【商检行业标准(SN)】 棉花根腐病菌检疫鉴定方法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1356—2004
棉花根腐病菌检疫鉴定方法
Methods for quarantine and identification of Ph ymatortichopsisamnivorum(Duggar)Hennebert
2004-06-01发布
华人民共和国
国家质量监督检验检疫总局
2004-12-01实施
本标准的附录八为规范性附录,附录B.附录（、附录1)为资料性附录本标滩出国家认证认可监督管理委员会提出并H口。本标准起草单位：中华人民其和国山东出入境检验检疫局。本标准十要起草人：陈长法、邵秀玲、封平、魏晓棠本标准系首次发布的检验检疫行业标准。SN/T1356—2004
SN/T 1356—2034
棕花根度病义称得克萨斯根腐病,是棉花及多种植物「的發灭性病害之一，而前我国尚木发生（参见际录C)。H致病菌为多主拟瘤模孢「Phymatotrichopsisomniuorum(Duggar)Ienncrhcrt是我国对外植物检疫一类危险生在马生物。病原菌寄主范围极（参见附录I)），侵染2300多种植物，使殖物枯萎、叶脱落以至死，但损失较大的为梯花、苔猎、核果类果树和林荫树等；受病植物病部…牛大量幽核，菌核在十壤内至心存活5年,最长可达12年:病原菌可十传、病根传播。棉花根度病是棉花「的种毁灭性病害.减产可达15%以「，棉花是事关我国计民牛的十要丝济作物之，防止该病菌传人我，对保护我再棉花产业的发展：有年要的意义在标的制定过程,吸妆了国弥最新研究成果，结合对病原的生物学特性,形态学特性等迟行深人饼究的基础上，确定广检疫检测和鉴定榨花根腐病菌的各琐技术要求：1范围
棉花根腐病菌检疫鉴定方法
本标雅规定广逊境植物检疫户榈花根腐端菌检疫和鉴方法SN/T 1356—2004
本标适棉花根脑病菌[Phymatotrichopsisomniuarum(Duggar)Henachert]的寄主及土囊牛榈花根腐病菌的检疫和鉴延。
2定义和术语
下列术语和楚义适用本标谁，
多主拟瘤梗孢Phynatotrichapsis onunivurum(Duggar)Henneherf一并病源真菌·是寄生十双子叶消场（尤其是绵花）1凶重要的病原菌之一2.2
菌丝hyphae
在经过修的N0.了培茶基1：-菌丝疏松，白色，呈直角支·侧生菌丝显十字形分楼，存楼顺端头状如针（参见附件B）、分支的菌丝常交织在起成菌丝束，初无色，成熟后早肉柱色。2.3
分生孢子梗conidiuphures
从菌丝的人细胞「产牛，球形或椭回形，人小(12~20)m×（20~-30)μI2.4
分生孢子conidia
产兰在分生泡子梗，多为球形、直径为28μm~5.5μrm:惆圆形孢子大小为（5~6) μrm(6~8)um，单孢，元色。
菌核sclerotia
初由色的菌丝紧密交织而成，月成链状，随芒间的推移逐渐变成褐垒至深褐色。成熟的菌核具有一个山游辜细孢组成的中心髓部，外边为山序组胞组成的序皮层，人小为二mm～2 mm圆形或不规形，单生或串生。
3原理
棉花根魔病菌隶属于真菊界（Kingdom Fung:），半知菌门（Deuteroriycota）、丝孢纳（Hyploriyce-les）丝抱（Mcxliliaes）淡色孢密（Momiliaceae），拟癌慢孢属（Phmatatrichopsis），奇兰梢物范圆广泛，是危害双子叶殖物，具是梯花的种教灭性病菌。病菌以齿核或以瘀綫形式存在丁上壤中，或以菌丝形或存在二植物户，倍助人为力量进行远距离传插、或借勘风.水等途径进行近距离传播：病菌作合适的条件下生长，侵染棉花的根部，造成根部腐烂，致使植棕供水不是，在棉花现常时突然死亡。该病在寄士植物」的危害状、在选择性培养苯「的菌落及菌丝的形态特征，是鉴定该病菌的二要依据。
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4仪器及用具
4.1趋净二作台。
4.2高灭菌锅。
4.3光照恒温培养箱：
生物鼎徽镜（带照栢系统)，
4.5度让，
4.6电了天（千分之-)。
4.7冰箱
4.8白磁盐和尖头镊了。
4.9其岱:培养正、试管、烧杯、三角锥瓶、筒等。5试剂药品)与菌株
5.1修改哟No.7C培养基（见附录A）5.2 70%Z醇。
注：除卡另有规定·以上药品的纯度均为分析纯5.3其常规试剂。
5.4菌株:样品菌株及其干制培养物保存在川[东出人境检验检疫局。6现场检疫
6.1土壤
对经过中批同意进境的十坡，需进行严格检疫，经筛选发现菌核或植殊残位，成及时送实验室检验鉴定。
6.2苗木
检查植株的根部,挑收有病变的根部送实验检验鉴定。7实验室检验
7.1土壤
对十壤要严格检验，挑出携带的菌核和植我体，诈作十壤带虚分离，7.1.1菌核
检出的大小在1imrn~-2=nrm之间的菌该,在无菊条件下，经70%的乙醇表面消毒，切并挑取部分：培养于经过修改的N0.70的培养苯宁.28℃下，培养，观察菌丝的形态特征。7.1.2挑取土壤中植物残体
对挑取的物病残休，尤其是根部病残体，在无菌条件下，切取病变组织、经70另的乙醇表面消毒，培养下经过修改剂入70的培养基，28下，培养，观察菌丝利*孢结构的形念特征。7.2苗木　
