【国家标准(GB)】 石鲽

ICS 65.150
中华人民共和国国家标准
GB/T 22913--2008
2008-12-31发布
Stone fiounder
2009-05-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提山。前
本标准由全国示产标准化技术委员会海水养殖分技求委员会归口。本标准起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所。本标泄主要起草人：张岩、刘受红、肖永双、下丽。:
合品伙伴区
ww.foodmate.net
CB/T 22913--2008
1范围
GB/T22913--2008
本标准规定了石媒（Kareiusbiroloratus）的主要形态特征、生长与繁殖、遗传学特性，以及检测方法。
本标准适用于有的种质检测与鉴定。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注口期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准：然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新腋本。凡是术注期的引用文件；其最新版本适用于本标准。GB/T18654.12养殖鱼类种质检验：第12部分：染色休组型分析GB/T19782中国对虾
GB20556·2006三疣梭子燃
3名称与分类
3.1学名
石巢Kareius bicutoratusBasilewsky,18553.2分类位置bzxZ.net
媒形月（Plcuronectifornes）、科（Pleuronectidae）亚科（Fleuronectinle），石属（Kareius）4主要形态特征
4.1外部形态特征
体长韬圆形，背胶缘凸度相似，尾柄长与高相近，：头部背缘在上眼前缘上力有一四刻，大鱼有粗骨质突起，前端延向两眼前缘，前身有借状皮突起；右算孔位眼叫隔前端吻右侧，在象孔约位上眼前缘中央头左侧。两颌左侧略长，右上额约达下眼睡孔前缘下方。口闭时下颁微突出。有--下额突起。两颌有扁牙一行，牙端截形，前鳃益后缘外露而不游离：鳃孔上端略过胸鳕基，鳃峡后端距眼较距崩盖骨后缘近。
小鱼皮内埋有退化的小鳞。成年鱼无鳞，在体右侧沿侧线及侧线与背、腹缘闻各有一纸行粗骨板，下方两行骨板较小；在侧除侧线前方头部有纵行粗骨悸外，常无粗骨板，仪少数在侧线与背缘间有纵行分散的小骨板。左右侧线无明显的弧状弯Ⅲ部，题1枝短，药达第6背鳍条附近；有眼下枝：背鳍鳞条不分枝，后端鳍条很细小。鳍形似背鳍。第一间脉辣突出：右胸鳍小刀状，第4鳍条最长，中央6鳍条～8销条分枝；左胸鳍圆形，中央无或有1糖条～3鳍条分枝，长约为左胸鳍4/7～3/4。腹鳍基短，近似对称，鳍条不分校，第3鳍条最长，约达臀鳍始点前后。尾鳍网截形，中央11鳞条~13 鳍条分枝。
头体右侧黄褐色骨板微红，鳍橙黄色，尾鳍较嗜。体侧及鳞上常有自斑。石鳞的外部形态见图1
GB/T22913—2008
4.2可量性状
可量性状实测比值见
限间距
长/眼径
可数性状
背鳍缩式
韓蟾式A.
胸鳍鳍式
酸鳍鳍
尾鳕鳍式：C
谢线鳞：74
鳃数：3~-5-
-54。
图1石鲽的处部形态
表1可量性状实测比值
牙式:10-～11+
16 ---15~-25
脊骨致为11+2
生长与繁殖
5.1牛长
72.4.--36.
4. 7--.6, G
石生长方程和抹长休重关系参见附录A。右媒的体长与体重的实测值见表2。表2石鲽体长与体重的实测值
体长/ea
体重/8
体长/cm
体事/
TKAoNTKAca=
http：
wrwwfoodmate.net
体长/cm
体重%
体长/cn
5.2繁殖
性成熟年龄
有雌鱼和雄
繁殖期
石唇子秋兰
育，10以下可
繁殖力
石蝶性成泉
产卵期的产即量
遗传学特师
.细咆传
石蝶的染
体熏/g
最熟年
型产卵鲨
成熟排卵
办批多咨产
可达0.73
表2（续）
体长/cni
体重/g
.89.70
.石蝶的染色体核型
bt
体长/em
秋率水幕在
CB/T22913—2008
体重/g
以下性腺开始发
量为2.8×量粒-32×10+粒，
型究图2
GB/T 22913--2008
6.2生化遗传特性
石肌肉乳酸脱氢酶（1.I)H)同工酶心泳图谱见圈3，表现为一条带201314
图3石鲽肌肉LDH同工酶电泳图谱6.3分子遗传特性
采用JNA序列分析技术，对石的线粒体16S-RNA（核糖体16S1RNA）基因片段进行TPCR扩增和序列测定，16SrRNA券因片段序列见图4。TEGCGTAACC
GGTAT TTIGA
AIGGCATAR:
CAGAAGOGGG
GACCATETCA
CGETTGGGC
TacT TGrTr:
GAT：HTAA
TAGAGGCCAT
Trra, o
7检测方法
7.1繁殖力的测定
ACACI AERRG
CCOTO CAAAG
GA GGGCTTAA
NT：A
T, chanc
AMUGG ATCL
ATEGACAAGG
Arm rs
HGTC CCSCC
GTAG:GTAAE
CTGTCTCCTT
TAAGA CORO
CHGMGChiCh
CCAC CUr:
STT TACGA
