【商检行业标准(SN)】 草莓滑刃线虫检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2338—2009
草莓滑刃线虫检疫鉴定方法
Quaranlinc idenlificalion of Aphetenchoides fragariae(Ritzema Bos)Christi
2009-07-07发布
中华人民和国
国家质量监督检验检疫总局
2010-01-16实施
http：//foodmate.net前言
本标的附录)为规范性除录:附录A、附录B和录（为资料性除录本标准由耳家认证认可蓝咨管川委员会提出并灯口SX/T 2338—2009
本标准起草单位为中华大民共和国珠游出人境检验检疫和珠游市质量计量监肾检测所本标滩主要起草人：陈上文、张卫东、廖力菊立琴、东海洋、徐森锋张衰军.刘刃、彭本标征案片次发布的山人境检验检疫行业标准。http://foodmate.net1范围
草莓滑刃线虫检疫鉴定方法
本标规定「草萨滑列线止检疫和鉴定方法SN/T2338—2009
本标雅适用下逊山境花.苗木、景及草萨、甘橘滑册等丝济性物中草荐滑刃线虫的检疫鉴烂2规范性引用文件
下列文件中的条鼠通过不标淮的引用而成为本标淮的条款：凡是注Ⅱ期的与用文件，其随后所有的修收单（不包助误的内穿)或修订版均不适而丁不标·然而，技励根据本标准达成孙设的各方研究是否可议而这些义件的最新版本，凡是注Ⅱ期的引而文件，最新叛本适于不你准SN/T157进山镜直渐苗不签疫规程SN/TI!进山竞值物盆景签疫规程3符号和缩略语
1.=体长；
a=体长/最人体宽；
h一体长/体前端牟食道与肠在接处的归离：c一体长尾长:
St一几针长度:
V=体前端至阴门处距离×1C0/体长;=法筑腔1至精集小端的离×100，休长；tail=尼长：
spicule=交个射长度。
4原理
中文名称：卓荷滑刃线虫
学t:A phelerfhuide fragrrarRitzunx Bos. IRgnlixli,ls2分类地位：线形动物［（Nealle）侧尾腺纲（Sece-ntntea）（Apleleielida）消科（Aphslenehaididae滑属（Aphetenchoides卢莓浩刃裁虫足，孙芽亚奇牛线虫，亡要危害捐劾地」部奇的腋芽嫩引和托让，被侵染的表既为生长不良，发生蟋化和畸，导致效弱叫释.顶芽调枯：开花减少-虽及品质降低。草萨滑划线少、主依草节茨苗木、接穗等儿性繁殖材料传烯扩散。H雌雕业的形态学终征足制定该检疫鉴定方法的正安依据·传搭途径.省正范伟地理分布(参见谢录A)和牛哟学持征是鉴定的铺助依求5器和用具
5.1仪器
生物显微镜（1O)倍～1C其)倍）休视显薇镜（IC倍以上·只透射光源）凸热恒温箱、球销，5.2用具
钟血暗荠血、盖玻片、载坡汁、引坡片、坡离纤维丝、点管、烯杯、小锻子、剪刀、拙钾、浅敲、打孔翠、挡修管、酒精灯，燥辈、德纸战纱布、循斗、循斗梨乳较管、止求爽邮然板分样烯目、自。1
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6试剂
乙指H蜡、是液（福尔马林：「蒸僧水一：中醛、乳（苯2ml乳酸2l口油1Cml.蒸馏水2ml.深合）7现场检疫
对单莓.朴横.否茄、化卉.曲不、益景等学叶部分进行检售·重点选取矮化.矮输和崎彤等症状的术：如儿可鼠症状划摄要求随机取样取接后而苦密划望料袋·标记片授时送实验案检测点休神样比例按 ST1157 和 SN/T1158 执行，8实验室检验
线虫分离
用浅益分离惑蒲斗奇离玉(参附录)8.2体视显微镜镜检
分离蕊得的水栏在10俯以「休视品微镜检查：初步观察线虫的态径。8.3标本制作
挑出若下分离划的线业体丁裁岐片上制竹临时玻片或水久坡片（参见附录（）8.4生物显微镜观察、摄影和测量市印对雌、雄士要鉴定特征仔纠规繁显报影.重点包活整体形态、头区轮廓，口印、侧毁、尾部态、H生殖系统及就虫交合则等，并在每张图片小阳应标尺测量并计管、心和V等值。9形态鉴定特征
9.1滑刃线虫属形态鉴定特征
