【国家标准(GB)】 饲料中总砷的测定

GB/T 13079-1999
砷系有害元素，自然界中分布广、毒性大。砷与动物机体组织中酶的巯基结合，使之灭活而产生毒性，尤其以肝、肾、肺等内脏器官最为敏感，因此，砷已成为环境中必检项目之一。我国虽已制定了饲料中总砷的检验标准（GB/T13079-1991），但随着饲料工业的迅速发展，原标准已不能满足快速检验产品、及时控制产品质量的需求，同时在应用范围和样品前处理上都存在一定的局限性。为此，对GB/T13079一1991进行了修订。本标准中第篇“银盐法”，参考了国际标准ISO2590：1973《测定砷的通用方法Ag(DDTC)分光光度法》，在技术内容上尽可能与其保持-致。特点是将经典的“银盐法”与简便的“快速法”融为一体，使其更具有科学性、严谨性和灵活性。本标准对原标准主要有三点改进与补充：①增补了“快速法”，将修改后的“银盐法”作为标准第法（仲裁法），“硼氢化物还原光度法”为第二法（快速法）。用“快速法”消解样品时，由原来17h缩短至1.5h，用硼氢化钾作还原剂，使还原反应由90min减少到15min，提高效率近10倍。②规定了不同类型样品的前处理方法，使样品预处理技术更加完善、合理。③改进后的测砷装置结构合理、使用方便，密封性能好，提高了分析精度。经大量样品分析验证方法精密度小于6%，平均回收率为98.3%。方法检出限为0.04mg/mL。
本标准自实施之日起，同时代替GB/T13079—1991。本标准由中华人民共和国农业部和全国饲料工业标准化技术委员会共同提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：国家饲料质量监督检验中心（北京）。本标准主要起草人：王永真、李伟格、王彤、钱。109
1范围
中华人民共和国国家标准
饲料中总砷的测定
Determination of total arsenic in feeds本标准规定了饲料中总砷的测定方法。本标准适用于各种配（混）合饲料、浓缩饲料、预混合饲料及饲料原料。第一篇银盐法（仲裁法）
2原理
GB/T13079-1999
代替GB/T13079--1991
样品经酸消解或干灰化破坏有机物，使砷呈离子状态存在，经碘化钾、氯化亚锡将高价砷还原为三价砷，然后被锌粒和酸产生的新生态氢还原为砷化氢。在密闭装置中，被二乙氨基二硫代甲酸银（Ag-DDTC)的三氯甲烷溶液吸收，形成黄色或棕红色银溶胶，其颜色深浅与碑含量成正比，用分光光度计比色测定。形成胶体银的反应如下：AsH3 +6Ag(DDTC)=6Ag+3H(DDTC)+As(DDTC)3试剂
除特殊规定外，所用试剂均为分析纯，水系蒸馏水或相应纯度的水。3.1硝酸。
3.2硫酸。
3.3高氯酸。
3.4盐酸。
3. 5 抗坏血酸。
3.6无砷锌粒，粒径3.0mm±0.2mm。3.7混合酸溶液（A):HNO：H2SO4：HCIO4=23：3：4。3.8乙酸铅棉花：将医用脱脂棉在乙酸铅溶液（100g/L）中浸泡约1h，压除多余溶液，自然晾干，或在90C～100C烘干，保存于密闭瓶中。3.9二乙氨基二硫代甲酸银（Ag-DDTC)-三乙胺-三氟甲烷吸收溶液：2.5g/L。称取2.5g（精确到0.0002g）Ag-DDTC于干燥的烧杯中，加适量三氯甲烷待完全溶解后，转人1000mL容量瓶中，加人20mL三乙胺，用三氯甲烷定容，于棕色瓶中存放在冷暗处。若有沉淀应过滤后使用。
3.10砷标准储备溶液：1.0mg/mL。精确称取0.6600g三氧化二砷（110C，干燥2h），加5mL氢氧化钠溶液（200g/L.）)使之溶解，然后加入25mL硫酸溶液（60mL/L）中和，定容至500mL。此溶液每毫升含1.00mg砷，于塑料瓶中冷。
