【商检行业标准(SN)】 昏眩病诊断操作规程

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 1420—2004

昏眩病诊断操作规程
Protocol of diagnosis for whirling disease

2004-06-01 发布2004-12-01 实施

中华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局 发布

前言

本标准的附录A、附录C、附录D均为规范性附录，附录B为资料性附录。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国珠海出入境检验检疫局。

本标准主要起草人：吴小伦、蒋清如、黄建玲、赖子平、兰乃洪。

本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。

SN/T 1420—2004

昏眩病诊断操作规程

1 范围

本标准规定了昏眩病的诊断操作规程。

本标准适用于进出口鲑鳟鱼的昏眩病检验检疫。

2 材料

2.1 仪器设备

普通天平，分析天平，普通离心机，微型振荡器，水浴锅，振荡水溶装置，普通显微镜，血球计，pH试纸，研钵，解剖刀，镊子，烧杯，玻片，离心管，可调节液流等。

2.2 试剂

漂白粉，10%福尔马林，1%孔雀石绿，70%，80%，90%，95%，100%酒精，二甲苯，姬姆萨染色液（见附录A），胃蛋白酶液(0.5%)（见附录A），酪蛋白酶液(0.1%)（见附录A），0.1mol/L氢氧化钠，10%牛血清白蛋白，磷酸盐缓冲液(PBS)（见附录A），甲醇，丙酮。所有化学试剂均为分析纯。

3 昏眩病诊断

3.1 临床症状

病鱼作狂乱追逐运动，特别当喂食或被惊吓时症状加剧。在冷水条件下，旋转运动的临床表现通常发生在感染后2个～3个月，并可持续长达一年，2月前～8月龄的弱血，躯干后部和尾部呈黑色，昏眩病后期的病鱼鳃盖骨萎缩，鳃裸露在外，下颌呈畸形，脊椎弯曲，眼后头盖骨干重凹陷，这种鱼类约三年后仍带有病原体。

3.2 寄生虫检查

3.2.1 病原体形态

该病病原体为脑脊体虫（Myxozoma cerebralis）。脑脊体虫的孢子大小为(6.5μm～7μm)×(7.5μm～8μm)，微卵形，侧面观似小扁豆；有两个梨形极囊，孢质中有两个圆形的核块，一条无缝合管的明显可见的缝合线，无增痕部（参见附录B）。

3.2.2 采样

3.2.2.1 采样原则

选择有临床症状的鱼作寄生虫检查，若无症状，可根据鱼的数量随机抽样检查。

3.2.2.2 采样数量

对有症状的鱼取5尾～16尾作寄生虫检查，或对无症状鱼类则按表C.1进行抽查。

3.2.3 涂片检查

3.2.3.1 将头部纵切开，观察耳区软骨组织中有无孢囊（乳白色，直径为1mm～2mm）。

3.2.3.2 若有孢囊，取一小块孢囊放在载玻片上，压碎，用450倍～650倍显微镜检查，观察是否有脑脊体虫孢子。

3.2.3.3 如果没有发现孢囊，则从耳区将软骨组织切开，刮取内含物作涂片检查。左右耳区都应检查。

3.2.3.4 上述两项检查都未发现孢子，可按3.2.4检查。

3.2.4 薄片染色检查

3.2.4.1 将可疑鱼的头部剖下并纵切开，45℃水中孵育1min～3min，将松散的皮和脑移到一个废物容器。