【国家标准(GB)】 畜禽肉中地塞米松残留量的测定 液相色谱-串联质谱法

畜禽肉中地塞米松残留量的测定液相色谱-串联质谱法
GB/T 20741—2006
本标演规定了牛肉，猪肉、羊肉和鸡肉中地塞来松残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。木标推适用于牛肉、猪肉、羊肉和鸡树地塞米松残留望的测定。本标摊的方法检出限：0.2
2规范性引用文件
下列文件中的条款辅意
探雅的引用而成为本标谁的祭款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘谋切容）或修楚否可使用这些文体的最新版本，GB/T 6379. 领企方法
(GI3:T 6379. 125041SO) 5725%GB/T63792
测量方法与线
注写再现能的融GBTR
GB:T 6682
3原理
务断实验家用
动物组织擦靠加人内标甲
液浓缩后，经过
剂和树料
NI-ELLT Si
水为 GB/T 662
中：色酒纯，
乙崩：色纯。
乙酸乙酯：色谱纯。
甲酸：优级纯。
正色烷：色谱纯.
两酮：色谱纯，
度（正确度
往净化，渡相色让
肉潮-正包烷溶液：酮+正巴烷（丙酮-正巴烷溶液亚：丙酮班巴烷(4十6)。，鼓励根据本标证达成协议的务方研究新版本握用于然标准，
第部分：总则与定义
第2部分恤光标准测影方法夏复
1392.1eq IS( 369:1987)
nlone），样品用z酸乙酯提取，提取请仪测定，鼎标漫定量。
无水酸钠：分折纯。在650℃马弗炉中灼烧6h,贮存于干焕中，4.9
氢氢化钠：优级纯。
化钠溶液：0,3 n1ol/L称取12g氢氧化钩，用水落解，定穿至1000mL。4.11
4，12璨雍米松和甲基强的橙标强赖质：纯度9%。4.13地塞来松标准循备溶滋：1.01Ig/nmL。准称取100m地寇米松标准物质，用甲醇溶解：定容至100 m!。配成的标推储备液可在度循F一20℃冰箱中保存三个月。4.14甲据强的松龙标雅绪备潜液：1.0m/mL。猫称敢100mg甲基强的松龙标雅物质，用甲醇溶GH/T 20741--2006
解，定寄至100n1，配成的标储备液可在温度低于一20℃冰箱中保存三个月。4.15地密米松标1作浴液：吸取适量的地塞米松标准储备溶液：用甲醇分剃配成5/mL和0.050g/ml.两种浓度的标准工作溶液。配成的标推：1作溶液可在温度低于一20℃冰箱中保存一个月。
4.16地塞米松基质标净工作溶液：分别吸取适的地暴米松标准工作溶液，用空由样品提取液分别配成浓度分别为1.0ng/mL、2.0ng/ml、5.0ng/mL、50.0ng/maL的基质标准工作溶被。基质标准工作溶波应现用现配。
4.17甲基强的松龙标准工作溶液：吸政适量的甲基强的松龙标准储备溶液，用甲醇分别配成5g/1nL和.5让名/工两利液度的标推工作落液。配成的标准工作落液可在温度低于20℃冰箱中保荐一个月。
4.18BC)ND-ELUTSi固相率取柱或当者：5001B：3mL。使用前用2mL两酮+正已烷（2+8)预处理，保持住体湿润。
4,19滤膜：0.20 μm
5.1液相包谱-串联质谱仪：配有大气压化学电离源（APCI)。5.2分析天乎感0.1g和o.心1g。
5.3液体混勾露。
5.4周萃取真空装置
5.5均质器。
5.6振荡器。
5.7只塞玻璃离心管：50 ml.
