGGTGCTTGATCGGGTATAGTGGGAACATCATTAAGAATATTAATTCGTGCTGAACTTCGTCAACCTGGTTCATTAATTGGAGATGATCAAATTTATAATGTAATTGTAACTGCACAIGCTTTICATTATAATTTTCTTCA
TAGTAATACCAATTATAATTGCCGGATTTGGTAATTGATTAGTTCCATTAATATTAGGAGCTCCAGATATAGCATTTCCACGAATAAACAATATAAGATTTTGATTATTACCTCCTTCATTAACATTACTATTAGCGAGCAGCATGGTAGAAAGAGO
TGCTGGTACAGGATGAACAGTA
ACATGOTGGAGCATObZxz.net
TGTTGATTTAGCAATTTTTT
TACCCACCATTAGCAAGAGGTATTGCA
CATTACATTTAGCTGGTGTCTCTTCAATTCTAGGAGCCGTAAATTTTATTTCAACAACAATTAATATAAAACCAATCAATATAAAACCAGAACGAATTCCACTTATTTGTTTGATCTGTAG
CAGTTCTTGCTGGAGCAATCACAATACTCTATTACAGCTTTATTATTGT
ITACTATCATTACC
ATTAACTGACCGAAACTTAAATAC
TCCTTCTTTGACCCTGCTGGAGGAGGTGATCCAATTCTCTATCAACATTTATTTTGATTTTTTGGTCACCCTGAAGTTTA注2：粗斜体为引物序列，序列分析时不包含引物部分GBA16392-14)
5.5结果判定
（澳洲大DNA条形码BOLD系统参考序列号为目标序列与BOLD数据库中的澳洲大嫌相似性大于或等于99%者，则可判断为澳洲大。若相似性小于99%大于98%者，需参考形态学进行综合判断。小于或等于98%者，不予以DNA条形码种类判断。
TKAoNKAca
SN/T4280.3—2016
附录A
（资料性附录）
董足及前足股节刺式
董足及前足股节刺式见图A.1~图A.5。胫节
前谢节
具关节的刺
图A.2前足股节内缘刺式A型
图A.4前足股节内缘刺式C型
董足结构示意图
图A.3前足股节内缘刺式B型
图A.5前足股节内缘刺式D型
前传片
kAoNiKAca
墨趾节及爪式见图B.1~图B.5。
塑瓜片
前节降
肌表皮图
附录B
（资料性附录）
蛋节及爪式
图B.2前节爪对称，不特化
图B.4前节爪对称，特化
董前节示意图
中垫垫
對分节
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图B.3前节爪不对称，不特化
图B.5前节爪不对称，特化
rKAoNiKAca
SN/T4280.3—2016
C.1分类地位
附录C
（资料性附录）
澳洲大的分类地位和分布
澳洲大Periplanetaaustralasiae（Fabricius，1775）隶属于动物界（Animalia），节肢动物门（Arthropoda），昆虫纲（Insecta），蟹目（Blattaria），科（Blattidae），大属（Periplaneta）。C.2医学重要性
澳洲大是我国蟹目室内三大害虫之一，擎生在卫生问排污管、厨房下水道中，晚间出来偷吃餐厅厨房的食品，边吃边拉边吐，污染食物，能携带肠道致病毒、黄曲霉菌、脊髓灰质炎病毒、虫卵等。C.3
款分布
国内：福建、云南、贵州、广东、广西、海南、台湾等。国外：热带和亚热带地区国家
-iiKAoNrKAca
D.1董亚科Blattinae分属检索表附录D
（规范性附录）
董亚科常见属、种检索表
SN/T4280.3—2016
1腹部背板第6节～7节后缘凹陷，侧缘向上，雌雄虫都无后翅，前翅退化，呈两小叶片状，位于中胸背板两侧
斑属NeostylopygaShelford，1911腹部背板第6节～7节后缘不凹陷侧缘不向上倾，至少雄虫具翅，前翅充分发育.?
爪垫极其退化，几乎不存在，雌雄异形明显，雌虫前翅短，后翅缺，雄虫腹部第1节背板不特化……·2
黄属BlattaLinnaeus，1758
不垫发育完全，雌雄二型通常不明显，翅的发育程度儿乎一致·雄虫腹部第1节背板常特化33前胸背板扁平，圆盘形或多边形，两侧缘不倾斜，最宽处在中部或硝后一点平板属HomalosilphaStal，1874前胸背板拱形，儿乎梯形，两侧缘倾斜·最宽处在接近后缘··
体形小，雌雄虫前后翅常常短于腹部末端或少超过腹部未端…4
·郝氏蛹属
体形大。雌雄虫前后翅均超过腹部末端D.2大属Periplaneta分种检索表1雌雄异型。雄虫前后翅长度超过腹部末大蝶
Hebardina Bey-Bienko,1938
Periplaneta Burmeister,1838
雌虫前后趣长度不超过部末端
雌雄同型。雌雄前后翅长度均
超过腹部未端
2雌雄虫异型明显。前胸背板黑褐色，不具斑。
部中部。雄虫肛上板近梯形，两侧角尖锐凸出雌雄异型不明显。前胸背板褐
雕虫翅
长，长度超过腹部末端。雌虫翅短，长度仅达腹下生殖板后缘中部稍凹陷·
日本人
ipianetajapannaAsahina,1969
，具两个深褐色人
惠翅长·
长度仅达肛上板。雄虫肛上板梯形.两侧角圆滑
3前胸背板和前翅不具斑纹
前胸背板或前翅其斑纹
不凸出
度超过腹部末端。雌虫翅稍短，雄虫下
生殖板后缘中部弧形凸出·.
褐斑大
Per planetabrunneaBurmeister,1838黑胸大PeriplanetafuliginosaServille，1838.
4前胸背板具褐色蝶型斑，后缘中央向后延伸，不达前胸背板后缘。前翅无斑。雄虫肛上板半圆形，后缘中部具“V”型凹陷。维虫下生殖板后缘圆弧形，不具凹陷美洲大嵊Periplanetaamericana（Linnaeus，1758）前胸背板具两个深褐色大斑，后缘中央不向后缘延仲。前翅肩域具黄色条纹。雄虫肛上板梯形，后缘中部缓弧形凹陷。雄虫下生殖板后缘中部具缓弧形凹陷·澳洲大镰Periplanetaaustralasiae（Fabricius，1775）SN/T4280.3—2016
附录E
（资料性附录）
澳洲大成虫鉴别特征图
澳洲大成虫鉴别特征图见图E.1~图E.6。cm
图E.1澳洲大成虫背面观（）
图E.2澳洲大成虫腹面观（含）
图E.3肛上板腹面观示意图（含）图E.5左阳茎示意图（含）
SN/T4280.32016
图E.4下生殖板背面观示意图（含）图E.6右阳茎示意图（含）
SN/T4280.3-2016
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
国境口岸澳洲大形态及
DNA条形码鉴定方法
SN/T4280.32016
中国标准出版社出版
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）总编室：（010）68533533
网址spc.net.cn
中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本880×12301/16印张1字数20千字2018年1月第一版2018年1月第一次印刷印数1-500
书号：155066：2-32425
定价21.00
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