【农业标准】 葡萄病毒检测技术规范

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 2377—2013

葡萄病毒检测技术规范

Code of practice for the detection of grapevine viruses

2013-09-10 发布 2014-01-01 实施

中华人民共和国农业部

前 言

本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。

本标准由农业部种植业管理司提出。

本标准由全国果品标准化技术委员会(SAC/TC 510)归口。

本标准起草单位：中国农业科学院果树研究所、农业部果品及苗木质量监督检验测试中心(兴城)。

本标准主要起草人：董雅凤、张尊平、范旭东、任芳、刘风之、聂继云。

葡萄病毒检测技术规范

1 范围

本标准规定了葡萄主要病毒检测技术的术语和定义、检测对象、检测方法和检测结果的判定。

本标准适用于葡萄接穗、插条、苗木、组培苗、田间植株中主要葡萄病毒的检测。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

NY/T 1843 葡萄无病毒母本树和苗木

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

葡萄无性繁殖材料 grapevine asexual propagation materials

用于嫁接繁殖葡萄苗木的接穗或扦插繁殖葡萄苗木的插条。

3.2

葡萄苗木 grapevine nursery stock

采用品种接穗和砧木嫁接繁育的葡萄嫁接苗，以及通过扦插、组织培养等方法繁育的葡萄自根苗。

3.3

葡萄组培苗 grapevine nursery stock from tissue culture

指利用葡萄外植体，在无菌和适宜的人工条件下，培育的完整植株。

3.4

指示植物 indicator plant

是指被某种或某类病毒侵染后，在适宜的环境条件下，能够表现典型症状的寄主植物。

3.5

酶联免疫吸附测定 enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

在固相支持物上(酶联板)包被病毒特异性抗体，加入待测样品后，再用酶标记的病毒抗体进行免疫识别，最后通过酶与底物的颜色反应检测病毒是否存在的一种血清学检测方法。

3.6

逆转录聚合酶链式反应 reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR)

利用逆转录酶将RNA逆转录为cDNA，再以此为模板并以耐热DNA聚合酶和一对引物(与待测目标核酸分子序列同源的DNA片段)通过高温(DNA分子变性)和低温(引物和目标核酸分子复性并被耐热DNA聚合酶延伸)交替循环扩增待测目标核酸分子的方法。

4 检测对象

4.1 葡萄扇叶病毒(Grapevine fanleaf virus, GFLV)

4.2 葡萄卷叶相关病毒1(Grapevine leafroll-associated virus 1, GLRaV-1)

4.3 葡萄卷叶相关病毒2(Grapevine leafroll-associated virus 2, GLRaV-2)