5.8真空：真空魔应达到80kPa。5. 9离心积。
5.10旋转蒸发器。
5.11氮气浓缩仪。
5.12群品管:10 mL
5. 13梁形瓶;150 ml。
5.14简形斗。bzxz.net
6试的制备与保存
6.1试样的制备
从全部样品中取出有代表性样品约1，充分额神，混勾，均分成两份，分别装入洁净容器内。密封作为试样，注明标记。在抽样和样的操作过都中，应防止样晶受到污案或发生残解物含暨的变化，6.2试样保存
将试样于一18℃冷冻保存。
？測定步骤
7.1提取
称取5g试样（猜确到0.01）置于50mL具密坡璃离心管中，加人0.5/mL内标甲基独的松龙(6-alpha-methyiprednisolone)标准工作榕液20ul.加入10mL0.3mnl/L，氮氧化钠溶液，在液体泥匀露上混甸1min，加20mi乙酸乙，用均质器均质1min，在振荡器振荡20min：以3000r/min离心5nin.取上清液过链有25g无水硫酸钠的简形滑斗-率染形瓶中。再用20mE乙酸乙酯提取一次，过无GB/T 20741-2006
水硫酸钠简形溺斗，合并上清液，用旋转蒸发器于45水浴上减压蒸发至近干，用1mL乙酸乙能和5mL正巴烧溶解。
7.2净化
将提段液移室经预处理的BOND-ELUT S:相萃取柱中，用2mL丙酮+正己烷(4+6>殊涤粼形瓶和萃取柱：弃去全部流出液。在65kPa的负压下，减抽干1min，用GmL两酮-1正已烷(4十6）以3nL/min流速洗脱，收集洗脱液于10mL样品增中，用氮气浓缩仪吹于，思1nL流动相溶解，过0.20Mm滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。7.3测定
液相色谱条件
包谱柱：AtlantisriC，3μn150mm×2.1mm内径）或相当者流动相：乙脂+0.1%平酸水（50十50）流速：200μL/min;
柱温：30℃：
避样望：20μT。
质谱条件
商子源：大气压化学电源（APCI)：6
扫描方或：正离手扫描：
检测方式：多反应盗测：
雾化电流：3.00nA：
气帘气屏灯：0.138M1Pa:
露化气亚力：0.276MPa：
辅助加热气压力：0.138MPa：
离子源温度：250℃，
定性离子对，定景子对，去簇电压和碰撞能筐见表1。表1地整米松和伊基强的松龙的谱数名称
也赛来松
甲悲强的松龙
定性离子对(m/)
353.2/373.2
353.2/355. 2
375. 2/161. 2
375.2/339.2
7.3.3”液相色谱-串联质谱溉定定基离于对(m/α)
393. 27373,2
375.2,161.2
去额电压
硫瘤能查
在仪游最佳工作条件下，采用内标法进行定测定，内标为用基强的松龙，为心基的影响，定照采用基质标准工作溶液进样，样品溶液小地密米松的响应值应在仪器测定的线性范围内。地塞米松和用基强的松龙标准物质总离子流图参见图A，了。在上述色谱条件和质谱条件下，地塞来讼和甲越强的松龙参考保留时间见表2.
衰2地窦米松和甲基强的松龙的参考保留时间名称
察米松
甲熊强的扮龙
本方法的添加同收率数据牵见谢录B。保留间/min
GH/ 20741--2006
7. 4平行试验
按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定7.5空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤同时完成空白试验。8结果计藓
测定结巢可由计机按内标法自动计算，也可按式(1)计筹：×9×会×
式中．
一试样中被测物残留量，单位为微克每于克（品g/kg）；X
基质标准工作溶液中被测物的滚度，单位为纳克舒囊升（ng/m）；试样浴液中被训物蜂面积；
A.提质标准工作缩被测物的色谱峰而积一试样溶液脚你物的浓度
基质标准产作设中内
A.基质标理量作凌中内
4一一试样落液中个标物的位
样液最终定容体积，单
试样塔薇所代表试样
法，计笨结果度是白位。
9鞘密度
本标雅的特臀度缴据是按照
以95%的可信度染计
9.1复性
在重复性测是留
京，暴得的
见表3。
松食灶范围及重复性究
地塞米松
范国室
奇服pg/ky
连：切为两次谢定结紧的算来单离值。性和專现
重登性限
规定确定的垂复性补再现性的值通过亘复性限，动物组织中地塞来品程
egr=1.0G82lgm-0.6579
再玩性限R
pR=1. 035 71gai -- 0. 558 3
如果差值超过章复性限，应奢痴试验结果并童新究成两次单个试验的测定。9.2薄现性
在再现性测定条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性眼R，动物组织中地塞米松的含范围及尊现性方见表3。
附录A
（资料性附景）
地密光松和甲基强的松龙标准物质总商子流图地塞米松和甲基强的松龙标准物质总离子流图，见图A.1。1660
1350号
1 200
地密术松
地塞米松和甲基强的松龙标准物质总离子流图图 A.
GB/T20741—2006
GB/T20741—2006
附聚B
（资料性附录）
本方法牛肉小地寨米松游如浓度及其平均回改率的试验数据见表B.1。表B.1地塞米松添加浓度及其平均回收率的试验数据药物名称
地雾米松
添加浓度/pg/kg）
平沟回收率/（%)
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