【SN商检标准】 伤残短体线虫检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4081—2014 伤残短体线虫检疫鉴定方法 Detection and identification of Pratylenchus vulnus Allen & Jesen 2014-11-19 发布 2015-05-01 实施 前言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国伊犁出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：龙海、李一农、王金成、李芳荣、顾建峰、乾义柯。 1 范围 本标准规定了进出境植物检疫中伤残短体线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物及植物产品、土壤等传带的伤残短体线虫的检疫鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T 2757 植物线虫检测规范 3 符号 下列符号适用于本文件： n — 测定的线虫样本数目； L — 虫体体长（μm或mm）； a — 体长/最大体宽； b — 体长/虫体前端至食道与肠连接处的距离； c — 体长/体前端至食道腺末端的距离； d — 体长/尾长； e — 尾长/肛门处体宽； gubernaculums — 引带长度； St — 口针长度（μm）； spicule — 交合刺长度； T — (虫体前端至阴门的距离 × 100) / 体长； V — (泄殖腔开口至精巢末端的距离 × 100) / 体长。 4 方法原理 中文名称：伤残短体线虫 学名：Pratylenchus vulnus Allen & Jesen, 1951 异名：Anguillula pratensis Thorne, 1934; Pratylenchus musicola Condit & Horne, 1938; Pratylenchus pratensis Allen, 1949, Serr & Day, 1949 英文名：Walnut meadow nematode; Walnut root-lesion nematode 分类地位：线虫门（Nematoda）、侧尾腺纲（Secernentea）、垫刃目（Tylenchida）、短体科（Pratylenchidae）、短体亚科（Pratylenchinae）、短体属（Pratylenchus）。 伤残短体线虫是内寄生性线虫，通常破坏寄主植物根系的外层组织。随着线虫的取食，根系细胞大量受损，从出现大面积病变的根系中可分离到线虫。受害植株须根减少，根系不发达，若有其他病原物将导致根系腐烂。伤残短体线虫危害80余种植物。根据寄主范围、传播途径、生物学和形态学特征进行该线虫的检疫鉴定。伤残短体线虫的寄主范围、地理分布和传播途径参见附录A。 5 仪器、用具和药品 5.1 仪器与用具 光学显微镜、体式显微镜、冰箱、加热板、打孔器、载玻片、盖玻片、标准套筛（60目、500目）、烧杯（500mL、1000mL）、漏斗、漏斗架、乳胶管、止水夹、凹玻片、剪刀、挑针、浅盘、玻璃纤维丝、酒精灯、培养皿、试管、纱布、干燥器、记号笔。 5.2 药品 指甲油、4%甲醛、乳酚油（苯酚20mL、乳酸20mL、甘油40mL和蒸馏水20mL混合而成）、石蜡、冰乙酸。 6 检疫与鉴定 6.1 现场检疫与取样 对植物及其产品的根、鳞茎、块茎、根状茎等地下部分进行检查，观察是否有根腐症状。收集上述可疑植物材料及所附带的土壤，送实验室检验。 6.2 实验室检验 对于抽取的样品，可用浅盘分离法或漏斗法分离线虫，具体操作过程见 SN/T 2757。对于少量的植物样品，直接在体视显微镜下用解剖针对样品进行解剖。将线虫分离液在体视显微镜下检查，挑取或吸取疑似线虫若干条，制成临时玻片在显微镜下镜检，观察线虫的形态。线虫临时玻片标本制作方法见 SN/T 2757。 7 伤残短体线虫的形态学鉴定特征 7.1 形态特征图 形态特征见附录B。 7.2 形态特征描述 雌虫：虫体细长，温热杀死后虫体直伸，头区光滑，唇区有3～4条环纹。口针发达，基部球圆形，有时前端呈杯状；中食道球椭圆形，较窄；排泄孔位于食道与肠交界处；食道腺从腹面以长叶状覆盖肠的前端。受精囊充满精子时呈长椭圆形，具长的和分化的后阴子宫囊，长度为阴门处体宽的2倍。侧区具4条侧线，外侧的侧线光滑或略呈锯齿状，中间2条侧线距离较近。尾圆锥形。