国家质量技术监督局1999-08-10批准110
2000-02-01发布
3.11砷标准工作溶液：1.0μg/ml。GB/T 13079—1999
准确吸取5.00mL砷标准储备液（3.10）于100ml，容量瓶中，加水定容，此溶液含砷50μg/mL。准确吸取50μg/mL砷标准溶液2.00mL，于100mL容量瓶中，加1mL盐酸，加水定容，摇匀，此溶液每毫升相当于1.0μg砷。
3.12硫酸溶液：60mL/I。
吸取6.0ml硫酸，缓慢加人约80mL水中,冷却后用水稀释至100mL。3.13盐酸溶液:c(HC1)=1 mol/L。量取84.0mL盐酸（3.4),倒人适量水中，用水稀释到1L。3.14盐酸溶液:c (HC1)=3 mol/L。将1份盐酸与3份水混合。
3.15硝酸镁溶液：150g/L。
称取30g硝酸镁[Mg（NO：)2·6H2O］溶于水中，并稀释至200mL。3.16碘化钾溶液：150g/L。
称取75g碘化钾溶于水中，定容至500mL，贮存于棕色瓶中。3.17酸性氯化亚锡溶液：400g/L。称取20g氯化亚锡（SnCl2·2H2O)溶于50mL盐酸中，加人数颗金属锡粒，可用一周。3.18氢氧化钠溶液：200g/L。
3.19乙酸铅溶液：200g/L。
4设备
4.1砷化氢发生及吸收装置（见图1)。4.1.1砷化氢发生器：100mL带30mL、40mL、50mL刻度线和侧管的锥形瓶。4.1.2导气管：管径为8.0mm~8.5mm；尖端孔为2.5mm~~3.0mm。4.1.3吸收瓶，下部带5mL刻度线。4.2分光光度计：波长范围360nm~800nm。4.3分析天平：感量0.0002g。
4.4可调温电炉：六联和二联各~个。4.5玻璃器血：凯氏瓶，各种刻度吸量管，容量瓶和高型烧杯。4.6瓷埚：30mL。
4.7高温炉：温控0℃～950℃。
5分析步骤
5.1样品制备
选择有代表性样品1.0kg，用四分法缩减至250g，过0.42mm孔筛，存于密封瓶中，待用。5.1.1混合酸消解法
配合饲料及植物性单一饲料，宜采用硝酸-硫酸-高氯酸消解法。称取试样3g～4g（精确到0.001g），置于250mL凯氏瓶中，加水少许涩润试样，加30mL混合酸（A），放置4h以上或过夜，置电炉上从室温开始消解。待棕色气体消失后，提高消解度，至冒白烟（SO3)数分钟（务必赶尽硝酸），此时溶液应清亮无色或淡黄色，瓶内溶液体积近似硫酸用量，残渣为白色。若瓶内溶液呈棕色，冷却后添加适量硝酸和高氯酸，直到消解完全。冷却，加10mL盐酸溶液（3.13）并煮沸，稍冷，转移到50mL容量瓶中，洗涤凯氏瓶3～5次，洗液并人容量瓶中，然后定容，摇匀，待测。试样消解液含砷小于10μg时，可直接转移到碑化氢发生器中，补加7mL盐酸，加水使瓶内溶液体积为40mL，从加碘化钾起以下按5.3操作步骤进行。111
5.1.2盐酸溶样法
GB/T 13079—1999
155±3
$40±！
单位：mm
1--砷化氢发生器；2—导气管；3~吸收瓶；4—乙酸铅棉花图1化氢发生及吸收装置
磷酸盐、碳酸盐和微量元素添加剂不宜加硫酸，应用盐酸溶样。称取试样1g～3g（精确到0.0002g）于100mL高型烧杯中，加水少许湿润试样，慢慢滴加10mL盐酸溶液（3.14），待激烈反应过后，再缓慢加人8mL盐酸，用水稀释至约30mL煮沸。转移到50mL容量瓶中，洗涤烧杯3~4次，洗液并人容量瓶中，定容，摇匀，待测。试样消解液含砷小于10时，可直接在发生器中溶样，用水稀释到40mL并煮沸，从加碘化钾起以下按5.3操作步骤进行。