在无基条件下，划取根部病变组织，经必的乙醇太面消毒和无菌水冲洗，培养丁经过修攻的N70的培养基中，28℃下落养，观察菌丝利产孢结构的形态特征。8鉴定特征
8.1菌落特征
棕花根度病菌在经过修改的No.70 的培养基F，菌落疏松,白色,生长哟勾,菌丝常交织在一起成菌丝束，成熟后胶肉柱色
8.2菌丝形态特征
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在经过修改的NVo.70培举基上，菌丝疏松，白色，菌丝至直角分文，侧生菌丝呈十字形分枝，分枝顶端尖状如针状。
8.3分生孢子梗
从菌丝的大细胞产生，球形或椭圆形，大小(12~20)mX（20~30)μ。8.4分生孢子
产兰在分生跑子梗.1，多为球形，直径为4.8nr~-5.5m圆形他子大小为（5~6)mX(6~-8)mm
8.5菌核
初由色的菌丝紧密交织而成,且成链状，随着时间的推移逐渐变成松色至深松色。成熟的菌核其有一个由薄壁细弛组成的中心跪部,外边为由序壁组胞组成的厚皮层，人小为m～2 mm,圆形至不规则形。
9结果评定
9.未发现棉花根腐病菌
经培养发现所分离的真菌不符合棉花根离病菌的形态特征，可判定该菌不是棉花振腐病菌9.2发现棉花根腐病菌
经培养发现所分离的真菊符合模花根腐病菌的形态特征时判定该菌为棉花根病菌10标本和样品保存
发现棉花根腐病菌，要进行纯化，制作标本，保存在4℃冰箱中两个月，以备复检、谈别和仲裁。保存期满后，需经灭菌处理。
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硫酸镁(MgSO,7Fl20)
磷酸一氢（KI,P）
磷酸氯一钾(KO,)
氯化钮(KCI)wwW.bzxz.Net
硝酸铵（NILNO）
硫酸锌(ZnS0·7H.0)
硫酸铁[FcSO)
硫酸锰（MnS7H,0)
以1灿水至：T.,常规灭萄。
附录A
（规范性附录）
修改的 Nn. 70 的培养基
孟量/g
附录B
（资料性附录）
病原菌的形态特征图
病原菌的形态特征图
附录C
(资料性附录）
棉花根腐病菌的分布范围
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该病原菌现分布丁美国(西南部9个州，即得克萨斯州、新墨西哥州,亚利桑那州、阿肯色州、犹他州、内华达州、俄克拉哈马州、路易斯安那州和加利福尼亚州）及墨四哥、飞四、前东联，印度、巴考斯坦、索马单、多米尼圳关和国等。
(资料性附录）
高度感染和抗病植物
D.1高度感染植物
Abhelia grandifiora Rehd, + Acacia neriifotiu Cunn. , A. pendule Cunn. , Ailanthus altissima(Mill. )Swingle: Althaeaficifotia (L, ) Cav,, A, rosea (L,) Cav, : Azethum graveriens L, :Arachishypogaea l.iArmoracia rusticana Gacrtr.Mcy.& Scacrh.Asterspp., Beta wuigaris L.Bignonia rrecediana Lind.. (Doxuntha unguis-cari Rehd. Hroussoneria bapyrifera (l..) Vent. t Bud-dleia datidi Franch. , B. asiaticu Lour.;Cannabis sativa I.; Capsicun frutescens I.. Cardiosper-mum haicacabun L. : Cuiulpt spericsu Warder;Ceratonia siliguu L.; Cercis chinensis Bung, C. uc-cictentulis Torr. ; Chrysnthemum nncimm Ram. C. morifolium Ram. ; Cinnamonum camphoraNees. & Eherm. ; Citrus medica L. ; Convolvulus repens L. ;Catoneaster pannosa French; Cydouiajaponica Pers., C. utgaris Mill. ; Dahliu ruseu Cav. ; Daucus carota L. vezf. sativa DC. : Diuspyrpskaki L.f.;Elaeagnusargentea Pursh,:Eschschoiteia californica Cham,:Euanymus japanicus IEuphorbia puicherrimu Willd. : Ficus carica L.. : Gaillardia aristata Pursh, : Ginkgo bioba IL. :Gledilsia triaranthns I, : Glyeinp mar: Merri'l; Gossypiun harbadense I.. G. hirsutum I : Gre-mlle rmhnsin Cunr. : Heliamihnx tubproshx I. : Hibisru exlpmtus I... H. Sduriffu I.. : Iponuer.ullu. (I..) Larn. Lrurphylun trxumun Benth.