【商检行业标准(SN)】 出口乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法　荧光定量PCR法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 2101—2016
代替 SN/T 2101—2008

出口乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法
荧光定量 PCR 法

Determination of Mycobacterium tuberculosis in milk and dairy products for export—Real-time PCR method

中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局    发布

前 言

本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。

本标准代替 SN/T 2101—2008《乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法 荧光定量 PCR 法》。

本标准与 SN/T 2101—2008 相比，主要变化如下：

• 修改了乳及乳制品中提取结核分枝杆菌的乳液处理办法；
• 增加了确证实验；
• 修改了附录 B。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：吴斌、王刚、徐凤敏、刘钊、于畅、贾赟。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：

• SN/T 2101—2008。

出口乳及乳制品中结核分枝杆菌检测方法
荧光定量 PCR 法

1 范围

本标准规定了乳及乳制品中牛型结核分枝杆菌和人型结核分枝杆菌荧光 PCR 检测的操作方法。

本标准适用于鲜乳、乳粉中结核分枝杆菌的检测，其他乳制品可参照执行。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 18645动物结核病诊断技术

GB 19489实验室生物安全通用要求

GB/T 19495.2—2004转基因产品检测实验室技术要求

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1
实时荧光 PCR real-time fluorescent PCR

在普通聚合酶链反应的基础上，加入一条特异性的荧光探针。该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR 扩增时，Taq 酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告基团和淬灭基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条 DNA 链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与 PCR 产物形成完全同步。

3.2
Ct 值 cycle threshold

每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

3.3
Triton X-100

一种非离子型去垢剂。

4 材料和试剂

4.1 仪器和器材

4.1.1 荧光 PCR 检测仪。

4.1.2 高速台式冷冻离心机：0～20 000 r/min。

4.1.3 普通台式离心机。