-TGTGCA
TGGCr AF-TCA
CACTTGTCTT
AGACCCTAT:
CGMC TARA
GcroAacan
maa:TacanG
CCTCGAGT:
GLCTTAGTT
TTAA MTGAA:
ASGAAMTTSA
mrrT TTaGt
AAARECAPSS
GCHETHATTC
ATAACGCGE
图416SrRNA基因片段序列
CAACGGCCHE
HC: IRTT ASGA
TC TCCC CGTG
CGAC GTS
TTSAT GTGTT
CACC CTAAG
TGACC AAACT
AATOG XITT
ATCCT AATGG
用大平或杆粹称产哪前，后唯亲血的更量，前后两次称重之差即为产卵的罩量。用电子平称刚产出的卵1.0g左石，在解剖镜下计数，平行两次，平均值为卵缩度（粒每克）。产卵最按式(1)计筑。G=(r--z)(n/2xi-/-nz/2upmz)
式中：
产量，单位为粒；
产卵前亲鱼重量，单位为克(g)；产卵后亲鱼重量，单位为克()；试样1的卵粒数，单位为：
试样1重益，单位为克（）；
试样2的卵粒数,单位为粒；
试样2重，单位为克(g)。
7.2染色体及核型
染色体及核型的测定按照GB/F18654.12的规定执行7.3生化遗传学特征的测定
7.3.1样品制备
--（1
活体或低温样品带回实验室。取肌肉密封放人趋低温冰箱（一76℃）或液氮罐中贮存。将部分组织(约0.5g)取山放人玻璃勾浆器1加入等体积双蒸水或1.：1(体积重量比）的0.1mol/L磷酸缓冲4
TKAONTKAca=
http://foodmate.netGB/T 22913-2008
液（pH7.0)<配制方法见GB20556—2006附录A）冰水浴中匀浆后，倒人1.5mL离心管内，在0℃4C冷冻离心机中，以15000r/min离心15min，离心后取上清液作为电泳样品，7.3.2电泳分析
采用淀粉凝胶电泳方法，凝胶浓度为12%；电泳缓冲系统为TC，pH7.0(配制方法见GB20556-2006附录A，恒流（电压大小为8V/cm）电泳5h～61。电泳过程在4℃冰箱中进行。凝胶厚度为6mm，电泳后切成4片～5片进行染色，染色过程在37℃恒温箱中进行，染色液的配制按GB/T19782的规定执行。
7.4分子遗传学特征的测定
7.4.1DNA提取
收肌肉纽织.尽量剪碎，用IDNA提取试剂盆或常规龄法提取基因组DNA.TE辫解后20℃C保存备用，TE溶液的配制见GB20556—2006附录A。7.4.2PCR扩增
7.4.2.1：引物
引物16$AR/BR序为：16sAR：5'GCCTGTTTATCAAAAACAT316sBR：5'CCGGTCTGAACTCAGATCACGT3'
7.4.2.2PCR反应体系
25μLPCR扩增反应体系内含：2.℃mimol/L氯化镁（MgCl),o.2mmol/L每种dNIPs，0.2mal/L每种引物，30ugDNA模板，1单位Tag酶，及1X缓冲液。7.4.2.3PCR反应程序
94预变性2min，然后94℃45s,50℃1min，72℃1min，使用热益，循环35次，最后72℃延smiu
7.4.2.4结巢的记录
PCR产物1.4不琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像系统观察、照相。7.4.3PCR产物克隆
PCR产物经回收纯化后，连接到PMD18-T载休上：谁接反体积10，其中载体1μL，连按酶I5L，PCR产物4μ,16℃连接1h或C过夜，然后连接液转化感受态大肠杆菌，涂平板，蓝-斑筛选阳性克降，液体培养基培养，提纯质粒后用EcoRI和Hind山酶划检测有无拥人片段。7.4.4序列测定
对回收质粒进行测序反应，产物缅化后在DNA测序仪上测序；为保证测序的再靠和谁确性，深用双向测序，并进行人工核对、校正。8判定规则
被捡样品符合第4章、第6章要求的为合格样品。bt
GB/T 22913--2008
A.1石鲽生长方程
附录A
（资料性附录）
石媒生长方程和体长体重关系
石媒的生长可用Vun-Bertalan[[y生长方程表示，通过对黄海、动海沿岸拖网调查取得的293个样品的回归分析,石蝶的生长方程式见或（A，1)～式（A.4)。早，L，=497.281e t.26kr-a.7a...(A.1)
含 :L - 365. 42[1 —e 0.410-5. W 早+, = 197. 28[1 — e-0. 85k6-0 + 3 18含 : 2; - 365. 42[1 e-2.418 0.73式中：
,体长，单位为毫米()；
体重，单位为竞(g)；
年龄,单位为龄；
497.28--系数；
系数。
A.2石蝶体长体重关系
...(A.3)
通过对黄海、激海沿岸拖网调查取得的293个样品的回归分析，不麒的体长、体重关系见式（A.5）我(A. 6)。
于 + -- 0. 005 1L*8
含 =7u = 0. 014 4L3.03
式中：
鱼体体量，单位为克(g);
位体体长，单位为米（crm）：
0. 006 1—系数;
0. UI4 4-
系数。
TKAoNTKAca=
http://foodmate.net( A.b)
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