【医药标准】 微量青霉素试验方法

YY

中华人民共和国医药行业标准

YY/T 0251-1997

微量青霉素试验方法

Test methods of penicillin

国家医药管理局  发布

前言

本标准制定中，清场后环境、设备中残留微量青霉素的采样方法等效采用了日本工业协会GMP委员会编《防止交叉污染指南》，其他部分非等效采用了美国食品药品管理局的《食品及药品中的青霉素污染》和美国联邦法规的有关内容。

本标准起草单位：上海四药股份有限公司、华北制药股份有限公司、鲁抗医药股份有限公司。

本标准主要起草人：林少坚、李令梅、颜喜亚、麦加。

中华人民共和国医药行业标准

微量青霉素试验方法YY/T 0251—1997

Test methods of penicillin

1 范围

本标准规定了用微生物法测定微量青霉素的试验方法。

本标准适用于成品、清场后环境、设备及空气中微量青霉素的测定。最小检出量0.008 u/mL。

2 引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

中华人民共和国药典 1995 年版 二部

3 方法提要

利用抗生素的抗菌性质及在琼脂培养基内的扩散渗透作用，将被检物放入摊布高度敏感检定菌的培养基上，产生抑菌圈，根据抑菌圈直径判断青霉素污染，再根据标准曲线或数学公式计算出污染青霉素的量。

4 试剂和溶液

本试验所用试剂除特殊注明外均为分析纯，所用水均为蒸馏水。

1. 4.1 青霉素标准品。
2. 4.2 乙酸正戊酯。
3. 4.3 培养基Ⅰ：中华人民共和国药典 1995 年版二部（或培养基 I；美国药典 XXⅡ版）。
4. 4.4 营养琼脂培养基，中华人民共和国药典 1995 年版二部。
5. 4.5 10 g/L 磷酸盐缓冲液, pH=6.0

称取磷酸氢二钾 2 g 与磷酸二氢钾 8 g，加蒸馏水至 1 000 mL，滤过，在 115℃灭菌 30 min。

6. 4.6 100 g/L 磷酸盐缓冲液, pH=2.5

称取 100 g 磷酸二氢钾，溶于 800 mL 蒸馏水中，加 0.2 mL 浓盐酸，再加蒸馏水至 1 000 mL。用磷酸溶液[c(\frac{1}{3}H_3PO_4)=6 mol/L]调节 pH 值，使灭菌后 pH 为 2.2～2.5，备用。

7. 4.7 10 g/L 磷酸盐缓冲液, pH=2.5

将磷酸盐缓冲液(4.6)稀释 10 倍。

8. 4.8 青霉素酶溶液

用鲜肉汤将浓的青霉素酶溶液稀释到 1000 u/mL，37℃恒温培养 5 天，5℃以下冰箱保存备用。

9. 4.9 磷酸溶液:c(\frac{1}{3}H_3PO_4)=6 mol/L

取 85%磷酸 12.3 mL 加蒸馏水 17.7 mL。

10. 4.10 检定菌液

国家医药管理局 1997-06-09 批准1997-10-01 实施