+ Ligusrun mnurere Carr. T..japonieunThut:b., L. nepulense Wall., L.owlifotiun Hassk., L. sinerse Lour. : Medicugu salisw L. : Meliaazedurach L., M, uzedurach L, var, unbracuiiformis Berck, ; Metitotus atta Iesr, . M. utbu var.anmua Cot,: M, intica (L, ) All, , M. gficimnutir Lall.; Mirubiis jalaiu L. ; Morus atha L. var.taturiea Loudant Nandim domesticu Thurb. ; Passifiora caerulea L. ,Pastinaca salira L. : Perseagratissima Geeril. f. + Phaseulusacutifotius A. Gray var. latifolius Freern. .P, zulgaris L, ; Piltasporum lohtra Ait. Populus alha var. pyramidalis Bunge, P. arizonica Sarh,, P. delloidesMarss., P. eugenei Hart. tx t, Koch, P. fremantii S. Wats. , P. fremontii var. mardougallitJepson, P. jackii Sarg. ,P. nigra I. var. italicu Du Roi; Prunus anygdaius Batsch. . P. armenia-ca L. : P. communis L. P nalus L.,Quercus suher L. Rheun rhaponicum L. Ribes ulgareLerm., Riciuus cunmhmis L. i Rubinia pseuduactciu L. : Rost muitiflora Ihunb., R. odoratu; Ruhus spp. , R. ulnifolilts Scholl. ver. inermis Foche, Salix huhylonica L. , S. nigra L. :Supium seb-iferum Roxh, : Schmts mole L. , S. terebinthifoiu Rarddi; Spartiun junceum L, :Spiraed uanhouiIei (Brint) Zahel; Stereulia diversifolia Don, + Syringa ehinensis Willd, - S. persica I. S. Vulguri.I, : Tragia sp+: Tragopngon porrifnlius I. ; Umhs ainericina I.+ U. puruifoita Jaca+ tl. puni-lu I.. : Vigmr sinrusix Endl., : Vitis latrusrm. I.., V. rinifrru L. +: Zizylphus jujulm Mill.SN/T 1356—2034
D.2易感染植物
Acer interior Bri.on, A. negundo L. : A. pseudopiatanus L.: Aieurifes furdii Henisl. Anurent-hus bliloides S. Wats. , A. caudalus I..+ A. h. yhridus I.. var. hypnchondriacus (I..) Bailcy, A.puniculutus I.. A. tricolar I.. Arnbrusiu cunferiftora DC. : Amurpha Jruticosu I. Arupelupsisquinquetifolia Michx, ,Antigonen lepiogpus llook, &. Arm.; Aquitegia canadensis L. : Berberis thunbergii De, t Boerhauvia sp, tBoussingaultia hesellaides H. B, K. Buddleiu asiatica Lour. , B. davidi Franch.: Caesulpinia gilliesii Wall. ; Calendula officinalis l.. ; Callishemon rigidus R. Br.:Culonyetio cuteatum (L.)IIolse: Carugana arborescens Lun.: Cardiustermm haticucahum L.ChrVa ilinoensis (Wang.) K. Kocl; Cassia arlemisioides Gand.: Casuarina cunninghaniana Mig.:Cminlpu speeinsua Warler+ Ceitis swrdelfalzs L, + Centauhernun cinerarfuiarmTrev.)Vis..CicerarietinumL,+Cimmomu