虫休长中等到长：热杀死片·删虫休直到腹弯、雄电逆常尾部问而弯成落整个虫休“”形;侧线通准1条，偶尔2或3条;头部咯缢缩，头架骨化弱：口什较细·有基部球或基部膨人·口计长度追常为10μm~12μm.一般不超过2)m:食道前体部圆托形.中食道球发这能应形或方圆形，中食道球瓣发达,后食道腺叶发达、覆盖场的背亚：排汁孔位「巾食道球活水平处：任士阴门位」虫体十后部：般位于怀长的紫～-7;单牛腺、前伸，片阴了实萎适常存在并学含有喆了，倪尔后阴了官森：屁品园圆铠形，屁端形态多样：纯圆惑细圆·后状或众文或分1个暖宽：有或无尾美，鼠突形态多推，或止呢里圆锥形、胶印弯成钩状：交个划里救现划形·基质和基喙迫常发达：有时缺；3对尼孚窦·H中】对位丁泄殖惊区】对位丁近木端，1对位丁这两名之问：后交个伞9.2草莓滑刃线虫形态鉴定特征
9.2.1草莓滑刃线虫测计值
荐滑州线虫测许见表1
表 1 草莓滑刃线虫测计值
A30--S0
480--0
15--60
1 --63
注：以「.测主数据米自 Shahina，r，9.2.2草莓滑刃线虫形态鉴定特征12~23
16~-15
交合刺长度l
节荐消州线小形态整定象社见附录+小体长度中等创长（！mm，璀少体形较细·热茶死后虫休到弯：头部亮，光滑·前端平,连续或咯丝缩；口什纤·长111m·有小而显的基部2
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球;侧区足一条窄带，侧线2条;排江孔位丁神经环或紧节！后水平处;队门横裂·阴门厝咯密起，斯母细贮单行排列受精粪长虾厕形.后子宫裳超过肛阿的，分之，层子宫粪有精子：尾长网形：未端铠尖，无尼尖突。就虫普遗，体形儿本类似雌虫:热系死后、尾部弯成！单精裳、前仲：精丹细胞单行新列鼠端1个钉刺+分3对嘎业中尾宇窝：无交合伞，交合攻璨刺形，有等发达的基项和基其嗽，背迹长1m~-17
9.2.3草莓滑刃线虫与近似种的区别草荐滑线业与泻属的H他种茅线毁茨滑刃线（A.asthrs）水稻」尖线（A.bessei)和菊花泄刃线虫（A.ritenitsi)形态极为动拟，主要区别见表2表2草莓滑刃线虫与近似种线虫主要形态区别形态涛希
犀尖突
阿子营类长度
交合刺圳尖
交合制像定
10结果判定
人一创距的二分之
有，等
般求汗线
别的二分之
有·茂达
水蹈下尖
原状··个个刺突
小二阿距的二分之
有．等
符合.2.1测计值以及9.2.2影态鉴定特征的.叫判定为学缺沾刃绒书。11样品保存
我花滑线业
刷状？个～个微刺
天丁正以距的二分之
君判定为节蒋消划线小·则将剩余的线少死、固定制成求久玻片俱孕·并标上牢品编号、制牛时间和制作人等。
对己鉴山苦有草萨滑刃线虫的物材料,识行在！及「惧、防鼠防虫处,样品需至少课存个川，以备复验、谈判和仲裁。S
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A.1寄主
附录A
(资料性附录）
草莓滑刃线虫的寄主与分布
草荐滑线虫的寄主范极广.已有17个科259念种杭物.蕨物109余种。草苛足H典型正。沙及经济价值较高的科有：白合科,报吞花科、毛良科.菊科、石蒜科不本科，鸢尾多、愉科、豆科，小龙竹科、花葱科、不屏科、苯科和普微科等。A.2分布
德国、奥地利、英国、法耳、四班牙、葡对牙、意大利、建虫、识小利业、阿案洋鼎、比利时、立剐苑、白俄罗其、川友、匈牙利、拉脱维业、瑞典，罗马尼亚、挪藏、爱尔兰、希，澳大利业、新西兰、俄罗其、日本，圳会大和关国等
http://foodmate.netB.1漏斗法
附录B
（资料性附录）
草莓滑刃线虫的分离法
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将 10 em-~15 et 直径的漏斗周在支架1（图 B. 1:柄端接-最孚胶管,管的近小端用山水史紧。将分离的样品先剪成小块-用级有包好-放人溺斗,划水没。在线业反的趋水性和革呈作用下，线虫不幽脱离植物红织.穿过纱布迁游到水中,最后江降到漏斗木端的乳胶管下端水中：2h后小心地打开乳皎节未的止水火.用小止楼收约E正I.的个有綫上的水栏，放在体视显微镜下逆行观察：用此法分离线卫时室内温度最刘晏保持在2气~28.温度太高或太低均会影响草荐滑划线业的分肉效呆、