另外，少数矿物质饲料富含硫，严重干扰砷的测定，可用盐酸溶解样品后（5.1.2），往高型杯中加入5mL乙酸铅溶液（3.19）并煮沸，静置20min，形成的硫化铅沉淀过滤除之，滤液定容至50ml.，以下按5.3规定步骤进行。
5.1.3干灰化法
预混料、浓缩饲料(配合饲料)可选择干灰化法。称取试样2g~~3g（精确至0.0002g）于30mL瓷埚中，低温炭化至无烟后，加人5mL硝酸镁溶液（3.15），混勾，于低温或沸水浴中蒸干，然后转人高温炉于550℃恒温灰化3.5h～4h。取出冷却，缓慢加入10ml.盐酸溶液（3.14），待激烈反应过后，煮沸并转移到50mL容量瓶中，洗涤埚3~5次，洗112
液并人容量瓶中，定容，摇匀，待测。GB/T13079--1999
所称试样含砷小于10μg时，可直接转移到发生器中，补加8ml.盐酸，加水至40mL左右，加人1g抗坏血酸溶解后，按5.3规定步骤操作。同时于相同条件下，做试剂空白试验。5.2标准曲线绘制
准确吸取碑标准工作溶液（1.0μg/mL)0.00，1.00,2.00,4.00，6.008.00，10.00mL于发生瓶中，加10ml.盐酸，加水稀释至40mL，从加人碘化钾起，以下按5.3规定步骤操作，测其吸光度，求出回归方程各参数或绘制出标准曲线。当更换锌粒批号或者新配制Ag-DDTC吸收液、碘化钾溶液和氯化亚锡溶液，均应重新绘制标准曲线。5.3还原反应与比色测定
从5.1.1、5.1.2、5.1.3处理好的待测液中，准确吸取适量溶液（含砷量应≥1.0μg）于砷化氢发生器中，补加盐酸至总量为10mL，并用水稀释到40mL，使溶液中盐酸浓度为3mol/L，然后向试样溶液、试剂空白溶液，标准系列溶液各发生器中，加人2mL碘化钾溶液（150g/L），摇匀，加人1mL氯化亚锡溶液（3.17），摇匀，静置15min。准确吸取5.00mLAg-DDTC吸收液于吸收瓶中，连接好发生吸收装置（勿漏气，导管塞有膨松的乙酸铅棉花）。从发生器侧管迅速加人4g无砷锌粒，反应45min，当室温低于15℃时，反应延长至1h。反应中轻摇发生瓶2次、反应结束后，取下吸收瓶，用三氯甲烷定容至5mL,摇匀（避光时溶液颜色稳定2h）。以原吸收液（3.9）为参比，在520nm处，用1cm比色池测定。注：Ag-DDTC吸收液系有机溶剂，凡与之接触器血务必干爆。6分析结果的计算与表述免费标准bzxz.net
6.1每千克饲料中砷含量按式(1)计算：A ×V.×1 000
m × V, × 1 000
式中：----每于克饲料中含砷量，mg；V,--试样消解液总体积,mL;
V--分取试液体积,mL
A-测试液中含碑量.μg;
m-—试样质量,g。
若样品中砷含量很高，可用式(2)计算：A2 × V, × V:× 1 000
m × V,X VX 1 000
式中：---每于克饲料中含碑量，mg;V-试样消解液总体积,mL;
V.---分取试液体积,mL;
V.分取液再定容体积,mL；
V,---测定时分取 V的体积,mL;
A.-测定用试液中含碑量.μg;
m---试样质量.g。
6.2结果表示
每个样品应做双样、以其算术平均值为分析结果，并表示至小数点后两位。当每干克试样中含砷量≥！.01g时，结果取三位有效数字。113
7允许差
GB/T 13079--1999
分析结果的相对偏差，应不大于表1所列允许差。表1分析结果允许差
每于克饲料中含砷量，mg
1.00~5.00
5.00~10.00
允许相对偏差，%
≤20%
≤10%
第二篇硼氢化物还原光度法（快速法）8原理
