【行业标准】 棉花中转基因成分定性PCR检验方法

中华人民共利国出人境检验检疫行业标准SN/H 1103- -2010
代桥SN/T1992903
棉花叶转基医成分鹿性检验方法ieneal f te veresi: n ssm:tin f eleng wenatiaceilymah raa x r
2527 发在
家最格微际
数码防
含品伙伴网ht
2010-12-01
A标准按照单[能鼠理
宏标准代警SN/119320源程市中转系减分宝之R检测方法》 /19H：
规范广专用语和装法齐民：
SN/F +T39--2015
求增证较基因常茶品系，14和M98实时卉P的品定
未和新略语参照10，点产品检测实验究技术典求中的额棉A商热都希版的利版以
H3期密临#：2用21方法的样品按送/7194953中烘点应的方
对价品中咳没的录（003服6八房的9.2）采用3/94供.3小期安的方法：净加：实比费汽R法并在请热断片照中03年版的第？产：本版的952应地「实州光成浪将测穿深原法
对常规PR机当成术率度减站:1费路具果断（2303年版尚6，6.1.6.6.2、.3.3.表2租表版的线海车支八德选方式业新综非修广的训实强方法
本标准山家认证认可盗督带洲是并则本标雅利营单位：中华人网和厂人净人资些激局中华人民专和国正海山人检险检校局，本标准主要起草人：刘效刘汁款通降就卫生郑义烈文庭不价于2003车首次发布式0年第兴餐1httn
棉花科械国分阳性维服检骏有法年源泽潮是了褐将中转菜皮分氧件！强洲法/811992010
本际胜猫门F格轻及祖1品中订铸：！中销花K3联K9708GK1长2、GK3GK(K.GK13GK22GKS51德分普正用端造格测和转基棉花品MON1、MO:445MO1S085实时费光卫的品系鉴灯
规范性引周这伴
下刻文件对下本文件前后川最节少的，用法期的文仅注期的服造用小本实件，是不注口期的引川件，其始新版不值技原有的修改单适问于本文件激报食渐料路叶接等津法
G3/168%分折实验空用小提降实赢A法CRT1油料讲料楼
G1/119495.1转H医产品检润雅，爱求和义GB/T19195.2转区产品检源实验家多不翼3349，32304输感及产战模息1隆像瓷收纯化力3不降和缩语
319483.：州准的术语利缩喀诺量用十支作八晾理！
群经过标收D人后，针对转步迈内外湖密9质设计的引物和茶针序，通过普调PR，物开物增内外H民的A片段：产限地核洋品中息本在转第图成分，需进行品系定购过突时蒙光限设术-却断接晶中者审有品系5收器用息
5就护弹仪中深仪、可源格潮校务所谢游统紫外可分光光康计天中（感里：和0！）、高灭当锅都低湿冰着陈肉，本舒锅微波炉，实时效光完品位超净1格件凝纯水器茶满振滋器
5.2微系加样（2.5u32l1000）3反管（200500u）Faoendor离心誉,初2.n:
行试剂
除易有现笑外，其他点剂为尔新种京生化心消，水为安照/T6观定的级水1
httrwww.bzxz.net
SN/1199--2010
1三然统
6导浓醇
5.4氯化铸。
aasAm:/i
NTPdATPdPdPdamiauo?mnu/
TA聚合
场肾源。用六TAE港液，电！惠z价0.m的2乐琼脂糖激胶。10
浪化之绽og/：浓
A,分 标讯 o0 br 3 y
6。12
63TAB规解液3%TAB：D常分！101就焦钢62法（积分数）确基野，20 mre0/1. FDrA..0 mmt I- 1 1.pFt14α滋(:f1 2.0 /FA(0)
容管10ml.办装高次肉新
01sR级冲液：me1.理mpl/路炫.20mmol/.疏骏2mnol/1Jns-Jhtlpl.), 4. :om x-en Ipe. m:.s.616XTA线冲液取第ml冰能.20m（.3mol/LTA80率下蒸馆尔单容至？，分法！尊务，6.10×上锋綫冲教：含0.然海密流只可3：汽止沪水溶漫G物符附A·，：的合物探超纯水配创m/储行，用了测点的保针度
污新播施
检测过释：资止交义河染满快品行”！：中物规分8拖样出钢帮
3、1散装棉籽、棉籽貂的样
