【国家标准(GB)】 茶游离氨基酸总量测定

中华人民共和国国家标准
茶游离氨基酸总量测定
Tea-Determination of free amino acids content本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定。GB/T8314—87
茶叶水浸出物中具有α-氨基的有机酸且呈游离状态存在者,均称茶叶游离氨基酸。1原理
氨基酸在pH8.0的条件下与三酮共热,形成紫色络合物,用分光光度法在特定的波长下测定其含量。
仪器和用具
实验室常规仪器及下列各项：
2.1分析天平：感量0.0001g。
2.2分光光度仪。
3试剂和溶液
3.1pH8.0磷酸盐缓冲液：此内容来自标准下载网
按GB8313一87《茶茶多酚测定》中3.2的规定，配制1/15M磷酸氢二钠(3.2.1)和1/15M磷酸二氢钾(3.2.2)溶液。然后取1/15M的磷酸氢二钠溶液95mL和1/15M磷酸二氢钾溶液5mL,混匀。
3.22%三酮溶液：称取水合三酮（纯度不低于99%)2g,加50mL水和80mg氯化亚锡（GB638一78.分析纯）搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一夜，过滤后加水定容至100mL。
3.3茶氨酸或谷氨酸标准液：称取100mg茶氨酸或谷氨酸(纯度不低于99%)溶于100mL水中,作为母液。准确吸取5mL母液,加水定容至50mL作为工作液(1mL含茶氨酸或谷氨酸0.1mg)。
4操作方法
4.1取样
按GB8302—87《茶取样》规定取样。4.2试样的制备
按GB830387《茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定》的规定，制备试样。4.3测定步骤
4.3.1试液的制备
按GB8305—87《茶水浸出物测定》中3.4.1的规定，制备试液。4.3.2测定
准确吸取试液(4.3.1)1mL,注入25mL容量瓶中，加0.5mLpH8.0缓冲液(3.1)和0.5mL2%节三酮溶液(3.2),在沸水浴中加热15min。待冷却后加水定容至25mL。放置10min后用5mm比色杯，在570nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。4.3.3氨基酸定量标准曲线的制作分别吸取0.0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL氨基酸工作液(3.3)于一组25mL容量瓶中，各加水4mL、三酮溶液(3.2)0.5mL和缓冲液(3.1)2mL,在沸水浴中加热15min,冷却后加水定容至25mL,按4.3.2的操作测定吸光度(A)。将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准曲线。
注：制作标准曲线时,所用蒸馏水,必须是二次蒸馏水。5结果计算
5.1计算方法和公式
茶叶中游离氨基酸含量，以干态质量百分率表示,按下式计算：CLi
游离氨基酸总量(%)=
式中：L1-
试液总量，mL；
L2—测定用试样量,mL；
M—试样量,g;
C—根据4.3.2测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸的mg数m
试样干物质含量百分率，%。
如果符合重复性(5.2)的要求.取两次测定的算术平均值作为结果，5.2重复性
同一样品进行两次测定，测定值之差，每100g试样不得超过0.1g。结果报告
试验报告应包括下列内容：
使用的方法；
b.测定的结果(取小数点后一位);c.本标准中末规定的或另加的操作；试样的名称和产地；
e：试验日期,操作人员。
附加说明：
本标准由全国食品工业标准化技术委员会提出。本标准由中国农业科学院茶叶研究所、商品部杭州茶叶加工研究所、上海进出口商品检验局负责起草。
本标准主要起草人阮宇成、钟萝、严家辉、刘维华、周卫龙、王济安，中华人民共和国商业部1987-11-19批准1988-07-01实施
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