蒲斗：
川影布包森的样品：
乳度丝；
次来，
图 B.1Raerman漏斗装置
B.2浅盘分离法
浅盘分离法装置(图H)山两只不诱匈浅肆、缓土滤纸成纱布组成,两只浚黏叫套放，「肆底面为大」目的粗筛网下益为止常浚在。分离线士时将线士恶纸平放在「盘的网:用水淋湿，将分离的已剪成小块的样品微销在其[套进下盘内：从两只浅在的火缝中注水.以添没供分离的样品为它:在20℃2×℃:下放置21h后：线虫渐激其到下盘的水中:用绕校收集浅肆中求：并将烯杯中的水连续逆划1目和）目的筛网：将目标准筛「的含线士的然商物冲跳到络养血中镜检，1
图B.2浅盘分离装置下载标准就来标准下载网
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附录（
（资料性附录）
线虫玻片标本制作方法
C.1线虫杀死：在体视品微镜下用线出排针挑取少量线出放至叫玻片「的水湾中·使线信水滴火，于持凹坡片在酒精灯火焰上来叫5~.使线亚恰好被杀外为止杀外大的綫山，将线虫悬浮铱效在试节中加等虽的沸水杀外綫山。C.2线虫周定;少量线虫被杀死后·可出线虫挑针将线由移至『周定液巾定。人量的线虫被杀死片：在线虫基浮液中加等量浓度双俯的窄液即司C.3临时坡片你本的制竹·以G液作为浮载剂，滴延丁裁岐片上.用挑计将固定好的线虫移数条丁浮载剂中.并儿完全沉下.浮载剂边缘均习放3mm~n㎡长，H径与线』体宽相近的玻璃纤维丝根;加盖坡片用滤纸暇去溢仙的浮载剂用者甲汕文片;待著H洲」后长灿挝·茨，叫保几天至数周，
c4水久玻片本的制作
C4.1脱水：采用乳油恢这说水法把湾有乳骑泊的叫玻升放在加热拨1归热65~-7）℃将已定「以上的线排人热的乳油中，继续加然min~㎡in店在体谢亚微镜下观察标个足否清晰，若不够清晰绿在65：~~7℃的加热极上加热片刻牟清晰（注意证免加热过度而损坏标本）然片放在十焕辩中12:-~21;进步去除水分片即叫制片C.4.2制：将直径1.5c\的打孔器在沉精灯火炼「热后·捕到蜡盘巾蕉取少量右泻·并扫速轻按丁载坡中史，得冷却后即形感一个马。在蜡圜内湾一小滴乳酚油(用品以兰上盖陂片后不外为上忙为浮载剂，将已脱水的线』数涤挑人中·排列整齐，并化！完全沉下，将与线休宽相近的3根1~mm的玻离纤维丝均与置下浮载剂边缘：盖玻片后：将载坡片够至，：70的小热板1熔店;待蜡熔化后够至实验台「冷例用指甲洲京片·待指H洲」后卡章-次。最后贴「标签,左边的标器写明植品号、奇、裁获口产地、制作期;右历的标签马线虫名、线出虫态及无数量：6
http：//foodmate.netR
惟虫头部
辉业头部：
附录D
(规范性附录）
草莓滑刃线虫形态特征图
A.3.1..[.L
乐部；
崔山侧区：
谦虫学：
醛乐应部：
交台判，
图D.1草莓滑刃线虫（A.fragariae)特征图（A.B,E-L.仿Siddiqi,1975.C.D.仿RitzemaBos:1893.1891)S.V/T2338—2009
http：/
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SN/T 2338-2009
十华人民共和国出人境检验检装行业标淮
草莓滑刃线虫检疫鉴定方法
SN/7 2335-20C9
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北京兴门外三里河社16
邮改编码：103625
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电话：6852891688517518
中国标出版社岸岛刷）印
开/31
印张 C,7:
学整字
2809 :1小第版
2:091：小第次E刷
印数21:0:1
书号：1:5066：21592]
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