报样位置确定按照B0：热行出1数公管计略或前样产械洋，断货物小于或上50kg时，抛点数不少东，尚物台！：热出数尔少下点：当货物在000kg用拍格点数为5点11点：创3930k时，袖样点数为10点~20点：当货物作出尚：择数点点发双套管灿样器成样铲猫样？供激棉新、棉籽接的独
使用单管拍洋成出祥萨拍样：出让货物单业效在袋以下时，速餐证样：普送包数在0袋总时随部批教装：当总包数表“中客息城效的中方州收（联整数，小数部分同修约）
8.35样方流
均灿以的情籽的新资样品宝温合配：车照降！中邮分法侧备放送格样品：插吸的棉htt
SN/H7133 - 20 11
将柏送格祥品的鼠格成符售下能，度分限单太平为「送检样品的最小部博在以二：转年压就分限水中指群品内成小建成准10以滴分所得的常将择率洋品将产科教详成粉南。蕊测溢
基组提
9. 1 1 2A眠然
御以：歡率后的群品电心年中人：，”锻解被，，水落得泽，不振裁密离液加大等体的伴既/茂体积分数争m之清本积
数祝匀降止5机12（9离心，离谨股加0.53信体积的单商，.12200g（离心弃發加，得流降，离心m潮将部源十T诺课用个验择淘
周个测感伴带和职最心刘照尚同游度房，期康点对服不加格品供仙操作是河5.1.2低他方法
小用下「方然的样品按黏和度的为法执行A的
A的节方法席的规是
提度维花的落降需心低于
0.3照控设置
险测程中市黑核股H脂、试剂Hx照们阳性白标A对购VAR我2件标N 时陷族照RT 194022004 中4 的期4酒输测
91这成体率和反成
南体系临表仙：体密中各剂的而振地其体肾况成不司前授应总体积道行活的阅学。年个原高体案成设留调个范行成成，限民产懒用廉唱新读腰泳愉测
9黏樂
9.4.2.1料器捷取游香造信单信卵圈前潮花内源：因物件没行阴性对照，剧性割试样品帮度该被打产物：扩增测说明准乐A提收释中未都科划谢行测减的A政N原该没中在迎制报技减的物预存在成量新提收A，到扩增黑该用R产物，
雪品伙伴欧ht
33/T 1195--2010
9.0.2.2样品中转基圈成分检测
对准品A标费进行外源内的盗，新牛生点照利空自对照来出现扩增条市，阳所和测试品巧出现预期人小的增市不：：六中太人、1）：刚可初步判可装的该外源运法，应让影微实同然光R舒询正宝带流准备据通训实流缩民最整报告。好保测战样品中长阳现技普产物测工判定测微电术诚外a.4.3证实骑
培究性护游产物纤微骏围添检视闻产的思证带下例的方法之·违确证实时荧光R验测
其他验证片法、
9.4.4检测低限
本力积本确究能对检测低根·值本生能整测到0.1许质些分数)转基闪帮籽3.5实时装光品系鉴定
5、1实时荧光引物应求系及发应参数实时光R路设应你紧和参数光医录A中装A2箱表A，S，成休系中各试剂的正所根据具体消说或利其的友应总休积进行活当的游整。辞个发应体系成没盈队个中行反成。9.5.2实时英光结果判定
9.52、！双时费光服质控标
空回对照：无灸光洋临现象
阴对照：外测其闽光凝亲增幅现象平对照：外源基检恺小于改湖
下述指标有，项不微念，应新作法用资光代部9,5, 2. 2实时范光 PC结果判定浏试详品内源齿给测行小于或等于6外源因金测值大于或等0判断孩样品不合所检的外源基围。
测试样品内源其国检测宜小于成等下系，产源站因检测俏小于政等下36，划断该详品今行典检的外源基因。
测试样品外源其因检测有在：！表格双设浓·做实用费光R：次扩增店的外源第因值勿小于工韧性，生限礼出维果证常则判定为该样品检出文义基岗有次扩第原的分源基商值人点手国山谢件照密准对照和空自照结果正常则可判为该群晶术检山×：×基图
9.5.3检测低限
本方法术南定绝处检测低限分）法学作金测全01（质岸分数）转基内筛称。9.6结架表述
该样品兴检出、及，
该样品检出x，鼎国：
雪品伙伴欧ht
13: rNA
tr ito
Gry jA:r)
设换测
Mrwaat
virn:2:
品系特市外识
9/19--200
棉范及其制品内外鼎想肾儿物资纤率例和检测的度应体察A
卢为来激
慢检测格欲围外源康国所需的引物序到上增片段长质/bp
TUTAITGAT GT A H
S AA P TIGG:-LCL IGC-[GCCTTXP-T-S GGT CCT AGA AAT-GT-ATG-A-d
GA: AOTC ATTIG CT GA 3.
