【地方标准】 化妆品中斑蝥素含量测定 气相色谱法

DB37/T3312—2018
化妆品中斑螯素含量测定气相色谱法
发布日期：2018-06-12
实施日期：2018-07-12
发布单位：山东省质量技术监督局

前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东化工标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、山东福瑞达生物工程有限公司。
本标准主要起草人：刘爽、于燕萍、刘倩倩、康兆广、徐楠、刘莉、沈荣静、朱海荣、刘金风、王东岳、赵丽芳、周莉莉、张娟、杨素珍。

1 范围
本标准规定了化妆品中斑螯素含量的气相色谱测定方法，本标准适用于发用类化妆品中斑螯素含量测定方法。该方法取样量为2g时，检出限1mg/kg，定量限5mg/kg。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 原理
化妆品中的斑螯素用三氯甲烷萃取，用具有氢火焰离子化检测器的气相色谱仪测定，以保留时间定性，外标法定量。

4 试剂和材料
除另有说明外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
4.1 高纯氮（99.999%）。
4.2 高纯氢（99.999%）。
4.3 高纯空气（99.999%）。
4.4 三氯甲烷。
4.5 氯化钠：分析纯。
4.6 斑螯素标准品，纯度≥94.0%。
4.7 斑螯素标准储备溶液［c = 1g/L]：称取斑螯素标准品0.1g（精确至0.0001g）置于100mL容量瓶中，三氯甲烷定容至刻度，储存于玻璃瓶中。

5 仪器和设备
5.1 气相色谱仪：具氢火焰离子化检测器的气相色谱仪。
5.2 分析天平：感量0.0001g。

6 分析步骤
6.1 样品预处理
6.1.1 液体样品
精确称取2g（精确到0.0001g）样品于试管中，氮吹至近干，用5mL水溶解，并转移至25mL分液漏斗中，加入0.5g氯化钠溶解，取2mL三氯甲烷分两次润洗盛有样品的试管后加入到分液漏斗中，震荡30s后静置分层，取下层有机相，定容至2mL，经0.45μm有机滤膜过滤后，滤液待测。
6.1.2 乳状样品
精确称取2g（精确到0.0001g）样品于25mL烧杯中，用5mL水溶解，并转移至25mL分液漏斗中，加入0.5g氯化钠溶解，取2mL三氯甲烷先润洗盛有样品的烧杯后加入到分液漏斗中，震荡30s后静置分层，取下层有机相，定容至2mL，经0.45μm有机滤膜过滤后，滤液待测。

6.2 色谱参考条件
6.2.1 色谱柱：HP-5毛细管色谱柱（30mm × 320μm × 0.25μm），固定相为（5%-苯基）-甲基聚硅氧烷。或具有相同分离效果的其它色谱柱均可。
6.2.2 进样口温度：230℃，不分流。
6.2.3 检测器温度：300℃。
6.2.4 柱温（程序升温）：初始温度100℃，保持1min，以35℃/min升到160℃，保持1min，以5℃/min升到200℃，保持1min，以35℃/min升到280℃，保持2min。
6.2.5 气体流量：载气(N2)：1.5mL/min；空气：300mL/min；氢气：30mL/min。
6.2.6 进样量：1μL。

6.3 标准曲线的绘制
将1g/L的斑螯素标准储备液（4.7）梯度稀释一系列浓度为5.00mg/L、10.00mg/L、50.0mg/L、100mg/L、200mg/L的标准工作溶液。按色谱条件（6.2）由低到高依次进样测定，以色谱峰峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。标准物质色谱图参见附录A。

6.4 试样测定
取预处理后的待测液（6.1），按照色谱条件（6.2）进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积。由色谱峰的峰面积可从标准曲线上求出斑螯素的浓度。样品溶液中斑螯素的响应值均应在仪器测定的线性范围之内，斑螯素含量高的试样可取适量待测液（6.1）用三氯甲烷稀释后进行测定。同时进行空白试验及平行试验。

6.5 分析结果表述
斑螯素的含量按式（1）计算，计算结果应扣除空白值：
c = (C - C₀) × V / m
式中：
c — 样品中斑螯素的质量浓度，单位为毫克每千克（mg/kg）；
C — 标准曲线查得样品中斑螯素的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；
C₀ — 标准曲线查得空白中斑螯素的浓度。