【农业行业标准(NY)】 破壁灵芝孢子粉破壁率的测定

ICS 67.080
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1677--2008
破壁灵芝孢子粉破壁率的测定
Determination of sporoderm--broken rate of Ganoderma spore product2008-08-28发布
2008-10-01实施
中华人民共和国农业部发布
本标准由中华人民共和国农业部摄出并归口。NY/T1677—2008
在标准起草单位：农业部食用菌产品质监督检验测试心（上海）、上海市农业科学院农产品质凰标准与检测技术研究所、上海市农业科学院食用菌研究所。本标雅主要起草人：邢增涛、赵晓燕，倪伟锋、尚晓冬、李明容、赵志麟、谢宝贵1范围
破壁灵芝孢子粉破壁率的测定
本标雅规定了破壁录芝孢子粉被璧率的测定方法。本标推适用于未瘀加任何辅料破壁灵芝孢子粉破璧率的测定。2规范性引用文件
NY/T1677--2008
下列义件中的条款通过本标的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括谢误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标谁达成协议的各方研究是否可使用这些文伴的最新版本。凡是不注日期的引用文件：共最新版本适用丁本标准。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
通过血球计数板对末破璧灵芝孢了粉进行计数：建立灵芝孢子粉质量与孢子个数之问的标推曲线，利用此标推出线确定问批砍定压量待测破壁孢子粉巾未被壁孢子粉的孢子个数，获得破孢子粉的被整。
4试剂
4.1水,GB/T6682，二级。
4.2无水硫酸锌（ZnsO4）
4.3无水乙障(CHOH)。
4.470.0名/L硫酸锌液：称瑕7.0g在110℃干燥至重的无水硫酸锌（ZmSO.）.溶丁100mL.水中。
4.5悬浮用溶液
毓酸锌（4.3)导无水之醇以10十1的比例充分混合，现用现配5仪器设备
5.1分析天平感量0.001g
5.2下燥箱。
5.3血球计数极。
5.4超声波仪。
5.5涡旋混合器。
5.6普道光学显微镜（月镜×10,物镜×20）。5.7其塞比色管，容量25mL。
6分析步骤
6.1未破壁孢子粉的清洗除杂
称取 0.10多与待测破壁孢了粉同批次的术破壁孢子粉：置于 0.2t筛子上，用100 1mL水冲洗，NY/T 1677—2008
250mI.链形瓶收集抢子粉悬浮液，定性滤纸过滤悬浮液，如果滤液比较浑浊，用水冲洗，直至滤液变道消，充去滤液。洗净后的孢子粉60℃烘干至恒重，置」下燥器中保存。6.2待测破壁孢子粉的预处理
衍测样品0℃烘干至恒重，置于干燥器中保存，待测。6.3标准曲线的绘制
6.3.1样品稀释
分别称取末破孢子粉约0.01、0.03.0.04,0.05g(精确到1mg)于25rnL比色管中.加人10 mL悬浮计数用溶液（4，4），在涡旋混合器上涡旋振荡，使结块的泡子粉散开6.3.2孢子粉悬浮液的超声处理
将装有孢子粉悬浮液的比色管放入超声波仪中，超声处理60min。超声处理期间，存隔15min了摇数次，使下沉的孢广感浮起来，继续进行超声处理，最终使孢子分散均勾：订用愿浮计数用溶液（4.4）定容至 25 ml..
6.3.3制片
将洁的盖玻片盖于血球计数板上，吸取孢子粉悬浮液8.0山，进样。进时应缓慢勺速，使盖被片下无气泡。进样完成后静置约%05.等待跑子充分扩散和沉降，6.3.4观察计数
光学显微镜100倍下粗调，确定视野后布200倍（必要时增人倍数）下进行计数，计数时，对焦距进行微调，充分统计处丁计数板上不同空间位置的孢子。部分孢子粉会处]中格边线工，计数时应仪统计位于格四个边线的其中两个边线的抱子粉数使用16个中格×2G个小格的计数板时，只计算四个们上的四个中格的孢子数目（即以100个小格为个计数单位）：当使用25个中格×16个小格的计数板时，除计算四个们上的四个中格外，还需计算中央一个中格的孢广数目（即以80个小格为一个计数单位）。每个样品观察计数时应去掉离群较大的值，有效观察计数不少于6次，然后取其均值。6.3.5绘制标准曲线bZxz.net
按上述计数步骤分别对上述预处理后的米破璧孢子粉悬浮液进行订数，然后以质量为横坐标，以每个引数单位的跑子平均数为纵坐标，制作标准期线。6.4待测样品计数
称取待测样品约0.04%，精确到1mg，按6.3.1~6.3.5的操作步骤进行处理，计数结果计算
破壁率以质量分数计，单位以10-\或%表示，接公式(1)计算：W_N= Ne ×100
式中：
N1一从标准曲线查到的与符测样品相同质最的未破壁孢了粉的数目，单位为个；N：一一观察统计的-定质量破密孢子粉样品中末破壁孢子粉的数目，单位为个。计算结果保留到小数点后一位。8精密度
破壁率30%：在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于20%，以大于20%的情况不趋过5为前提；
NY/T 1677—2008
破壁率30%：在画复性条件下获得的两饮独立试结果的绝对差值不大于10%：以大于10%的情说不超过多%为前提。
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