【国家标准(GB)】 室内空气中溶血性链球菌卫生标准

GB/T 18203-2000
城乡居民有70%时间是在室内度过的，故室内空气质量的好坏与人民健康密切相关。本标准遵循“引进”和必要的验证原则，结合我国国情，经过检索国内外的有关资料数据，并进行了验证性的研究及室内外水平的调查。综合分析后，制定出室内空气中溶血性链球菌卫生标准。本标准是国家室内空气污染物的卫生标准之一。
本标准附录A是标准的附录。
本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准起草单位：同济医科大学、深圳市卫生防疫站。本标准主要起草人：应晨江、蔡文德、赵美英、袁涛、谢虹、石磊、段文华。73
1范围
中华人民共和国国家标准
室内空气中溶血性链球菌卫生标准Hygienic standard for Streptococcus hemolyticus in indoor air本标准规定了室内空气中溶血性链球菌的最高容许限量值。本标准适用于室内空气的监测和评价，不适用于生产性场所的室内环境。2标准值
室内空气中溶血性链球菌的最高容许限量值（撞击法）≤36cfu/m3监测检测方法
GB/T 18203-2000
本标准检验方法为撞击法采集-血营养琼脂培养基测定法。见附录A（标准的附录）。国家质量技术监督局2000-09-30批准74
2001-01-01实施
A1原理
GB/T 18203 ---2000
附录A
（标准的附录）
空气中溶血性链球菌的撞击采集-血营养琼脂培养基培养测定法经撞击采集于血营养琼脂培养基上的空气样品，在37℃培养24h后，出现2～4mm界限分明的完全透明和半透明的溶血圈，圈中见菌落细小（0.5~0.75mm）、灰白色、表面光滑的G-链状无芽孢球菌，以每立方米空气中的菌落形成数（cfu/m\)表示。A2试剂
A2.1健康人血(羊血或免血)
A2.2制霉菌素
A2.3普通营养琼脂培养基Www.bzxZ.net
A3仪器
A3.1JWL-1型微生物采样器
A3.2超净工作台
A3.3灭菌器、培养箱、显微镜等A4分析步骤
A4.1血营养琼脂培养基制备步骤A4.1.1健康人新鲜去纤维蛋白全血：无菌采集健康人肘部静脉血，置于盛有于燥玻璃珠的小瓶内，迅速摇动至出现有纤维蛋白粘附在玻璃珠上为止，一4℃贮存，有效期为2天。A4.1.25000u/mL制霉菌素混悬液：无菌临用前摇均匀，有效期为7天。A4.1.3普通营养琼脂培养基：先将牛肉膏加大1/5~~1/6的用量，其他成分的用量不变，制备普通营养琼脂培养基，定量分装。
A4.1.4血营养琼脂培养基制备：先将普通营养琼脂培养基（4.1.3)完全融化，冷至60C~~70C.按100ml.培养基中加入制霉菌素混悬液（4.1.2)溶液1.0mL，混匀，再按每100mL培养基加入健康人新鲜去纤维蛋白全血（4.1.1)溶液5.0mL，混勾，立即倾入已消毒的塑料平Ⅲ（或血平血）中，凝固后随意抽取数个平Ⅲ，置37℃培养24h，呈阴性（咖啡色），备用，平血置于一4C贮存，有效期为1～14天。A4.2测定
将血平皿置于微生物采样器的撞击盒内，以25L/min流速，采集0.5～2.0min，经37C培养24h，观察菌落及其溶血圈，必要时涂片、染色、镜检。A5结果计算
见式(A1)。
式中M.-空气中溶血性链球菌含菌量cfu/m\；α每血平均菌落数；
t一采样时间,min;
b-采样流量，L/min。
检出限和加标回收率
GB/T18203—2000
血平Ⅲ上生长的溶血性链球菌菌落数不得超过20cfu；样品加标回收率88.6%土4.82%。76
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