【农业标准】 动物源细菌抗菌药物敏感性测试技术规程 纸片扩散法

中华人民共和国农业行业标准

NY/T 4144—2022

动物源细菌抗菌药物敏感性测试技术规程 纸片扩散法

Technical code of practice of antimicrobial susceptibility tests for bacteria isolated from animals—Disk diffusion method

前 言

本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由农业农村部畜牧兽医局提出。

本文件由全国兽药残留与耐药性控制专家委员会归口。

本文件起草单位：中国动物卫生与流行病学中心、中国兽医药品监察所。

本文件主要起草人：王娟、赵琪、曲志娜、张纯萍、刘俊辉、黄秀梅、宋立、李月华、刘娜、张青青、张喜悦、高玉斌、崔明全、王君玮、王鹤佳、徐士新。

动物源细菌抗菌药物敏感性测试技术规程

纸片扩散法

1 范围

本文件规定了动物源细菌对抗菌药物敏感性测试纸片扩散法的操作步骤、结果判读、质量控制、记录及生物安全措施等技术要求。

本文件适用于采用纸片扩散法测定抗菌药物对动物源细菌的抑菌圈大小。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法

GB 19489 实验室 生物安全通用要求

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

菌落形成单位 colony forming unit, CFU

在琼脂平板上经过一定温度和时间培养后形成的每一个菌落。

4 试剂或材料

4.1 要求

除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682 规定的三级水，培养基按附录 A 配制或用商品化产品。

4.2 培养基制备

1. 4.2.1 阳离子调节 Mueller-Hinton 肉汤（CAMHB）：按照附录 A 中 A.1 的规定执行。
2. 4.2.2 营养琼脂(NA)：按照 A.2 的规定执行。
3. 4.2.3 MH 琼脂：按照 A.3 的规定执行。

4.3 质控菌株

1. 4.3.1 大肠埃希菌（ATCC 25922）：用作肠杆菌科、巴氏杆菌、放线杆菌的质控菌。
2. 4.3.2 粪肠球菌（ATCC 29212）：用作肠球菌属的质控菌。
3. 4.3.3 金黄色葡萄球菌（ATCC 29213）：用作葡萄球菌属、产气荚膜梭菌的质控菌。
4. 4.3.4 肺炎克雷伯菌（ATCC 700603）：用作克雷伯菌药敏试验的质控菌。
5. 4.3.5 肺炎链球菌 ATCC 49619：用作链球菌、巴氏杆菌的质控菌。

4.4 材料

1. 4.4.1 抗菌药物纸片。
2. 4.4.2 0.5 麦氏单位（McFarland）标准比浊液。

5 仪器设备

5.1 恒温培养箱、CO₂培养箱：(35±2)℃，(42±2)℃。