【农业行业标准(NY)】 牛冷冻精液生产技术规程

ICS65.020.30
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1234--2006
牛冷冻精液生产技术规程
Technical Specification for Bovine Frozen Semen Producing2006-12-06 发布
2007-02-01实施
中华人民共和国农业部
本标准的附录A利附录B为规范性附录，附录为资料性附录，本称推出中华人民洪和国农业部畜牧兽局提出。NY/T1234—2006
本标准起草单位：农业部牛冷冻精液质量监督检验测试中心（南京）、全国畜牧兽医总站，木标准主要起草人：陆汉希、徐桂芳金穗华。华范围
牛冷冻精液生产技术规程
NY/T 1234—2006
齐标准规定了牛冷冻精液牛产的器械清洗和消毒、稀释液配制、深精、精液处理、精液冷冻、冻精解冻、冻精镜检和检验规则、冻精包装、冻精广存及冻精运输。本标准用于牛冷冻精液生产。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引而成为小标准的条款。凡足注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版不。凡是不汁日期的引用文件，其最新版本适用丁本标痛。GB/T4143牛冷冻精液
GB/T5458液氮牛物容器
3术语和定义
列术语利和定义适用于本标准。3.1
种公牛 Bull kepit For covering符合本品种神标准·级以上的公牛。3.2
假阴道Artificialvagina
模拟母牛阴道坏境条件的采精工具，自外充、内胎、漏斗、集精管等组成。3.3
采精 Semen colcction
用人工模拟且有白然交配感的工具，以获得公牛精液的方法。3.4
射精Ejaculation
公牛经性反射最终从阴射出混介液的过程，3.5
射精量Yolumeperejaculate
公牛·次采精时排出的精液量
精液Senen
由精子剂精清两部分组成的雄性牛殖器外分泌物。精广总浮在液状的精清中。3.7
精液检查Senrenexaminatiem
鉴别精液质量的主要手段，
精液稀释液Scmen dilutor
NY/T 1234—2006
保护精了延长其存活时间及增加精液容量的液体，3.9
细管精液Siraw semen
猜液冷冻类型之一，将精液用稀释液等温稀释、平衡后，分装人细管并封口，然后在液氮中快速冷冻。
精液贮存 Semen storage
精液处理后至用于配种前需要保存的方法。3. t1
精液解冻 Thawingfrozen scmen冷冻精液使用(输猜)前的处理方法3.12
检验Inspection
对产品或服务的一种或密种特性进行测量、检查、试验、度量，并将这些特证与规定的要求进行比较,以确定其符合性的活动。
4器械清洗和消毒
4.1璃器血使用后（或新购置的）,用白来水浸范泡。洗涤时，先在加有洗涤剂的温热溶液中逊行刷拭（遐有污物或油垢不易清洗的,放人画铬酸钾洗液中浸泡数小时）然后用水冲洗十净，最后用蒸罐水冲洗，直至器血光亮、无水滴附差为止，将洗净的玻璃器川送入宽热干燥箱，加热至160℃所再恒温60min，白然冷却后待用，bZxz.net
4.2假阴道使用唇.用水冲去表面污物，然后在肌有洗涤剂的温熟溶液中用长毛削刷洗，并用水冲洗十净.再用蒸馏水逐个冲洗。将洗净的假阴道放在架了土，其上覆益两层清洁纱布，晾干备用。如发现内骼漏气，攝水战皱折，应及时更换理，4.3器碱应进行消毒。竹夹，瓷漏斗，金肩镊子、止血钳，药匙、胶笨和吸管滴头等75弱酒稍球擦拭消毒，待渊稍挥发尽后方能使用，细管用冷冻架使用前用紫外线消30min。4,4载玻片和盖骏片,用后即浸渺于水中,洗净后用柔软的布擦拭十净备用。4.5纱布成定期清洗、消毒。包装用的塑料细管、塑料管及纱布袋用紫外线消毒30mm后片可使用5稀释液配制