uhusI.., C. nuxhle I. + hrysamatimurm Ranond, C. morifoliun. (Rarna:.) He:tnsl.mphora
Nees. &. Eherr. ; Citruttus rulgaris Sehrac,:Citrus auraniinmt I.. ,C. niedica I.. , C. mtitis Hlanco; Coreupsis tinetoria Nutt. Costnos bipinnarsCay. , C. sutphureus Cav. , Crotatarie junceu L.i Curumis melu L.'s C. neio L. var. iodorusNeud., C. safirus L. : Cucurhita naxima Dene. : C. mpschata Dene., C. pepe L., C. pepo var.melopepo (l.) Alef. : Cupresus arizonica Grcenc, C. macrocarpa Ilartw. cx Gord, , C, senperw-res I.; Cyumupsis teirugemoeba (l..)Tab.; Cyra scotymus L..:Fetphimium ujavis T.;Dian-thus turhalus L. , D). caryophytius L, : D. chinensis L. : Diospyrus virginiana L. ;Dotichos tubtatL, Dozantha unguis cati (L.) Rehd. ; Eleagnus angustifolia L, : Lucaiyptus polyanthema Seaauer. , F. rostrata Schlecht., E. rudis Encl. : Feijoa selioteiana Berg. Fraginus pennsyhranicaMarsin. vur. tanceotata (Borsh.) Surg. , F. velulinu Torr. + Gaillardiu aristalu Pursh. , G. pulchel-la Foug, + Gymnocladts dioicu (L., K, Koch: Gypsophiu eteguns Bieh, : Hedera helia I. : Helianthus annuus I , H. nnximilianii Scirad. ; Inpatiens balsanina I, : Ipnmoe hedericea (I, J Jacq.I. Purpureu (l.. ) Roihrt Jucarunda mirnosuefotia D. Dhot. ; Jusmiun fleridur Bunge, J. grundi-florum L, + J. humite L. ; J, primulium llensl, ;Juglans caiifornica Wals, + J, major Ilellel, J.nigra l. : J. regia l.: J. siehaldiana Maxim. t Juniperus chinensis l. var. pfiteeriana Sparth.J. pachyphioea Iorr., J. scopulorum Sarg. : J. tirginianu I.. , Kochia scoparia (l.. ) Schrad. var.trichophylla Buiey, Koelreuteria puniculata Luxrr. i Lugerstrveniu indicu L. Luntunu ramara L.I, selloruiam Link & Otto; Lathyrus ndoratus I; Lavandula spicata I.: Leeophylium teranumBenn. :I.igustru juiuuirw Thunh. , I.. ueidun Ai.. , I.. mepuirnsp Wall. , I.. mmmlifoliun Has-sk. : Lippia cawesceus H. H. K. ; Lonvceru jupunica Thutb. : Lyepersicon esrulentr Mill. + Muciu-ra pomifera (Raf. ) Schneid. Magnotia grandijioru L.; Matthiota incana (L. ) R. Br. ; Medicugoarabica All. Morus alba I. . M. alba I. var. tataricu tI. ) Ber. Myrtusconnunis L, , M. commu-mis L. var. nicrophilia, Nandin donesticu Thunb. ; Nerinm uleancter L. Nigella damuscenu L.Oenothera rosea Ai.; (lea eurupaea L.; Opuntia spp.