【农业行业标准(NY)】 农药室内生物测定试验准则 杀菌剂 第13部分:抑制晚疫病菌试验 叶片法

ICS 65.100
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 1156.13-2008
农药室内生物测定试验准则
第13部分：抑制晚疫病菌试验
杀菌剂
叶片法
Guideline for laboratory bioassay of pesticidesPart 13:Detached leaf test for fungicide control late blight [Phytophthorainfestans (Mont.) de Bary] on potato and tomato2008-05-16发布
2008-07-01实施
中华人民共和国农业部发布
《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》为系列标推：第1部分：抑制病原真菌孢子哺发试验凹玻片法；第2部分：抑制病源真菌菌丝生长试验平血法：一第8部分抑制黄瓜霉菌病菌试验平Ⅲ叶片法；一第1部分：防治小麦自粉病试验盆裁法；第5部分：抑制水稻纹枯病菌试验蚕豆叶片法；第6部分：混配的联合作测定；
第7部分：防治黄瓜霜露病试验益栈法；一第8部分：防治水稻韬瘟病试验盆栽法；一第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片法；一第「O部分：防治灰病试验盆裁法，一第11部分：防治瓜类白粉病试验盆栽法，…-第12部分：防治晚疫病试验盆找法；-第13部分，抑制晚疫病菌试验叶片法；第14部分，防治瓜类炭疽病试验盐校法；第15部分：防治麦类叶锈病验
金盆裁法；
第16部分：抑制细菌生长量试验浑汕度法；www.bzxz.net
本部分是《农药室内生物测定试验准则杀菌剂》的第13部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口.本部分起草单位：农业部农药检定所。木部分主要起草人：张薇、朱春丽，徐文平、昊新平、袁善奎、刘学。NY/T1156.13—2008
1范围
NY/T 1156.13—2008
农药室内生物测定试验准则杀菌剂第：13·部分：抑制晚疫病菌试验，叶片法木部分规定了叶片法测楚杀菌剂抑制晚疫病菌生物活性的试验方法本部分还用于农药登记用杀菌剂对备站和马铃普晚疫病菌的室内生物活性测定试验2仪器设备
普通实验案常规仪器设备。
2.1电了天平（感量0.1mg）。
2.2喷雾器械。
2.3人工气候箱或光照保湿箱：
2.4生物培养箱。
2.5移液管或移液器等，
3试剂与材料
方法所用试剂.凡未指明规格者，均为分析纯；水为蒸罐水。3.1生物试材
供试病菌为野生敏感型致病疫霉Phytophthoraznfestans(Mont，）deBary菌株。记录菌种来源。供试作物为感晚疫病番茄或马伶薯品种，在盆裁荫上选择相同叶位、长势一敛的叶片，从叶柄1cm~~2cm处剪下，用湿棉球包裹叶柄放置培养血中，保湿备用。3.2试验药剂
原药（或拇药）：
3.3对照药剂
采用已登记注册且生产上常用的原药（或母药），其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。
4试验步骤
4.1孢子离悬浮液制备
将试验用病原菌在适宜的培养基上培养，或将病组织保湿培养，待产生孢子囊后，用无菌水洗下孢了，用双层纱布过滤，制成抱了愛悬浮液，置于4℃低温下，黑暗处理0.5h～3h，使其释放出游动孢子，并调节孢子浓度至1×10°个孢子/L，各用，或直接配制1X10°个孢子/ml.悬浮液作为接种体4.2药剂配制
水溶性药剂直接用蒸馅水溶解稀释。其他约剂选用合适的溶剂（甲醇、丙酮、三甲基甲酰胺或二中基亚磁等)溶解，用0.1%的吐温-80或其他合适的表面活性剂水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个～7个系列质量浓度，有机溶剂最终含量一般不超过0.5%～1%。制剂可以直接用水稀释。4.3药剂处理：
将药液均匀喷施于叶片背面，待药液自然风于后，将各处理吓片背面朝上，按处理标记后排放在保1
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湿盒巾，每处理不少于10片叶，次重复，并设只含溶剂和表面活性剂而不含有效成分的处理作空白对照。
4.4接种与培养
用孢了囊或游动孢子悬浮液喷雾接种，保护性试验一般为药剂处理后24h左右进行接种，治疗性试验一般在药剂处理前24h接种。接种后在角天连续光照/黑暗各12h交替（光照强度5000Lux~20000Lux）、温度为18℃~-20C，以及接种后2h内保持叶面有水膜，以后相刘湿度为90%以上的条件下培养d~7d。
4.5调查
待空白对照病叫率达到50%以十时：分级调否各处理发病情况：分级方法为：0级：不发病；
1缀：叶片上仅有少量小病斑，病斑占叶而秘10还以下；叶片上病班占叶面积10%--25%；3级：中
叶片上病斑占叶而积25%～50%；5级：口
7级：叶片上病斑占叶面积50%以上；9级：全叶发病枯萎。
5数据统计分析
5.1计算方法
根据调查数据，计算各处的病情指数和治效果。5.1.1病情指数
按公式（1)计算，结果保留小数点后两位x=
式中：
病情指数；
N.—各级病叶数；
柜对缀数值：
N-—调查总叫数。
5.1.2防治效果
E(N,Xi)
按公式(2)算，结果保留小数点后两位。P CK-PT
戎中：
P一防治效果,单位为百分数(%)
CK-空白对照病情指数,
Pr-—药剂处理病情指数。
5.2统计分析
用DPS(数据处班系统）、SAS(统计分析系统)或SPSS(社会科学统计程序)等标准统计软件刘药剂涨度对数值与防效儿率值进行回归分析，订算各药剂的ECsc、EC等值及其95%置信限，并进行各药剂处理间的差异显著性分析。
结果与报告编写
根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告.
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