【地方标准】 鮰类肠败血症检疫技术规程

DB43/T895—2014 类肠败血症检疫技术规程

前言
本标准按照GB/T1.1—2009规则编制，由湖南省畜牧水产局提出并归口，起草单位为湖南农业大学动物科学技术学院，主要起草人为肖克宇、钟蕾、戴振炎、江辉、何艳林、文祝友、谭情。

1 范围
本标准规定了鲫类肠败血症（Enteric Septicaemia of Catfish，ESC）检疫的试剂和培养基、设备和器械、检疫方法及无害化处理。本标准适用于湖南省鲫类肠败血症的检疫。

2 规范性引用文件
本文件引用标准包括GB/T4789.28《食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂》、SQT7014《水生动物检疫实验技术规范》、SQT7103《水生动物产地检疫采样技术规范》、SQT7105《染疫水生动物无害化处理规程》、SQT7214《鱼类爱德华氏菌检测方法》。

3 试剂和培养基
按相关水生动物检疫及微生物学标准规定执行。

4 设备和器械
检验所需设备和器械按SQT7214规定执行。

5 检疫方法
5.1 流行病学调查：鲫类肠败血症主要危害斑点叉尾鲫，黑鲈、鳗、鲑鳟鱼等亦可感染。鱼苗至成鱼均可发病，春秋季水温18～28℃为高发期。饲养密度及环境胁迫可影响致病性。康复鱼可检测血清抗体，病原菌可在鱼体内存活4个月以上并呈带菌状态，经粪便排入水体，在沉积物中长期存活。

5.2 临床检查
5.2.1 群体检查：病鱼多表现为离群独游、反应迟钝、摄食下降或不摄食，部分呈垂直游动或螺旋状游动。
5.2.2 个体检查：分为肠道败血型和头盖穿孔型。肠道败血型表现为鳃丝苍白伴出血点、体表淤斑、腹部膨大、眼球突出及肌肉出血；头盖穿孔型表现为头背部溃烂穿孔、脑组织暴露。
5.2.3 解剖检查：腹腔含血性或清亮液体不凝固，肝肿大伴坏死灶，脾肾肿大出血，肠道扩张并充满液体，脑组织肉芽肿变化。
5.2.4 判定：在流行病学调查及临床检查中出现上述症状可判定为疑似病例。

5.3 病原菌分离与鉴定
病原为肠杆菌科爱德华氏菌属鲫爱德华氏菌（Edwardsiella ictaluri）。
5.3.1 采样按SQT7103执行，样品处理按SQT7214执行。
5.3.2 分离纯化：取肝、肾、脑组织接种血液琼脂培养基，28℃培养48小时，挑取优势菌落再纯化。
5.3.3 生化特性检测：包括形态观察、染色及运动性试验。革兰染色观察细菌形态及染色性；半固体培养基穿刺培养判断运动性，扩散呈云雾状为阳性，沿穿刺线生长为阴性。