+ Papuver rhoeas L. P. sonniferum L.Parkinsnnia euieata I + Partheniun argrntattm Gray: Fasiflnra caerula I,+ Phasenus auteusRaxb. Pitsrumtenra Ain. Ptatansdentatis I..P. rientatis I.., P. wrightii S. Wais.;Poreirus irifutiuiu (L, ) Ref, ; Poriuiact grandijloru Hook,: Prurus anerictnt Marsh, , P. domestica L,P. laurucerasus L. Pueraria thunbergiana (Siebh, &. Zucc.) Benth, Punica gruvatumI, t Pyracantha angustifulia (Franch,) Schneid. , P coccinea Roem. var. laiandii Dipp.: P. cre-zutata (Roxb.) Roerr. : P. gibtsi A. B. Jacks, var. yuwanensis Osbofr: Quercus suber L. Ritesanericanum Mill, : R. sativun (Reichb.) Symc; Rubus idaeus L. vel. strigosus (Michx. M:xir. :R. luganobaccus Bailey, R. strigusus Mienx. rat. idacus I.. : R. uianijolius Stho. vat. inernis(Wild. ) Focke; Salua officinalis I. ; Seabinsu atropurpurea I. ; Sesamuan orienrale L. , Sesbaniacannahina (Retz. ) Poir, S. macrocurpa Mual. (exruttutu); Sntanum melogena L. : S, rostratum DuSN/T 1356—2004
fral, S. tuberosum L. ; Sopherujapoica L. Stiaolobiun utile (deeringiunum Baft): Tumarit artic-uiata Vahl. , T. galtica L. : Tecomaria tapensis (Thunh,) Spach., Thuju orzentalis L, : Tithanirntunedifniia (Mill.) JBlake: Trifolium repens I. : nhs trasstfoiia Nutt. ; Verbena canadensis(L.) Brit.on:Viter agmus-rastus I. :Wislarin flerihunda (Willd) Tc. + Zinmiu eleguns Jacg.D.3抗病植物
Acacia farnesiana (L.)wille.;Agave americana L.Aitium cepa L..A.satiuum L.; Aiyssummaritimum Lar. + Amaranthus alhus L. + Amar'yllis spp. + Amorpha fruticosa L.. : Antirrhinum maius l..Argenome sp. Arundo donax I.; Asparagus officinalis I..; Aster sbinosa Henth.; Atri-plex erighti: Avua saliuu L.: Banbusa spp. ; Cunwa indicu L. ; Caragnntl urborescens Lam. Ce-losia argentea L. vur. eristata Kunize: Ceitis australis L. Cercidium floridun Ben:h. ; Chitopsislinearis (Cav, J: Coieus blumei Benth, :Cndaliu lycioides var, cunescens (Gray); Carduline austrulisHook. : Cortaderia argentea Stepf. : Crinum spp. ; Crnehs spp.: Cyndon dactyinn (I.) Pers.:Cyprrus aliernifolius I. C. pnpyrus L. + Dusylirion whrrleri S. Wals. : Dinsnu rrixnidex I.