【行业标准】 商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类 方法二

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T4532.2—2016
商品化试剂盒检测方法
B-内酰胺类
方法二
Commercial kitmethod-
Beta-lactamsTest method I
2016-06-28发布
别涂保查真饰
中华人民共和国
家质量监督检验检疫总局
2017-02-01实施
本部分为SN/T4532《商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类》的第2部分。本部分按照GB/T11—2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口SN/T4532.2—2016
本部分主要起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局、深圳市易瑞生物技术有限公司、深圳市检验检疫科学研究院、合肥工业大学、内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司、江苏农牧科技职业学院。
本部分主要起草人：薛峰、肖锋、陈沛金、刘莉、陈伟、朱海、蒋原、蔡宝亮、李梅、曾德新、余超挺。I
1范围
商品化试剂盒检测方法
β-内酰胺类方法二
SN/T4532.2—2016
SN/T4532的本部分规定了纯牛奶中3-内酰胺类、三聚氰胺和四环素类残留量的胶体金免疫层析检测方法。
本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对纯牛奶中β内酰胺类（含头孢氨竿）、三聚氰胺和四环素类残留筛选检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注口期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理
应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中残留的待测物与检测线上的待测物抗原共同竞争胶体金标记的特异性抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物的含量定性判定4试剂与材料
4.1β-内酰胺类（含头孢氨苄）、三聚氰胺和四环素类四联检测试剂盒本试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。
商品化试纸条、反应杯及反应试剂在2℃～8℃、干爆、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。试剂盒组成如下：
a）β-内酰胺类（含头孢氨芋）、三聚氰胺和四环素类四联检测试纸条；b）微孔试剂（胶体金标记的β-内酰胺类抗体、主要成分为胶体金标记的三聚氰胺抗体，胶体金标记的头孢氨芋抗体和胶体金标记的四环素类抗体）。4.2试剂
三聚氰胺、β-内酰胺类和四环素类对照品5仪器设备
5.1温育器：40℃±2℃。
5.2移液器：200L。
SN/T4532.2—2016
6样品制备
检测前样品需充分混匀。
分析步骤
7.1将温育器温度设定为40℃，吸取200uL样品于微孔中，5~10次抽吸，迅速混合均匀并置于温育器中温育3min。
7.2温育结束后，将试纸条插人到微孔中温育9min。7.3温育结束，停止计时，从微孔中取出测试条，去掉测试条下端的吸水海绵并进行结果判定。7.4检验完毕，余下的测试条放回铝箱袋中并密封好，放到试剂盒中，2℃~8℃保存。结果判定
通过对比控制带和检测带的颜色深浅来进行结果判定。由于长时间放置会引起检测带颜色的变化，需在5min内进行结果判定
目视结果判定依据（如图1所示）：a）无效：控制线（C线）不
阴性：检测线（T线）颜色比控制线（C线）颜色深或者强。b
弱阳性：检测线（T线）颜色与控制线（C线）颜色相当。d)
阳性：检测线（T线）不显色，或检测线（T控制线
四环素类检测线
头形氨卡检测线
8-内酰胺类检测线
三聚氰胺检测线
空白试纸
9方法性能指标
9.1检出限
线）颜色与控制线（C线）颜色浅或者弱：弱阳性四环素类头孢氨芋β-内酰胺类阳性
目视判定示意图
三象氰胺阳性
三聚氰胺：150μg/kg；青霉素G：3ug/kg：氨笨西林：4μg/kg：阿莫西林：4ug/kg：氯唑西林：8μg/kg；苯唑西林：10μg/kg；头孢噻呋：100μg/kg：茶夫西林：25μg/kg：双氯西林：15ug/kg：头孢匹2
SN/T4532.2—2016
林：12μg/kg：头孢唑林：60ug/kg；头孢哌酮：4ug/kg：头孢乙：30μg/kg：头孢喹：20μg/kg；头孢氨芋：40μg/kg；四环素：70μg/kg；土霉素：60μg/kg；金霉素：60μg/kg：强力霉素：60uμg/kg。9.2
特异性
当浓度≤100mg/kg时，氨基糖苷类、大环内酯类、磺胺类、唑诺酮类和氯素均无交叉反应。SN/T4532.2—2016
附录A
（资料性附录）
牛乳中（三聚氰胺+β-内酰胺类+头孢氨芒+四环素类）四联快速检测试纸条评价结果1）A.1
检出限bzxz.net
三聚氙胺：150μg/kg；青霉素G：3ug/kg：氨芋西林：4ug/kg阿莫西林：4ug/kg；氯唑西林：8μg/kg，苯唑西林：10ug/kg：头孢噻呋：100μg/kg；茶夫西林：25μg/kg：双氯西林：15g/kg：头孢匹林：12ug/kg：头孢唑林：60ug/kg；头孢哌酮：4ug/kg：头孢乙腈：30μg/kg；头孢唑肪：20ug/kg：头孢氨卡：40pg/kg；四环素：70ug/kg，土霉素：60ug/kg：金霉素：60uμg/kg：强力霉素：60ug/kg。2特异性
当浓度100mg/kg时，氨基糖苷类、大环内酯类、磺胺类、唑诺酮类和氯霉素均无交义反应。1）本试剂盒评价结果仅适用于深圳市易瑞牛物技术有限公司生产的牛乳中3内酰胺类快速检测试纸条。
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