5.1稀释液配方参照附录（
5.2稀释液配制方法
5.2.1蒸馏水的制备
单蒸馏水可采购或用蒸馏器烧制，双蒸馏水用玻璃蒸馏器烧制，严格按照仪器的说明书逃行操作。5.2.2天平的使用
天平放置在稳的工作台上，保清洁干燥，不使而时刃川施处于载状态。称瑕品时，盘内势以称量纸，校零后方可称重。汰码应保持清洁、下燥。5.2.3药品的取用及保存
化学药品取用后,成立即将瓶口盖严,并要善保存。5.2.4卵黄的取用
鸡蛋应来源于儿疫病的鸡场，H新鲜完整于柠，用75%酒精棉球刘蛋光表而进行消毒，待酒精择发2
NY/T 1234--2006
尽后用蛋清分离器取出光整的卵黄（也可在鸡蛋腰正中绒处敲开一裂，将鸡蛋一分网半，利用两个蛋完交菩倾倒，除么蛋清，留下卵黄)然后用灭菌的注射器穿过卵黄膜拙取卵黄：5.2.5稀释液配制程序
配制12%燕糖溶液100mL：先准确称取底糖（分析纯)12g，放人容量为100ml的量筒内，加入蒸留水50m左右，用消毒过的玻棒搅拌，符蔗糖溶解后再加蒸溜水至100mL，混匀后用滤纸过滤于角烧瓶或盐水瓶中，扎好（塞紧）瓶口，置75℃水浴锅中消毒30min。取冷却后的照糖溶液75ml、甘汕5mL、卵黄20mL和青霉素、链需索各5万IU10万IU单位加入三角烧瓶中，用磁力搅拌幕充分搅拌均匀后放人3℃～5℃的冰箱内待用，但放置时间不得超过24he6采精
6.1准备
6.1.1采精场所应保持安静，地面保持清洁卫牛并铺垫防滑设施，6.1.2选择健壮、性情温顺、疫病的母牛或公牛作台牛，并保定于采精架内，台牛的外阴、臀部和公牛体囊及包皮内腔采精前应冲洗干净。6.1.3预先使恒温箱和水浴锅处于工作态，将采精用具有规则地摆放在操作分上，假阴道润滑剂（凡-「林与液休石蜡洒按1:1的比例调制)用水浴煮沸消毒。6.1.4安装假阴道前应洗净双手，用75%的酒精棉球消声假阴道内胎及三角漏斗.将三角漏斗-安装于假阴道上，接上集精管，套上保护瓷，假阴道内可提前注入38℃左右温水，并用消毒纱布将假阴道11包衰好，放置于预先调整好温度44℃46℃的恒温箱内待用。青年牛用光面内胎的阴道，成年牛可用纹状面内胎的假阴道。采精前在假阴道内胎的前23处用添抹棒均句涂擦适量消毒过的润滑剂，并从活额孔打气，使假阴道有适度（假阴道空三角形状为宜）的压力。采精时温度控制在38℃一40%之问，根据不同的牛，温度可做适当调整，最离不得超过436.2采精方法
采精时饲养员与采精员要积极配介。采精员的动作要还速而正确，胆人心细，江意人、畜安全。采精前先让公牛进行数次空爬使之有充分的性准备，待公牛性欲旺盛时采精。为提尚公牛的性欲，可采取空、抑制爬跨、更换台牛、更换地点、观摩、引诱、被爬跨、按摩等措施。采精员右手持假阴道，站在公牛右后方，当公牛起跳，前肢爬上台牛时，速问前用左于托着公牛包皮.右手持假阴道与台十成40°角，假阴道口斜向下方，左右于配合将公牛阴鉴白然地引人假阴道口内（不得用于捉拿阴茎、假附道去套阴莘），公牛往前·冲即完成射精动作，公牛随即而下，采精员右手紧握假阴道，随公牛阴茎而下，待公牛前胶游地时，缓慢地把假阴道脱出，立即将假防道口斜向上方，打开活寒放气，使精液尽快地流人策精管内，然后小心地敢下集精管，迅速送至精液处理案，安装好的假阴道只能使用一次，不得重复使用。成年公牛每周采精两次，每次可连续采精需回（问隔30rin左右）。6.3后处理
采精后应及时清扫场地并用水冲洗下净：假闭道等来精器械消洗下疗后成尽快消毒。7精浚处理
7.1准备
凡是接触精液的器血均应放在30%，～35℃恒温箱中，稀释液放在34℃恒温水浴箱中备用。盛装瘤释精液的稀释管，应做明显标记。7.2密度测定
采集的精液递过专用窗口传递人精液处理室后，按精液缔度测定仪的榮作规程准确进行精液的密度测定。
NY/T1234—2006
测出密度后通过计算或精液密度测定仪的相关程序获得应加稀释液量、可制作细管数等信息。及时记录牛号、采精量、密度、所加稀释液量、制作细管数等有关数据。7.3镜检
