【行业标准】 国境口岸流感、副流感、呼吸道合胞病毒的酶联免疫吸附试验检测方法

中华人民社和国出人境检验检骏行业标准SN/T 2609...2010
国镜口岸流感、副流藏，呼吸道合胞病害的酶联免疫吸附试验检测方法
Hnzyme-linker imxuaoriemt sy feph leiectipk f intlnenza vrusparaimfluentn wirrn, rpoiratery syreyeisl viruns2010-05~27发布
国家成星服鲜松验检接总局
2010-12-01 实m
本称滩按服GB/T12C给[的竭
SA/T 2609—2010
本你滩中国家认证汉川整督管典委会执出并归本标起草单位，中闲检验检疾科学册究院、中华人民共科国江四出人境检验检疫局、中华人总具和压工游出人换检验检疫尚
本标润主爱起市人：孙尚红，十穿军、张、扬宇张点、账龙、刘风、黄品品、机孔新、下静。http://foodmate.netwn
1范園
国境口牌流感，制济球，呼吸道合泡病幕的酶联免吸附试验检训方法
SA/ 2609--2010
本称准规完用婉高半流病，潮流减尚与、呼吸证会随病量抗体（g/M）的检测对像校方法
本标准证出子菌境口人市培人员百就落感疯喜或河吸道台病感染尚等人群的流感病惠流感光学呼服通合服病英范热（/习）给测的源联免吸附试验：其他人群的镜体检汉也可参降。2规范性用支件
下列文件对了本文件应用必不可步的，妇汁期的用文件仪注期的版本遗于本文件，凡千注！期的引所交件共段新假多（精有的修教单）证了机文件，（1319489实验室年物发伞前！要3术和定克
下列术讨和别义适用下本文准。3.1
印塑流感病毒infnluenga yirusA甲塑流感病英是八节RNA家背，正剂然和感染人可以起流感3.2
型流瘦病毒eas
亚流感病毒龙八比题INA病母高止站病幸科感柴人可可总流感3. 3
副流感病等garnunzairs
耐流感病属削粘病志科激国组美吸负链人，感滤人可题普通感、气管炎市炎，34
rospeealury resytia,wihs,y
呼吸道合跑病毒
呼吸道企胞病索属刷粘离科因4为产股负樂RNA，是比异范内婴纳儿病改性下呼服道感染最置要降病毒病源。
酶联免疫服附试验cdiraoyEA
标准采而问接然，点原年产在面包敏家【色被护填，月特弃性忧人g/M的酶标航检测结个到包的样品的性M筑体，底物反品，所品小的颜照度与样品中M悠合放成正比，M的含书以标准出然获撑。htt
SN/H2609--201C
4试验材料
4.1试剂
4.1.1包被板：分包被有片型流感送：型流病素、副流感病辜呼吸道合胸病啥抗原的96乳板，可诉。
博标抗人JgC/gM抗降。
4.1.3MB派坊液
4.1.4终止液101/LH:$0）
4.1.5洗涤液:PBST缓冲液
4.1.6磷群液：PS缓产液。
4.2检验对象
在国际漩行卫生保經中心体险人出兴人员，阔境口岸可班流感病副流璐痛幸、呼吸台脏病薄感禁者，或户请检验的人员，4.3待检血清
无菌采集检验对象脉血ml.~3ml，自然凝m1h~2h150cg~2000g肉心5min，收集滑2ml.北菊螺：熟料管中。
5设备
酶联检测仪（能行45gnin处读数）：5.1
普通冰箱（1℃和-20（）
普通台式肉心机。
微量叫调液器配套吸头o
n无菌螺口塑料
涡旋器。
儿级牛物安全机，
恒湿培养箱
实验室检测
6.1方法提要
6. 1. 1 操作过程
在包被有抗原的固相包被板上，上等导生流人&M的嗨标二抗检测结合到包被板上的样品中的特异性Ia/gM抗位。底物反应.典小的颜变与群品中G/IgM的含量成正比，Ig/gM的含品可以通过标准山线获。
6.1.2待检血清的稀释和处理
根据所用试剂盒的费求，将血清标不门稀释缓冲滚举降成不同波度：加人不回比例的类风湿因了http
（R吸附剂，在涡分混合存mim备用6，2找求要球
SN/T 2609--2010
中型流感病再、Z型流感病是、刷流激病变吸造合股精毒抗体（I&/IM）的LISA检测方汰分别懿见附录A、随录B、弱录［、附录.附熟7质媲
根保所用试剂盒的影求，设牢期对思孔、的性刘照孔阳性效照、标推战孔8给累报告
B.1绘制标准曲线
以标准的（)值丫销标准品的浓覆为入轴，在半对数坐标纸上绘制标准曲线。每饮试验均应重新绘制标准曲线
孔结果计算
样品的浓度可以直接从称标推卵线上裴得，如哭择品稀释了，应乘以翻释倍数。8.结果判定及振告
接说明书的想定进行读数利结采灯断，5随止污染的猎施
检测应程中防止变义污染骼精叫器见附款A。生物安全措施
山生物安全操作培训合格人品检测门M时成小心处置，处理待检清时应在级生物安全相内进行。按照GB10489的有美规冠执行http
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A.1试剂的准备
资料性
LL点A检测过程中术要求
A，1.1放冰箱内保存的试剂在良币前片泌家测温，一激在室湿平衡30 minA，1.2行剂检声试剂组分定否变照。1.3浓缩的洗祭波带用新鲜的蒸馏求受人岛了水楼然泽释，用不合格闷蒸留水可能空门俏增高。
，14保存式剂的泌销应完期检李H缩存温度中常为），产尽品免冰错频繁开×A2标本的采取与保存
AF尽虞降免济面。
A.2.2而清标本的制名，非抗凝然激过：…5h00&离心，mA.2.3标本它在新鲜检刻。若（为检划.可集用冰崧2C8Y保看，超过！别时间测定，应十-29 滴潍存
