【卫生行业标准(WS)】 尿中δ-氨基乙酰丙酸的分光光度测定方法

中华人民共和国卫生行业标准
尿中6-氨基乙酰丙酸的分光光度测定方法
Urine-Determination of -aminolevulinicacid---Spectrophotometric method1主题内容与适用范围
WS/T 23--1996
本标准规定尿中的氨基乙酰丙酸（A1.A)的分光光度测定方法。最低检测浓度为0.3mg/1.本标准适用于正常人和接触铅.I人尿中-AL.A浓度的测定，2原理
尿中-AI.A与乙酰乙酸乙酯缩合生成吡咯化合物。此化合物用乙酸乙酯提取,与对-二甲氮基苯甲释作用牛成红色化合物，在波长5511Ln处比色定量。3仪器
3.1分光光度让.10mm比色杯。
3.2只笨比色管10 ml。
3.3离心机。
3.4电灿
3.5聚乙烯塑料瓶.100ml.
3.6尿比重计。
4试剂
本标准所丽试剂除另有说明者外，为分析纯试剂。4.1Www.bzxZ.net
实验而水：为蒸馏水或具有同等纯度的去离子水。4.2冰乙酸u=1.05g/ml。
4.3高氮酸-12m1.67g/mlL
4.4无水乙酸纳
4.5对一甲氢基苯甲醛
4.6乙酰乙胶乙酯。
4.7 乙乙酯.
4.8乙酸盐缓冲液（pH=1.6）：十700ml.水中加入57ml.冰乙酸（4.2)，82g无水乙酸钠（4.4）.溶解后脂水至1000ml，
4.9显色剂：30ml.冰乙酸（4.2）中加人1g对-二甲氨基苯中醛（4.5），5ml.高氯酸（4.3）.5ml水.溶解后用泳乙酸（4,2)稀释至50mI.混,存于冰箱中4. 10 -ALA 标准溶液;准确称取 0. 012 80 g 8-ALA·HC1。用水溶解后,移入 100 ml 容量瓶中,稀释中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施
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至刻度.此溶液 [ mL,0. 10 mg a-AI.A。再用水稀释成 1 mI.=10 μ a-AA 的据准应用济液。4.11历控样：标准尿样、加标的模拟尿、加标的正常人混合尿或接触者的混合尿。5采样、运输和保存
用塑料瓶收集铅作业工人尿样50ml，尽快带回实验空（夏季运输时最好冷徽），测比重后，放4（派箱叫保存商。
6分析步骤
6.1样品处理
6.1.1分别取1ml.尿样于2支10mL其塞比色管中，各加1ml.水2ml.乙酸盐缓冲液（4.8），混勺，H一为样品管，另一为尿样空白管，6.1.2向样品管巾加入0.1ml.酰乙酸乙酯(4.6).向空白中加人(.4ml.乙酸盐缓冲液(4.8)，充分混勾。
6.2标准曲线的绘制
6.2.1取6支10叫l具塞比色實·按下表配制标准管。a-ALA标准管的配制
a-ALA 标应用溶液(4. 10),mL
8-AL.A含量.Mg
6. 2. 2 向各管中加入 2 ml. 乙酸盐缓冲液(4. 8),0. 4 mL 乙酰乙酸乙酯(4. 6),混列6.2.3于沸水浴中加热12min.取出冷却至室温。6.2.4各加入1ml，乙酸乙酯（4.7)，加塞振播10次，离心5min.静置分层。5
6.2.5各取2ml.乙酸乙酯提取滤于另6支10ml其塞比色管中，各加2ml显色剂（4.9）.混勺，静置10min，在554nm处，用10mm比色杯，以零为参比测量吸光度。6.2.6以吸光度为裂坐标.a A1.A 含量为横坐标,绘制标准曲线，6. 3品测定
取6.1.2条制备的样品溶液.按6.2.3~6.2.5条操作，测得吸光度后，将样品管的吸光度减去尿空白管的吸光度，从标准册线」查出样品管中8-ALA的含量，在测定前后及每次测定1)个样品后，测定次质控样。
7计算
7.1控式(1)让算尿样换就成标准比重(1.020)下的浓度的校止系数(）1. 020 — 1. 000
实测比重—1.000
7.2按式(2)计算尿中A1.A的浓度。爱
式中：X
…尿中-ALA的浓度/L;
品管中界AI.含量：
分析时所取账样的体积，mL。
+（2）
8说明
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8. 1 本法的捡测限为 0.30 g/L(取 0.5 I1L 尿样）。测定范围:0.30~10.00 mg/L。精密度:CV-1.2%~-3.6%。准确度：铅接触者的尿样加标回收率平均89.0%~~95.7%加标量：1.0,2.0.3.0,5. 0 mg/L .1=6)
8- 2接触者的尿样采集时问不限,采样时不存在污染问题。尿样 4C保存 14 d相对偏差为一5. 6%。8.3煮沸时间应从比色管放进水浴后，水重新沸腾.开始计算时间，不得于12min，8.4尿中-ALA含量高或颜色较深时、可减少取样量，8.5本法中红色生成物在60 min 内憩定。8.6乙酰乙酸乙酯如变黄色即不能使用。附加说明：
本标准出卫生部卫生监督司提出。本标滩山山东省芳动卫生职业病防治研究所负贵起草。本标准主要起草人戴秀莲。
本标准出卫生部委托技术归口单位中国预防必学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。
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