【国家标准(GB)】 化妆品中螺内酯、过氧苯甲酰和维甲酸的测定 高效液相色谱法

ICS 71. I00. 70
中华人民共和国国家标准
GB/T24800.3—2009
化妆品中螺内酯、
过氧苯甲酰和维甲酸的测定
高效液相色谱法
Determinationof spironolacton，benzoyl peroxide and tretinoin in cosmetics byhigh performance Jiquid chromatography method2009-11-30 发布
资料专用章
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
数码防伪
2010-05-01实施
本标泄的附录A为资料性附录
本标准由中国轻工业联合会提出。前
本标准山全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257)归口。GB/T 24800.3—-2009
本标准负贡起草单位：中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学1业研充所，上海香料研究所。本标准主要起草人：王虽、武婷、马强、张庆、肖海清、沈敏、康薇。I
http：//foodmate.netGB/T 24800.3—2009
本标准中的被测物质螺内酯、维酸是国化妆品卫生规范规定的禁用物质，不得作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中。如果技术上无法避免禁用物质作为杂质情人化妆品时，则化妆品成品应符合《化妆品卫生规范》对化妆品的般要求，即在正常及合理的，可预见的使用条件下，不得对人休健康产生危害，
口前我国尚未规定这些物质的限量值，本标推的制定，仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法。CHINA
体伴网
1范围
化妆品中螺内
过氧苯甲酰和维甲酸的测定
高效液相色谱法
本标准规定了化妆品中螺内酯，过氧苯甲既和维甲酸的测定方法。木标推适用-下皮肤护理类化妆品中螺内配、过氧苯甲醚和维甲酸的测定。GH/T 24800.3-2009
本标准对于爆内酷过氧来甲醚的检出限均为2. 5 mg/kg,定量限均为5 mg/kg;维甲酸的检出限为1mg/kg，定量限为2g/kg，
2原理
以甲醇为溶剂超声提取、离心，0.45m的有机滤膜过滤，溶液注配有二极管阵列检测器（DAD)的液相色谱仪检测，外标法定量：3试剂和材料
除另有规武剂均为分析纯。
3.1甲色
2.2腰内酯0小于 97%；过氧苯甲醛，纯度不小平97%维甲酸，纯度不小于99.9%。3.3内酯标准储备液：准确取螺内酯0.1g，精确到0.0001器，于50ml.烧杯中，加适量甲薄溶解贝瓶中，用甲醇定容至刻度，即得螺内酯溶液浓度为1000mg/1的标准储备液，冰后稳人100mL
箱冷藏保存。
3.4过氧茉甲酷标备液：准确称取过氧苯甲酰0.1g，精确到0.0001g，于0mL烧杯中，加适量中醇溶解后移人10空最瓶中，用甲醇定容度，即得过氧苯甲酰容液液度为1000mg/L的标准储备液：
注：由于过氧苯中酰水易分部，每次使用时需现用现配。3.5继中酸标准储备液：准确称取维中酸0.1g，精确到0.0001g，于50InL烧杯中，加适品甲醇游解后移人100ml.容量瓶中，用印醇定容至刻度，即得维甲酸落液浓度为1000mR/1.的标准储备液。冰箱避光冷藏保存。
证：中于继甲酸对光1分数感，见光容易分解变质，操作应在谢光条件下进行，3.6标准混合溶蔽：分别移取10 mL的上述=种标准储备液（3.3,3.4、3.5)至100 TmL容量瓶中,用甲醇定容至刻度，即得-种物质均为100Ⅱg/L的混合标难储备。3.7标准工作溶液:用甲醇将上述标准混合溶液(3. 6)分别配成一系列浓度 1. 0 mg/L、2. 0 mg/L、5.0 mg/L、10mg/L、20mg/1.,50mg/I.,100mg/1..200 mg/I.的标准工作溶液，现用现配3.80.1mal/1.的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠0.4 g,精确到0.001g,于50mL烧杯中，加水溶解后转移至100 inL容量瓶中，加水定容至刻度，即得0.1rnl/的氢氧化钠溶液。3. 90.025 I1ol/L 磷酸二氧钠溶液（pH6. 5):称取磷酸二氢钠（NaH,P(),·2H,0)3. 9 名,精确至0.00l，了50 mL烧杯中，加水溶解，移人1000 mL容瓶中：用水定容至刻度，混匀，即得到0.025 mol/L的磷酸二氢钠溶液。用0,1mo1/L氢氧化钠溶液(3.8)调节pH值至 6.5。http
