【农业标准】 饲料中貂、狐、貉源性成分的定性检测 灾时荧光PCR法

ICS 65.120 N Y

B 46

中华人民共和国农业行业标准

  NY/T 3475—2019

饲料中貂、狐、貉源性成分的定性检测
实时荧光PCR法

Identification of martes, fox and Nyctereutes procyonoides-
originated ingredients in feeds—Real time PCR method

2019-08-01 发布 2019-11-01 实施

中华人民共和国农业农村部  发 布

前 言

本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。

本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。

本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口。

本标准起草单位：山东省饲料质量检验所。

本标准主要起草人：冯鑫磊、李会荣、宫玲玲、李祥明、李俊玲、杨智国、朱良智。

饲料中貂、狐、貉源性成分的定性检测
实时荧光 PCR 法

1 范围

本标准规定了饲料中貂、狐和貉源性成分的实时荧光 PCR 法定性检测。

本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和动物源性饲料原料（动物油脂除外）中貂、狐和貉源性成分的定性检测。

本标准的检出限为 0.5%。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 14699.1 饲料采样

GB/T 20195 动物饲料试样的制备

GB/T 27403 实验室质量控制规范食品分子生物学检测

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

Ct值 循环阈值 cycle threshold

每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数。

4 缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid）

RNA：核糖核酸（ribonucleic acid）

dNTP：脱氧核苷三磷酸（deoxyribonucleoside triphosphate）

dATP：脱氧腺苷三磷酸（deoxyadenosine triphosphate）

dCTP：脱氧胞苷三磷酸（deoxycytidine triphosphate）

dGTP：脱氧鸟苷三磷酸（deoxyguanosine triphosphate）

dTTP：脱氧胸苷三磷酸（deoxythymidine triphosphate）

Tris：三(羟甲基)氨基甲烷[tris(hydroxymethyl)aminomethane]

CTAB：十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyltrimethyl ammonium bromide)

EDTA：乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid）

Taq：水生栖热菌(thermus aquaticus)

FAM: 羧基荧光素(carboxyfluorescein)

TAMRA: 羧基四甲基罗丹明(carboxy-tetramethyl-rhodamine)

ROX：6-羧基-X-罗丹明(6-carboxy-X-rhodamine)

BHQ2：black hole quencher 2

JOE: 2,7-二甲基-4,5-二氯-6-羧基荧光素 (6-carboxy-4',5'-dichloro-2',7'-dimethoxyfluorescein succinimidyl ester)