【商检行业标准(SN)】 大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SV/T1899—2007
大豆溃疡病菌检疫鉴定方法
Identification of Diaporthe phaseolorum (Cooke et Ell. Sacc. var:caulivura Athow et Caldwell and Diaporthe phaseolorum (Cookc el Ell. ) Saccvar. meridionalis F. A. Fernandez2007-05-23发布
中华人民儿和国
国家质量监督检验检疫总局
2007-12-01实施
本标准的附求A、附求B和附求（为资料性附录本标准由区家认证认可监督管理委员会提出并力口SN/T1899—2007
本标滩起草单位：中国检验检骏科学研究院、中华人民共和宁波出人境恰验检疫局，本标滩起草人：严逊、灵品埗、顾意锋。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准http://foodmate.ne范围
大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法
SN/T 1899—2007
本标准确文了进境人[Gtucinrmax（I，）Merrill 和了及其爽带的植物残体的人毫溃疡病菌检利鉴定方法：
本标准斥二对来白人茎溃疡病发兰国家和地文的所有而于加工和繁殖的人以的逃境检疫。2原理
2.1分类地位
文名：Soybea Stem Ca-iker
学名：
北大H案溃疡病菌:Dta perthe phaseotorun (Cooke l Ell.) Sace, var. cautivnzu Athow tt talewcll南h大H睾溃疡病菌:LDia perthe phaseotorun (Coke cl Ell.） Sece. var. mertutiomartis 1,A. Peinandez光性态：
北方大豆茎渍疡病：Pormupsisphsrol南方人豆蓝溃疡病菌：Phonopsissp.大H遗疡病萄属真菌界（Fungi），了囊菌门（Ascoriycola)，了变菌纲（Ascomyceles）间座衰(Diaporthales），黑皮壳科（Vulsaccee），闸座壳属（DiaportheNits.）2.2鉴定原理
北方茎溃病菊的种传儿率比较高，平均12、%，最高叫达22汇：南方举溃疡柄菌的种传儿率较低,通常不会高丁了%。病原菊以菌丝的形态存活于刘子内。此外，病菊还可以菌丝和子囊的形态在大亚病娥体主越冬，并随病焱体作远距离传播。此真医为兼性炎片基：国此，本标准采用的原是从带菌种了和病残「分离病原菌·并根据病原苗的形态法行鉴定。3仪器和用具
3.1仪器
体视显微镜、普通光华显微镜（只洲镜和测微心）普通人平（感员C.」）、洁净工作台，光照培养箱或光照培养架、紫外光灯管(报瑙养箱或增养架八寸）,高乐火菊器。3.2用具　
滤纸、三持放大镜、培独Ⅱ烧杯，了、剪力、载玻片，盖酸片、量简、吸节、洒精灯。4试剂和培养基
4.1试剂
马饸蔻、葡菊瓣、琼脂、25洛乳酸、1.25洛次氯酸钠（VaCl0)、无菌水，75为洒精。4.2培养基
铃薯荷靠糖培养（PIA）
5鉴定方法
5. 1症状检查
茎溃疡病菌在梢各个牛长萨段都能侵染架，受侵染的茎组织在疡部书易碎，表皮游·形成坏形SN/T 1899—2007
带。受侵染的利子皱缩箱，变轻，外衣口垩状。观繁收集的大更种子及火杂的值物娥不石无上面所拥的症状。似的病体和病子粒要带问实验究进行显微镜检验和病填菌分离。5.2保湿培养
5.2.1种子保湿培养
对份样品取10G粒种子，用1.25%的次氯酸钠表山火菌3 min~-2 rmir后，效在垫层火菌泥滤纸的培养Ⅲ中,每Ⅲ 1G粒在案温20~22℃下放置21斤.在2C下冷冻2h-然斤转至25照培养籍或光照养架上培养，黑暗和近紫外光照条12h交替，19后粥繁种了上是否出现户色荣丝5.2.2植物残体保湿培养
殖物残体在7%的洒精溶液中泡1min.经灭萄水洗涤后放置在垫三层湿润滤纸的培养Ⅲ户，转全25范照培择箱或光腋培养渠上培养，黑音和近紫外范照各12h交臀，0后观察植物残体丧旧是否山现白色菌丝：
5.3分离
挑取少量色苗丝转到酸性马铃薯葡萄糖培养其（APT)A)(PT)A 培养苯在灭菌后例平而前.用25为乳骏将1调至4.5）1,近紫外光照和黑暗各12交替,25℃下培养1C d，观察落等征，如落中有黑色子座,则用针桃取子座.用水件浮载剂制成玻片.在微镜下观察有性繁殖器官，如子囊壳、子粪、子粪孢一等。
5.4生物学鉴定
观繁察菌落特征，如菌落中有黑色了座，则用针挑取了座，用水作浮载剂制戚坡片在品微镜下观察勺性藜黏器官，如了蕊壳、了、了孢了等…6鉴定特征
北方蕊溃荡病萄的茵落广色，致密，菌丝然牛，从培养背面观察，菌路无色，北方茎溉疡病菌其黑色、圆形的了座,直径小于2 tn被吡不合：了爽壳黑色,球形，人小(165 ~34μm)×（282 μ~212μm）具长突出的檬，长要为2m~-518,基部宽85μm~-192μm.顶部22~36m了粪柄.大小3 m~-lG mn)义(l ur~-7 μr).长棒形,H有一个薄的很快消火的箭，子粪子透听,长风至圆杉,双细炮,分隔处稍缢缩,每个细H双泡,大小(a μm~12 [m)×(3 μm~~1 μm)。南方茎遗峻病莉的菌广负，平庞由于形戒厚孢了而旱色。南方茎遗荡病荫的了庇形状不规则，长丧2I10 ·尔融合形成人「座，了滚亢形态与北方鉴溃荡病菌杆拟，们像的基部宽度是北方苯溃疡病菌的一俯，了斑和了斑抱了也与北方荒溃疡病菌相似，仙要更人些，了囊大小(33, 8 μm-37, 1 μm) x(6, 7 μm--7. 0 μm),7变他了人小(9, 5 μm--9, 8 μm) x(3, 1 μm--3, 4 μm) 茎溃疡病菊的无性型均为拟睾点需（Pm)，般很难产牛：大只他Phimnis种的形态比较参见附录B7结果判定
如分离菌的各形态特征与第6章措述的北方案溃疡病菊或南为举溃疡病菌形态相物合即可判定为北方茶溃疡病菌Dtaporthephaseolorumvar.cautivora或南方茶演疡病菌Diuporthephaseolorumvar.nrrielionulis.