GB/T 24800.3—2009
4仪器
4.1液相色谱仪，配有一极管阵列检测器。4.2微量进样器.10μI
4.3超声波清洗器。
4.4离心机，大于5000z/min。
4.5落剂过滤器和0.45um有机过滤膜，4. 6 具塞比色管,10 ml.。
5测定步骤
5.1样品处理
称取化妆品试样约0.2g，精确到0.001名，于10mL具塞比色管牛，加入8mL甲醇，在超声波清洗器中超声振荡20min，冷却后用甲醇释至刻度，混勾。取部分资液放人离心管中，在离心机上干5 C00 r/ min 离心 20 inin,离心后的上清液经 0. 45 μm 有机滤膜过滤,滤液待测定用。5.2测定
5.2.1色谱条件
5.2. 1. 1色谱柱:Kratnasil C柱(250 mm×4. 6 mm 内径,5 μm);5.2.1.2流动相：A：甲醇，13:0.025mol/1.磷酸-氢钠溶液pH6.5)(3.9)，梯度洗脱条件见表1。表1方法的梯度洗脱条件
时间/min
5.2.1.3流速：1.0ml./mmin；
5. 2. 1. 4柱温:25
5.2.1,5检测波k：0~5.50min240nm,9.51min~13min，335nm5.2.1.6进样量：10μL
5.2.2标准工作曲线绘制
分别移取系列浓度为 1 mg/L,2 mg/L.5 mg/L,10 mg/L,20 mg/L,50 mg/L、100 mg/1..200m/L的混含标准丁作溶液，按色谱条件（5.2.1)进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标工作曲线。标准物质色谱图参见附录 A的图 A. 1 5.2.3试样測定
用微鼠注射器雅确吸取试样溶液（5.1)注人液相色谱仪，按色谱条件（5.2.1)进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，山色谱峰的峰面积可从标推曲绒上求出相应的被测物浓度。样品溶液中的被测物的响应值均应在仪器测定的线性范围之内。被测物含量高的试样可取适量试样溶用流动相稀释后进行测定。
5. 2. 4定性确认
液相色谱仪对样品进行定性测定，进行样品测定时，如果检出螺内酯、过氧苯甲酰或维中的色谱峰的保留时间与标准品相一致，非且在扣除背景后的样品色谱图中，该物质的紫外吸收图谱与标准品的紫外吸收图谱相一致，则可初步判断样品中存在螺内酯、过氧苯甲酰或维甲酸。必要时，阳性样品需用2
合品伙伴网
其他方法进行确认或验。
5.3平行试验
按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。5.4空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤进行。6结果计算此内容来自标准下载网
结果按式（1)计算（计算结果应抑除空白值）：X, =. V
式中：
样品中被测物质的质量浓度，单位为慈克每于克（ms/kg）；标准曲线查得被测物质的浓度，单位为毫克每升（mg/L)；样品稀释后的总体积，单位为笔升（mL）：样品质量，单位为克（g)。
7方法检出限与定量限
GB/T 24800.3—2009
竭内，过氧苯中玩的检出限均为2.5mg/kg·定量限均为5mg/kg；维甲酸的检出限为1mg/kg，定量限为2. 5 rmg/kg。
8回收率与精密度
在添加浓度5 mg/kg~50 rng/kg浓度范固内，回收率在83%～110%之间：相对标准偏差小于10%。
9充许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。khttn
.fnnnma:
GB/T24800.3—2009
螺醋（4.02m)：
过氧苯甲酰(7.587 min);
3 —维甲酸(10. 871 min)。
GB/T24800.3-2009
附录A
（资料性附录）
标准物质的液相色谱图
螺内酯、过氧苯甲和维甲酸的标准波相色谱图扫印用期：2010年2月2HF007
http：//wwwfoodmate.net12
版权专有假权必究
号：155066：1-39671
定价：
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。