【国家标准(GB)】 保健食品中绿原酸的测定

ICS 67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T22250—2008
保健食品中绿原酸的测定
Determination of chlorogenic acid in health foods2008-07-31发布
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中华人民共和国卫生部bzxZ.net
中国国家标准化管理委员会
2008-11-01实施
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。本标准态加起草单位：河北省疾病预防控制中心、吉林省疾病预防控制中心。本标摊主要起草人：杨大进、方从容、玉竹天、韩会新、李青。本标准为首次发布。
GB/T22250—2008
1范围
保健食品中绿原酸的测定
GB/T22250—2008
本标准规定了保健食品中绿原酸的测定方法。本标准适用于以金银花、菊花、杜仲、山挝等一种或几种为主要原料的保健食品中绿原的测定。当取样量为2.0g时，定容体积为25mL时，方法的检出限（LOD)为1，4×10-3g/kg，方法的定量限（L0Q)为4.0×10-\g/kg。方法的线性范围为2.0μg/mL～80μg/mL。2原理
根据绿原酸易溶于甲醇、乙醇等极性有机溶剂的理化特性，一般试样中的绿原酸用70必中醇提琅如果试样为油性软胶袭，可用石油醚脱脂挥干后再用70%甲醇提取。提取液定容，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，由紫外检测器检测，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。3试剂和材料
3.1 乙酸(CH;COOH):优纯。
3.2乙睛(CH,CN)：色谱纯。
3.3甲醇(CH,OH)色谱纯
3.4石油醚：分析纯，沸程30℃～60℃。3.5水（Hz0)：为实验室一级用水，电导率（25℃）为0.01mS/m。3.6绿原酸标准品：纯度≥99%。3.7绿原酸标准储备液（2.00mg/mL）：称取绿原酸标推品0.02g（精确至0.0001g）于10.0ml容量瓶中，加流动相溶解并定容至刻度，混匀（此标准倦备被在4℃冰箱中，可保存5d)。3.8绿原酸标准使用液（200ug/mL）：准确量取1.00ml.绿原酸标推储备液于10.0mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，混匀(此标准使用液在4℃冰箱中，可保存5d)。4仪器和设备
4.1高效液相色谱议：附紫外检测器。4.2超声波清洗器。
4.3离心机:4 000 1/min。
5分析步骤
5.1试样处理
5.1.1-般试样：称取0.5g~2g粉碎均匀的试样（精确到0.001g）于25.0mL容量瓶中，加入20mL70%甲醇，超波提取30nin，用70%甲醇定容至刻度，混匀（如试样中绿原缴含量较高，可适当进行稀释），过0.45μm滤膜，滤液供液相色谱分析。5.1.2油性试样：称取0.5g～2g均匀的试样（精确到0.001g）于25mL离心试中，加入15mL石油醚，振摇1min后，以3000r/min离心10min，弃去溶剂后再重复一次。将试样中溶剂挥干后加入70%甲，其余步骤同5.1.1。
5.1.3体试样：以3000r/min离心10min后（如试样中绿原酸含量较高，可适当进行稀释）.过0.45μm滤膜，滤液供液相色谱分析。1
GB/T 22250—2008
5.2标准曲线的制备
分别吸取绿原酸标准使用液（3.8），用流动相稀释并在容量瓶中定容的浓度分别为2.00、10.0、20.0、40.0.80.0#g/mL标准系列。5.3液相色谱参考件
5.3.1色谱柱：0DsCa色谱柱，250mm×4.6mm,5μm。5.3.2流动相：0.5%乙酸溶液十乙睛-9十1。5.3.3流速：1.0mL/mim.
5.3.4柱温：35℃。
5.3.5检测波长，327nm。
5.3.6进样量：10μL。
5.3.7色谱分析：取标准溶液和试样溶波注入色谱柱中，以保留时间定性，以试样峰面积或峰高与标准比较定量。
6结果计算
试样中绿原酸的含量按式(1)进行计算：X-
式中：
cXVX 1 000
m×1 000 X1 000
x——试样中的含量,单位为克每千克或克每升(g/kg或g/L)；一由标准曲线求得进样液中绿原酸的浓度，单位为微克每毫升（产/mL）V-一试样定容体积，单位为套升(mL)；m—试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。计算结果保留三位有效数字。
7精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。8色谱图
在上述色谱条件下的色谱图见图1~图2。要0.080
度a, 060
0. 501. 00
南绿酸
4.505. 005.506. 006.507. 00 7. 50 8. 00t/min
图1绿原酸标准色谱图
绿原酸
12.0011.0016.00
绿原酸试样色谱图
GB/T22250—2008
20.0022.00
GB/T22250-2008
华人民共
国家标
保健食品中绿原酸的测定
GB/T 22250—2008
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开本 880×1230 1/16
印张0.5
学数 6千字
2008 年10 月第一版
京2008年10月第一次印刷
书号：1550661-34149
9定价10.00元
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