敢精液或稀释精液一小滴于载玻片上，加盖蓝玻片后在38亡恒温装宵的相差显微镜上评定活力活力用百分率表示，例如%或0.8。活力是判断精液质量的一个重要指标，镜检活力合恪者进行稀释。
7.4稀释、封装，平衡和标志
7.4.1使用一种稀释液
取支已盛有mL稀释液经34℃水浴预先期温的试管，对精液进行稀释，在34℃水浴中暂存10mi 后加稀释液到最终稀释量。
a）方法一
再过10Inin后即可在20以下常温实验宰操作自上进行精被的分装，分装后的细管精额放人不透明的塑料盒内，每盒以盛放300支为立（遇头牛的细管数量较大，成分放在两个塑料盒中），把塑料盒人4冷藏柜叶平衡3h~4hr
b送一
加完烯释液后，用水怀盛适量的34℃水，把帮释管放人后送4℃低温柜内降温平衡，2h水杯中加冰快促使其快速降温至4T（空细管亦应降至4亡），再在低温礼中进行细管分装。分装后的细管即可逃行冷冻：
7.4.2使用两种稀释液
用34℃的第一液缓慢地加人精羧巾,摇勾,所加第一液的量[(所加释薇总量+精液量)/2]一精液量，用烧杯盛适量的34水，把释管放入后送4℃低温内降温，与此同时把第“液也放入。平衡21后水杯中加冰块促使其快速降温。当降温至10℃时加人第二液，所第二液的量=（所加稀释液总量一所加第一液的量）。加人第二液后再平衡半小时以上小能在低温柜中进行细管分装，分装后的细管即可进行冷冻。
有条件的单位可侦用细管分装一依机进行细管分装操作。纫管上所印了迹应清晰易认,猎息(现附录A)齐全。8精液冷冻
8.1上架
平衡，封装后的细管精被上架码放时成注意细管摆放的方间，把棉塞均口端靠近操作者，超市波封口端远离操作者，人冷冻仪时亦应如此放置，每架上放一秘类似于细管的标记物，一头牛用同一颜色的标记物，使于认别。如间一架上有不同牛的细管精液，要分开码放，两头牛之间要隔开一些距离，以免混淆。
8.2冷冻
8.2.1全自动冷冻仪
冷冻仪是出电子计算机控制的全白动冷冻容器，叫根据使用者的需要获取多条冷冻曲线，使用时首先在电脑中设置好冷弥的最佳温度曲线，冷冻仪与低温应尽量靠近，开启液氮碰阀门把冷冻仪降温至4，关闭风扇电源，待风扇完全停山后把已排满待冻细管的架子迅速放人冷冻仪，盖严盖，按预先设定好的程序自动完成冷炼过程。8.2.2大口径液氮罐
a）液氮生物容器（液氮)成符合（B/T5458的规定，h）液氮罐温度调控主要取决丁冷冻架离液氨面的距离和一次冷冻的细管数（即冷冻架的多少），4
NY/T 1234—2006
冷冻的温度·般控制在-140左右，初冻温度调节至－120℃左右，冷冻时温度问刀的最高值不得高于·90℃，整个冷冻过程控制在8min之内，此间所指的冷冻温度足细管冷冻面的温度而非细管内的温度。
8.2.3自制的冷冻箱
用自制的冷冻箱冷冻细管时，冷冻箱的深度应在50cm以上，所调控的温度值同8.2.2。8.3收集
冷冻完成后，打开冷冻容器盖子，冻精按牛号毅入盛满液氮的不提简中，细管的超声波封口端在工，棉寒封口端在下，不得倒宵（以避免细管棉塞端的爆脱），并迅速没泡在液氮中。9冻精解冻
预先把水浴箱水温加热至38%～4n℃，假子取·支冷冻后的细營精液透速接泡人38℃～40℃水中并晃动，待溶解后立即取出，用吸水纸或纱布擦下水殊，再用细管剪前去超声波封端，滴-小滴精液载皱片上即可进行镜检。
10冻精镜检和检验规则
10.1镜检
镜检见7.3、镜检合格者方可进行包装。10.2检验规则
冻精产品的质量应由析对独立的技求人员负贡检测与监督，每季度每头公牛的冻精产品型式检验不少于一欲，当生产精的重要原材料、器件等有重人改变影响到产品质量时必须做型式检验。出站检验合格，才可作为合格品交付。11冻猜包装
用细管计数分装机进行包装，包装应在-140以下的坏境中行，包装后的细管其棉塞端在塑料管的底部，不得倒宵。翘料包装管的内轻应均匀一致，不得用大，底部小的塑料管。包装好的细管精液人购存库。
12冻精贮存
