【地方标准】 保健用品毒理学评价程序与检验方法 第9部分：哺乳动物培养细胞染色体畸变试验

ICS 11.020 C05 备案号：58328-2018 DB22 吉林省地方标准 DB22/T396.9—2017 代替 DB22/T396-2014 保健用品毒理学评价程序与检验方法 第9部分：哺乳动物培养细胞染色体畸变试验 Toxicological evaluation procedures and test methods for health care products Part 9: Chromosome aberration test of cultured mammalian cells 2017-11-10发布 2017-12-30实施 吉林省质量技术监督局 发布 前言 DB22/T396《保健用品毒理学评价程序与检验方法》拟分为如下部分： 第1部分：评价程序； 第2部分：急性经皮毒性试验； 第3部分：长期经皮毒性试验； 第4部分：皮肤刺激性试验； 第5部分：皮肤变态反应试验； 第6部分：细菌回复突变试验； 第7部分：啮齿动物微核试验； 第8部分：小鼠精子畸形试验； 第9部分：哺乳动物培养细胞染色体畸变试验； 第10部分：致畸试验； 第11部分：致癌试验； 第12部分：人体皮肤斑贴试验。 本部分为DB22/T396-2017的第9部分，按照GB/T1.1—2009规则起草。本部分代替DB22/T396-2014。与2014版相比，结构进行了较大调整，主要技术变化包括：增加警示内容；增加范围；修改标本制作；修改镜检方法；修改结果评价。 本部分起草单位：吉林省疾病预防控制中心。 本部分主要起草人：孟令仪、宋昕恬、张晶莹、吴晓刚、孙兰、隋自洁、高峰。 本部分历次版本：DB22/T396-2004、DB22/T396-2014。 警示：使用本标准的人员应具有正规实验室工作实践经验。本标准未包含所有安全问题，使用者应采取适当安全与健康措施，并符合国家相关法规要求。 1 范围 本标准规定了保健用品毒理学中哺乳动物培养细胞染色体畸变试验的评价程序。 本标准适用于保健用品毒理学哺乳动物培养细胞染色体畸变试验检验方法。 2 哺乳动物培养细胞染色体畸变试验 2.1 细胞 哺乳动物原代或传代培养细胞，建议首选中国仓鼠肺细胞（CHL）。 2.2 剂量 至少采用三种不同剂量进行测试。一般以50%细胞生长抑制浓度（ID50）作为最高测试剂量。在正式试验前，应测定受试物对培养细胞的ID50，以24 h作用时间为准。 对于无细胞毒性的化合物，最高浓度可设为5 μL/mL、5 mg/mL或0.01 mol/L，并采用倍比稀释法确定中、低剂量。 2.3 代谢活化 采用经诱导剂处理后的哺乳动物肝微粒体酶（S9）进行体外代谢活化试验，在加入S9 mix和不加S9 mix条件下平行测试。 2.4 受试物作用时间 受试物与细胞需接触适当时间后进行观察。非代谢活化条件下一般在接触24 h和48 h后收获细胞；代谢活化作用时间应不少于6 h。 2.5 对照组设置 a）空白对照：受试物浓度为0的对照组； b）溶剂对照：生理盐水或受试物溶剂对照组； c）阳性对照：可采用环磷酰胺、丝裂霉素等已知诱发染色体畸变的化合物； d）S9 mix对照组。 2.6 标本制作 2.6.1 消化