SGAA IG 3
G-TI A-TEX:AG :T CG ACC TA 3:: B TAUGC:A-AGT-T-TAT-ACS
T TC A-T IRG HR--T-G-ALA-CA-3+AT. I+X GN: HTGA-ATG-AA-TG-S?ECGPATG-ATG GAT ACT TTC TCG GCA GGA GC 3EIPX:A :ACA G ACC-ECO3
3 GATTA AA. HP GPA AGACCC AG 3TIKT P ACT AGT TG 3
-GUA-GG-TG GTAG-TAG-GA3'
: GrATG A AT PCIG-AGT-T-3?
T TCA EG TT rCA TEC CT??
实谢装光定性1稳测帮花闪外源基因的引颜和探序列换计学列”
STX GA! TG PR:TAGT-G.
GTTGAAGAG TIG T T TG AITGG R T C Ao T re r s
GAAG TAA TG TA T,AG GA 3'
T-GTI-AT-A-T GRC ATA ICG 3
F AAG TTTT AAA T: AGGA-3?
G-CG A-GTAAGA GTAT IT : A AAG AL RSATT-UALTTAG T: AAG CR3
5\ ATT GTC GTT
I-A-W-
GAT TC GAA 3'
Tr: Itc
GT CAC TIC
re To 3*
5' GCG CTC TAG
AAC-TAG-TGG-ATC-
TYH: ALGAAR?
ATC AGA TT:
TCG TTT CC GCE
TEC-AGT-TT-3
深所端际FAM非引然AA的路流炎基司http:
tnnrmnte
广增长战
32/F 1139-2010
cvp含:r
的总化镁
正向4 4
以间 /4
A稳：
双点水
倍带南源您性格测的体系
成体品
主，感成紫各减制的间表心国润源的外源最国宝海谢的愿应秘数我
黑密外源
aMwts.No,gin.t.tyA
CryIAnS iN +DNA
Crylate)
:1 . -80
控，谐环激可根国开信
循环队数
府代系
加祥积
最终然仲
22 t. 0 iuin
麦美，5时责光2成性格理款#国外款热风的发应你系和反度教数黑剂名阶
，PR冲
我化汉MC！
dNTp: J. TP2. s me.
厦京准系
++++3 1:.+?
A损流
htt
I. iol/t.
补是至5 m
期人保积
茂城警放
5N/T: 1199--2010
实时案光网家酬做测璃带内分源基菌的反应体系和应应参数《续）法剂多称
会A俊）
三原然
只进合：hryrh，没器）
深浓换
8 s /8
加人体然
个品环4/640个据坏
A宿环553350C0
注1实装R及用方MxMM2专i试剂度度体系成象敏可直接移势剂除说队书。
让2：十同型！器的月可克滋意专之学设说明过3，当外源案因和内源录下标的素升结小，高有不国及能件中分用加人外源基因到内源基因的列韵，教件分别证行拾测
注4：1内A横版的人可造业调1，台的01微量商为：内源基因投烫的（值在1536之间外源基然检测的值3，则成活减少纯化
获5：骏中经作R原康系和度家数品限证路求的术器而调整A
美意团你八的护源基菌的有美情息法医构4
品·系名称
Bolare:
SCk321
SGKa7OS
GKI.GK?.GK3、
GKGKI2
学蜜多称
中南科院
改路评表
其有团微数
晟总技性
只解划
htti
结阁肉
Gryta(e)
CryiA(h) CayA(D)
旁动子
CaMV35
SA/T1199-2010
httn：
中督人为共利国人所监验询究
行业标雅
棉依中转基因成分定性C检验方法y,l by 2cic
中国标社出版社山版
点兴门乡土河北奇号
邮改编码：130343
网证 ww. spe. net. en
电话：681235466857548
中国标准山服社奈气只印制！印测开个S0×12301/1印张6.手数16年220#1月第版010年1月第次邱别
激 60
：15506·221138定价16.0021

CLO7--8811
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。