+Fehiroyistis tuoula (Mienx. ) Tort. &. Gray: Eleagus angustifolia I.. : Frodium cicutareun I. Her.E. jeranum Gruy,Erytheu urmata S.Wals,; Euculyptus rostraiu Schlechi.,E. rudisErdl, ;Luphorbia athonurgiuta T, &. G, + retjoa setozeianmu Berg, : Fragaria chiloensis Luchesnevar. ananassa Bailey, Gladiotus spp. ; (nmphrena giobosa L. ; Gutierrerzia lucida Grecac, Gypsophfla panicuiata I..; Heiichrysurn bracteatun Ndr.; Hordeum vulgate I.; Hyacinthus orientalis I.:eris umara L., I. udorata L. ; Iris gcrmauica L., I. versicolor L. Jasminum fluridum Bunge.:J. grandifiorum L. + Juniperus chinensis L. var. pfitzeriana Spaeth. , J. pach. tphioea. J. scupu-lorum Sarg.: Kallstroemid hirsutissima Vail, Lagenaria leucanthu Rusby; Lepidium upetalunWille. ; Lilium longiflorum Th:inh, : Inbularin maritima (I.. ) Desv. : Luffa acutangula Roxh. :Iyrium sp, + Malnmisoux rmzutti Grenri. : Marrunum uignre I.+ Mnthu rundifoa (.)Huds. , M. siiculu T.. : Merwrdia raisunina I. : Musu ensete Cirnel. ; Narcisss jnmuitlu I.., N.tazetta L. var, orieniulis, Nepeta catariu L, , Nerium oteander L. Opuntia artuscid Engelr, :Oraiis rubra Si. Ilil. ;Parkinsoma aculeata L. Petargonium spp. ; Petunia hyhrida Viln, : Phtordrumnmondii Hook. t Phoenircanuriensis Chabaud, : P. dactylifera L.; Pharmium tenar Forst,1Piatanus turightit Wats. Polianthes tuberosa I : Prosupis veiutina Woot. ; Punica granaturm I.:Pyracunthu gibbsii A. B. lacks. var. yunnanensis Osborn;Reseda udorato L. : Rurippa unsturiiunaguuticum (L.)Schinz &Thell.,Rosemarinusofficinalis L.;Rumez acetosella L.; Salvia azureaLem., S. furinaceue Bensh, : Sambucus raeruled vel. arisonica Sarg. ; Secalecereale L,: Setariuitalica (l. lcauv. : Simnndsia californica Nitt. : Sorghum halepense (I. ) Prrs.: S. ulgaresudunruse (Piper) Hi.che. ; Trurhyrurpus errelsa H. WeQll. + Trnrdesrantin Fluninensis Vell, + Trih-aulus terrestris I. Triti:urn vudgare Vill. (uestiun L. ); Trupueciun mujus I., T. ruins I.. : Tu-lipa gesneriunu L,; Verbenahybridu Voss, : Vinca major L,+ V. roset L.: Viotu dorata L. , V.triculrr L, Washingtonia filifera (Linder) Wendll, , W, rubusta Werdl, Yucea aloidotia L. + Y.recurifilia Salish. t Zantedeschia elliulliana Engler, Z. aethiopica Spreng. t Zen mays l.SN/T 1356-2004
心华大民共和户人境检验检疫
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棉花根腐病菌检疫鉴定方法
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