食品伙伴区
A.1分布
附录A
（资料性附录）
大豆溃疡病菌的分布和寄主
SN/T 1899—2007
A. 1. 1 大豆北方茎溃疡病菌[Diaporthc phaseoforum （Cuoke et Ell.） Sacc. val. caulivora Athow etCaldwell
亚洲：韩国
欧洲：圳利克罗地业，塞尔维亚，黑川法国，意大和俄罗斯，四西班牙。北美洲：美国、训京大：
南美洲：阿振延、厄派多尔：
A, 1, 2大豆南方茎溃疡病菌LDia porihe phaseolorum (Cooke et Ell. ) Sacc, var, meridionalis F, A. Fer-mandez
亚洲:印度。
欧洲;意人利
非洲：沁纳、龙口刻业、坦桑尼亚北美洲：美国
南关洲：刚廷、口凹、玻利维亚，巴拉兰，A.2寄主
大豆_Gtyee mur 品k伴网httn：//wwwfoodmateneSN/T 1899—2007
无性型
辫形态
人亚化方紫溃荡满菌
Diaporrhephasoiorim?
VhT.cuLivort
Hinnnpsis phasat?
必无状临白色肃路
无杆型形态在白然条件下役少见“紫壳在不发达的小子
上形成，，65m-
340 um) x(28? μm -
4.2 μn)J墨(8 n
- m) (1 μ-- ~
有件制态
7μm)长状，莘
薄·易消解，顶帝有消晰
折光坏。泡了
t8rm ～ 12 jm）X
(3 μm --1 r), 透明,
纺锤形双胞，分隔处培
釜缩，带含油球，
附录Ｒ
（资料性附录）
大豆茎溃疡病菌与近似种的比较表B.1
大豆南方李渍疡满萄
天豆黄枝求面
Diiportne
phusermumDiaporhephaentorim
Var.ineridiomalis
hrmrpsis FF.
var.sninie
Ninnps sosar
馨状尚济，者熟后变成深
丛在毛状，没盛，老练作转
在户然条件下很少见
端台：
分坐拉子器一艇不趋过
2c0 m. 产生2科孢了
a型外牛泡了(1. 5 m5: ~-
3. μm) X t5, im -
11:, 5 μm,避明.胞,校
形,否？ 个脂滴;β型分尘
弛了受带厌透对，单驱、
丝状有弯，
子楚、子犯子比北方满
子毙壳近球形基部降旁，
溃疡病菊大、广囊亢若兰
十小而不发达的于康，形
念与北方半淡癌病菌相
似。了（3
37. 1 pm) / (6. 7 um ~
，囊袍
(y.5 μn -~ 5. 8 μm) :
(3. 1 μm-- 3. 1 μm),
http:
(14# μm r- 232 m) 2.
(_35 μm~-31e μ): F
(3. 3μm~ 10 um)%
<35 pm- 51 μm), 长传
状,在了虑泡了释放前消
孵、囊「彩状似型
少袍于，稍人·双孢，每
个组炮双洱球。
人豆拟紫点种鹿病湿
未发现
Phomopsis tongicotti
菊落门色.号案集的
丛举老状，有付部分
区或显美绿色，
分尘孢子舜长度bZxz.net
100 pm--250 rm.
“型分十饱了透明
单服,梭形.含2个汨
尿,天小(1. 1 um --
3.5 μm) X ( μm --
9μm)。β制分生独
厂极少，
木发现
将淡疡病菌于座横切面；
B——广囊：
一孢子，
附录C
（资斜性附录）
大豆茎溃疡病菌形态特征
http://foodmate.netSN/T1899—2007
SN/T1899-200/
小华人去共和因出人境登验检疫行业标消
大豆茎溃疡病菌检疫鉴定方法
SN/T [$93—2007
标股社串版
北京复兴门外三串河北街13号
服政编好：1V3
网: 5pe: nr:1. n
手话：685233-668517518
中国象润版社秦皇岛印刷！印刷并小$80×[23℃1/16到张 0.75字数13千字2007个9月第版2007年9月第
改印到
印数：2 0)
可号：15=666 ·2-18343
宗价8.00元
含品k伴网httn·//wwwfoodmatene2002—6681 1/NS
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。