冻猜成忙存于液氮罐的液氮牛，设专人保管，每周定时一次液氮，应经带检查氮罐的状况，如发现液氮罐外壳结白霜，立即将精液转移人其他液氮链内保存。包装好的冻精巾一个液氮罐转换到另液氮罐时，在液氮罐外停留时间不得超过3。敢存冻精后要盖好液氮髓寒，在取放盖塞时，要垂直轻拿轻放，不得用力过猛，防止液氮罐塞折断或损坏、移动液氮时，不得在地上拖行，应提握液氮罐于柄抬起体斥再移动。
13冻精运输
冻精运输过程小要有专人负责，存容器不得横倒及碰摘和强烈振动，保证冻精始终漫在液氧吗，NY/T 1234—2006
附录A
（规范性附录）
细管冷冻精液标记方法
细管冷济精液标记由十六位数四部分组成，排列顺序如下：第一部分
「第二部分
公牛站代号兰位数品种代号二位数■第三部分
该精生产H期六位数
第四部分
公牛号五位数
第-部分公牛站代号以全国畜牧曾医总站公布的公牛站代号为准（见附录B）：第二部分品种代号以GB/T4143为依据；第三部分冻精生日期六位数按年月R次序排列，年月日各占二位数字，年度的后两位数组成年的二位数，月、不够二位的，月、R前分别加“0\补充为一位数。第四部分公牛号取该牛身份证号码的后五位数。部分与部分之间空个汉字（一个字节），第一、第二部分用汉语拼音大写字母表示。标记的字迹必须清晰易认。标记示例：
棉寒封口竭
010325
超声波封口端
SITI为上海金辉家畜遗传开发有限公司代号，ND为南德文公牛的品种代号，010325为2001年3月25日的生产日期代号，98002为该公牛身份证号码NDSI耳98002的后五位数。6
全国种公牛站统一缩码见表B.1。附录B
(规范性附录)
全国种公牛站统一编码
、门治区
北京市
天津市
河北省
山西省
内蒙古自滑区
辽宁省
古济省
熙龙江省
山海市
安徽岩
安徽省
山东省
河度省
湖北省
广西壮族宁裕区
四川省
云南省
西城自治区
重庆市
全国种公牛站统一编码表
种公牛站金称
北点市奶牛萨究所种公牛站
天津市奶牛育种靖
河北省畜牧良种股务中心
山西省家畜冷冻精液中心
内豪市治区家备改良工作站
通辽家畜繁育治导站
海位尔农牧场管理局家畜繁会指导站辽宁省肉牛繁育中心
吉林省长春肉种十繁育中心
白城市家羞冷冻精液站
NY/T 1234—2006
延边胡鲜颜白治州家畜繁育改良工作总站黑龙江省家畜繁育指导站
上海奶牛育种中心
上海金晖家畜遮传开发有限公可徐州市家畜良种站
安徽省畜食品种改良站
亨阳市改中心
江西省种公牛站
自东省畜禽良神推广中心
河南省纯种肉繁育中心
河南省阳白马寺种公牛站
许吕市家畜改良站
南阳方帝牧尊医工作站
斑北省畜禽育种中心种公牛站
广西壮门治区案高品种改良站
西川省家畜玲冻希液中心站
云南省家畜冷禄精波站
大通白族门治州家奇冷冻液站
西藏自治区姚县特牛冻精站
重庆市种公牛站
NY/T 1234—2006
省、白治区
宁夏回族自论区
新疆维吉尔自治区
广东省
贵州省
青海省
表B.1 (续)
隧西省家畜改良站
种公学站会称
西安市奶牛科学研究断种公牛站百肃省家青繁育中心
宁夏同族自治区家备改良站
新维吾尔自治区家畜繁育改良总站」东省科公牛站
贵州省家畜改淀站
青海省家畜政良站
注:代号的第一,第二个字母为该单位所在省、自治区汉语耕音第第\个字的大写了母了头;班“河南\代导为“HN\。代号第三个宁母的继码规则：妮果该省、自治区只有一个站则门\S\或“Q\如果该省(区)有三个以上公牛站，则用该单位所个字的大笃字所字头。如\问庞省纯种肉牛繁育中心“在州市，则该站代号的第三个字母川“7'在臧市没谱懋窄第
牛冷冻精液稀释液配力如下：
附录c
（资料性附录）
牛冷冻精液稀释液配方
第液蒸馏水100ml.,柠檬酸钠2.97g，卵黄10m，第液取第一4l.75mL,加入果糖2.5g,廿油了mL上述稀释，每100mJ.加青霉素，链等素各5万1U10斤ILNY/T1234—2006
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。