A.3加样
A.3、1严格按照说肌书求接期烂的三街没进行A，3.2使用的微量样器成注意保产并定其轻正良3.3加详前意视溶充分深到，并凌术汇车引派：避免训在反应升显上部，注意不可出现气泡A，34加样时键免样本泄出，效有样本测发应礼外司，成用吸水纸轻轻技下并消导处理，间时做相度记录。
，3.5样后微孔板应效时湿育。尽品维氛机详片温育前的等待时间。A4温育
。4。1严格按照说呼·要求，按规完的温惠不器空闻送行，并保证设定的温度达到要求以及是够的反度时间：
A4.2保温容器最好是恒温培将粹：川度丧法平德屋，4.3微代极个可常叠放胃，以免传热不送4.4为避免孔内液体蒸发，可用扩版校将E！点情配座时屏许行提行。温宵尽量少开启省门以识待稻内漏宽稳示A.4.5
A.5滤板
A5.1微独极每通消板次数股为3次，次证！影范时间懿为5~609.5.2洗板时需保证微孔极平放将消涤微注新件皮应孔，尽震避免潮液溢液现象。4
httn
每次洗极的液体战留就不这多济成将微高板在吸水纸轻轻们干A.5.3
线、5. 4
配置选涤液需婴新鲜污果的蒸深水大离了求说配现所密放洗涤液的卒器底宠期使用清活剂消究：避究长制或其他污染。显色
大使用过谢显亿，为限日克裁路他下M范的剂不能估用，最色剂遵统接金质器械，避免注空气宁燃露尚闻应太，显免刻尽量避见驱培用外。
最府避光
色完节成没终止加终液时避负出斯：.8结巢判断
A.B、1安说所的期定选行读数新结果别A8.2服标仪读数时成保评微孔板底留行洁效即清带感标仪滤临片.//wwwfoodmate.net
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5N/2609--2010
S/ 2609--2010
（料阿
配途测甲型流感端毒抗（M）
！在何被有同澳流感病品抗的反成心中而人1心标滩品和口经确整并处理的待检而清样品。尚时加人阴性对照阳件对，时概滑：（额信mn照2弃太反应代中的液体，用300L洗涤波等效欲，在吸水织上拍B3在成礼中加人100能你抗人1gGgM体，板店孵自300n联4弃太反应孔中的液体，用3031洗资浓洗板款，在吸水纸消干量.5向年孔中加人1c0ul.底物液，37℃下避光孵存20min6向样反应孔中加人10.终比液：液体颜急出蓝色变为责包：B.7加终止液片60min内在4!)m处测定（)侦：http:

(凝料慢附鼎)
A测型流糖病清新体（/M
SN/T 2609-- -2010
，1孕包被有型流感病毒折原的发成科中求人10标准品和世经希释并处理能待检血清样品。同时加人限件对照、阳性对照，时板37孵警的mn。亲共反应孔的滋体用洗涤液洗极3次在吸水纸上干3在度质中灿人1嗨称人/gM折体极片3孵育m。4弃志反应中的波体月30济涤波淡极3次，在吸水上拍干5向每反应礼中加人130底物液.37（下避光孵疗20mm6舞反成乐中加人1终正液液体颜的围监色变为黄色。7新终正液店6Gm内征150n处测案害.//uwwfoodmate.net
http:
$/2609--2010
(资附录：
FE.SA检测制流感病害抗体（Ig/IgW)！，1在位被有引流感病欢原的友托小人标准品和己经销释并处理的待检和消样品，而用加人阴性对照、阳性对照：期瞬学我m2弃大反成孔户的液你，用洗涤液洗版次，股水纸。在反应孔中加人00！.确东说人1风M优体，期板活37C33min1h.3
D4弃去反应行中的波体，用300点1洗涤滚完报3试，准吸太知！拍下，5间实反应孔中加人00m！.衣物液.3：气下光能宵20imD6同每反应乳中加人10终止液，液体款包山变为黄色7终止额厅acmin内在1rm处定（盾，foodmate.net
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L人检测呼吸谢含胞病密抗体（/箱）SN/T 2609—2010
正1正包点有正收道全起炫持原能原感单中的人，工标雅品新己给稀群关处理的待捡血滑样品，时证人阴性对照、书对照好板店解高n，2奔去反应礼中的浚休，用3，法淡激淡板，个吸水纸拍下E.3在反成A中加人10醇抗人JgGigM计体，学板片37孵食30min4奔去反应孔中的依，30洗涤燃游被3次在吸水纸拍十5向得反应孔中加人1001.底动液3光解宵20min版网得反应子中知人，终山滴液体颜蓝色变为出鱼加终正液后m内在测（值
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中华人民共和国出人湾检验检疫行业标滩
境口岸流城、副流感、呼吸逍合胞病的酶联免婉吸附试验检测方法免费标准bzxz.net
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中国标举品版礼出版
北京京兴门外州北街号
邮政编：100043
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电话：5352891665517348
户标泽出版社恭阜岛印刷」印制并#8801231/16即顺1字数11手#
210年3！篇版201华10片第次部刷印数：
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