样品经酸消解或午灰化破坏有机物，使砷呈离子状态存在，在酒石酸环境中，硼氢化钾将砷离子还原成氢化砷（AsH：）气体。在密闭装置中，被Ag-DDTC三氯甲烷溶液吸收，形成黄色或棕红色银溶胶，其颜色深浅与砷含量成正比，用分光光度计比色测定。9试剂
除下列试剂外，其他试剂同第3章。9.1 混合酸溶液(B):HNO;:HzSO4:HC1O,=20：2：3。9.2甲基橙水溶液：1g/L;pH3.0(红)～4.4（橙）。9.3氨水溶液：1：1。
9.4酒石酸溶液：200g/L。
称取100g酒石酸加水适量，稍加热溶解，冷却后定容500mL。9.5硼氢化钾片:KBH4：NaCI=1：5将硼氢化钾和氟化钠按质量比1：5比例混勾，于90℃～100℃干燥2h，压力为2kPa条件下，压制成直径10mm，厚5mm，每片质量为1.0g士0.1g。压制及贮存中应防潮湿。10设备同第4章
11分析步骤
11.1样品制备
选择有代表性样品1.0kg，用四分法缩减至250g，过0.42mm孔筛，存于密封瓶中，待用。11.1.1混合酸消解法
配、混合饲料及植物性单一饲料，宜采用三酸消解法。称取试样2.0g～3.0g（精确到0.0002g)，于250mL凯氏瓶中，加水少许湿润试样，加25mL混合酸（B），置电炉上从室温开始消解，待样液煮沸后，关闭电炉10min～15min，继续加热消解，直至冒白烟（SO.）数分钟，此时溶液应清亮无色或淡黄色，体积近似硫酸用量，残渣为白色。稍冷，转移到100mL砷化氢发生器中，洗涤凯氏瓶3~4次，洗液并入发生器中，使瓶内溶液体积为30mL左右。以下按11.2、11.3操作步骤进行。注：消解时赶尽硝酸，否则结果偏低。11.1.2盐酸溶样法
磷酸盐、碳酸盐和微量元素添加剂不宜加硫酸，应用盐酸溶样。称取试样0.5g～2.0g（精确到0.0002g）于发生器中，慢慢滴加5mL盐酸溶液（3.14），待激烈反应过后，再缓慢加入3mL~~4ml盐114
GB/T13079-1999
酸，用水稀释至约30mL.煮沸，试样溶解后按11.2、11.3操作步骤进行。11.1.3干灰化法
预混料、浓缩饲料（配合饲料)可选择干灰化法。称取试样1.0g～2.0g（精确至0.0002g）于30mL瓷埚中，低温炭化完全后转人高温炉中，于550C恒温灰化3h。取出冷却，慢慢加人10mL盐酸溶液（3.14），待激烈反应过后煮沸并转移到砷化氢发生器中，加水至30ml.左右，加入1g抗坏血酸（3.5)溶解后，以下按11.2、11.3规定步骤操作。同时于相同条件下，做试剂空白试验。11.2氨水（1：1)调溶液pH值
发生器中加入2滴甲基橙指示剂，用氨水（1：1)调pH值至橙黄色，再滴加盐酸溶液（3.13)至刚好变红色。加人6.0mL酒石酸溶液（9.4），用水稀释至50mL。11.3还原反应与比色测定
准确吸取5.00ml.吸收液于吸收瓶中，连接好发生吸收装置（勿漏气，导管塞有膨松的乙酸铅棉花），从发生器侧管迅速加人氢化钾片，立即盖紧塞子，反应完毕再加第二片。反应时轻轻摇动发生器2~3次，待反应结束后，以原吸收液（3.9）为参比，在520nm处，用1cm比色池测定。注：还原反应时，应防止有毒砷化氢气体泄漏。12标准曲线绘制
准确吸取碑标准工作溶液（1.0μg/mL)0.00,1.00,2.00,4.00,6.00,8.00mL于发生瓶中，加水至44ml，加人6mL酒石酸溶液（9.4），以下按11.3规定步骤操作，测其吸光度，求出回归方程各参数或绘制出标准曲线。
13分析结果的计算与衰述同第 6章14允许差同第7章
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。